河南省新鄉(xiāng)市食品藥品檢驗(yàn)所（453000）常?，?/p>

核磁共振用途廣泛，尤其集中在化學(xué)、食品、醫(yī)藥、環(huán)境監(jiān)測(cè)等行業(yè)。其中藥物分析鑒定不僅在核磁共振技術(shù)的進(jìn)步中受益，也推動(dòng)了該技術(shù)的發(fā)展[1][2]。值得關(guān)注的是，核磁共振技術(shù)在異構(gòu)體的鑒別方面相比色譜、質(zhì)譜等方法有著巨大的優(yōu)勢(shì)。同時(shí)，該檢測(cè)技術(shù)對(duì)原材料的消耗低，樣品在制備好試劑之后可無(wú)損回收再利用，在綠色發(fā)展當(dāng)中也起到了作用[3]。在本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展核磁共振技術(shù)鑒定分析藥物的基礎(chǔ)之上，通過(guò)本研究中無(wú)標(biāo)識(shí)藥物樣本的具體實(shí)例介紹該技術(shù)的應(yīng)用研究狀況，以期為該技術(shù)的應(yīng)用提供參考。

1 一般資料

選取市面上搜集到的一種未在外包裝上標(biāo)明藥物成分及含量的一種“頭痛膠囊”，由相關(guān)部門(mén)提供該藥物的樣本，該樣本特征具有一定的代表性。

2 方法

2.1 檢測(cè)方法 稱(chēng)取3.00g該藥物粉末狀的樣本，將其溶解于50.0ml甲醇（分析純）中，經(jīng)超聲提取半小時(shí)后過(guò)濾、冷凍干燥，稱(chēng)得提取物1.78g。稱(chēng)取0.0490g該物質(zhì)移至直徑5mm的核磁管中，以1.2ml氘代甲醇定容、封口，得到樣品TT。先由25℃下的1H NMR實(shí)驗(yàn)得到其大致組成，再獲取其他的核磁共振譜圖進(jìn)行成分鑒別，最后定量分析。

2.2 所用儀器 采用德國(guó)生產(chǎn)的AVANCE DRX型號(hào)的超導(dǎo)核磁共振譜儀，頻率為500兆赫茲；1HNMR實(shí)驗(yàn)采用zg30脈沖序列，弛豫時(shí)間為6秒；依據(jù)操作說(shuō)明由專(zhuān)人測(cè)定。

3 結(jié)果

1H NMR實(shí)驗(yàn)顯示TT為混合物，通過(guò)譜線特征看出有糖類(lèi)、芳香族化合物。擴(kuò)散排序?qū)嶒?yàn)（DOSY）顯示TT中有四種化合物，標(biāo)記為T(mén)1、T2、T3、T4，其擴(kuò)散系數(shù)（單位：m2?s-1）分別為5.20×10-10、5.35×10-10、8.20×10-10和8.30×10-10。結(jié)合HSQC譜進(jìn)一步確定T1、T2的質(zhì)子和碳的共振信號(hào)符合糖類(lèi)表現(xiàn)，在糖類(lèi)以外的區(qū)域內(nèi)未見(jiàn)明顯信號(hào)，因而T1、T2為糖類(lèi)。T3、T4在1H NMR中出現(xiàn)相耦合的雙峰信號(hào)，此為苯環(huán)的對(duì)位取代基團(tuán)結(jié)構(gòu)，綜合附表所示信號(hào)歸屬確定其為對(duì)乙酰氨基酚和布洛芬。在經(jīng)校正后，利用1H NMR譜和溶劑內(nèi)-CH3的殘留質(zhì)子作為內(nèi)標(biāo)，以δ氫=3.31和積分面積=3為基準(zhǔn)，獲取T3、T4的分離譜線的積分面積，計(jì)算得出每3.00g樣本中T3（對(duì)乙酰氨基酚）含量為0.67g、T4含量（布洛芬）為0.25g，分別占樣本總量的22%和8.3%。

附表 T3、T4的核磁共振信號(hào)歸屬

4 討論

核磁共振技術(shù)對(duì)物質(zhì)結(jié)構(gòu)的解析主要依據(jù)為譜線的強(qiáng)度與其誘發(fā)的核子數(shù)成正比，這一規(guī)律被認(rèn)為是基本比例測(cè)定方法的依據(jù)，也使其解析力十分強(qiáng)大，而且曾經(jīng)因?yàn)殪`敏度不高對(duì)其發(fā)展有所限制，但隨著磁場(chǎng)強(qiáng)度的提升、更加靈敏的探頭的出現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)方法的進(jìn)步使得這一弱勢(shì)逐漸消減。本研究順利實(shí)現(xiàn)對(duì)未標(biāo)識(shí)藥品的定性和定量測(cè)定，測(cè)出“頭痛膠囊”的有效成分為對(duì)乙酰氨基酚和布洛芬，且其含量分別為22%和8.3%，此外的兩種化合物分別為糖類(lèi)，因其非有效成分，故不再做進(jìn)一步鑒定。通過(guò)此結(jié)果與臨床其他藥物進(jìn)行對(duì)比，可為人們安全用藥提供了保障，具有很強(qiáng)的應(yīng)用價(jià)值。

隨著這些年來(lái)研究人員對(duì)定量檢測(cè)關(guān)注度的提升，核磁共振相關(guān)的報(bào)道諸如新藥開(kāi)發(fā)、鑒定、評(píng)估及質(zhì)控等日益增多，這些報(bào)道背后的研究工作擴(kuò)展了核磁共振技術(shù)在醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的應(yīng)用。綜上，核磁共振技術(shù)有多種方法可選擇、準(zhǔn)確、可給予研究人員多種待測(cè)物的組成信息。