江小萍，曾凡鵬，劉首明，林小鴛，馮素蓮，沈祖泓

三七總皂苷對血脂異常的動脈粥樣硬化患者血清超敏C反應蛋白的影響

江小萍，曾凡鵬，劉首明，林小鴛，馮素蓮，沈祖泓

目的：探討三七總皂苷對高脂血癥的AS患者血清hs-CRP、 SOD、GSH和頸動脈內(nèi)膜中層厚度（CIMT）及斑塊的影響。方法：將71例CIMT≥0.9mm或（和）有頸動脈粥樣硬化斑塊的高脂血癥患者隨機分為三七總皂苷組和阿托伐他汀組，采用酶聯(lián)免疫法及彩色超聲顯像儀等，觀察兩組患者用藥前后血清hs-CRP、SOD、GSH、CIMT和斑塊的變化。結果：兩組患者服藥12周血清hs-CRP、CIMT和斑塊積分較各自服藥前明顯降低（P＜0.05，表2），SOD、GSH較各自服藥前明顯升高（P＜0.05，表2）差異有統(tǒng)計學意義；兩組患者用藥過程中出現(xiàn)的不良反應比較（P＞0.05）差異無統(tǒng)計學意義。結論：三七總皂苷能抑制高脂血癥的AS患者CIMT及動脈粥樣硬化斑塊增大，延緩AS的進展，其機制與其降低hs-CRP表達有關。

動脈粥樣硬化；三七總皂苷；超敏C反應蛋白

炎癥反應貫穿于動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展、變化的全過程，并在很大程度上決定著動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性[1]。超敏C反應蛋白（hs-CRP）作為炎癥反應的重要標志物，是導致心血管疾病的獨立危險因素，可引起動脈內(nèi)膜的局部炎癥反應，導致內(nèi)膜增厚和斑塊破裂，引起心腦血管病的發(fā)生，且hs-CRP直接參與動脈粥樣硬化病變的形成、斑塊破裂及血栓形成[2]，因此降低炎癥標志物水平、控制炎癥反應是防治動脈粥樣硬化的關鍵。三七總皂甙(tPNS)作為臨床的常用處方藥廣泛應用于AS、高脂血癥及冠心病等血管性疾病的治療中，具有良好的調(diào)脂、抗氧化、抑制炎癥反應、抗血小板聚集作用[3]，但其能否抑制hs-CRP及炎癥因子表達并不完全清楚。本研究旨在觀察tPNS對高脂血癥的頸動脈粥樣硬化患者血清hs-CRP的抑制作用，以探索早期動脈粥樣硬化的中醫(yī)藥治療方法。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2012年10月至2013年12月在我院住院的血脂異?；颊?5例，其中4例病人失訪，剩余71例。將入選的71例患者按隨機數(shù)字表法分為三七總皂苷組36例（男性21例，女性15例），平均年齡64.81±12.41歲，體質(zhì)量指數(shù)24.5±4.1g/m2，吸煙指數(shù)313.5±298.1，高血壓22例，糖尿病6例；阿托伐他汀組35例（男性20例，女性15例），平均年齡64.29±13.46歲，體質(zhì)量指數(shù)25.11±3.18kg/m2，吸煙指數(shù)325.1±273.8，高血壓23例，糖尿病6例；兩組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義P＞ 0.05，具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：符合《中國成人血脂異常防治指南》[4]的診斷標準血脂異常、頸動脈內(nèi)膜中層厚度≥0.9mm或（和）有頸動脈粥樣硬化斑塊的患者。排除標準：已知或在隨訪期間發(fā)生患嚴重肝腎疾病、內(nèi)分泌代謝疾病、結締組織疾病和腫瘤的患者。

1.3 治療方法

將入選的71例患者均予飲食治療和改善生活方式等處理，對高血壓、糖尿病患者予降壓、降糖治療。三七總皂苷組：予三七總皂苷（血塞通軟膠囊，昆明制藥集團股份有限公司，國藥準字Z20040016）100毫克口服，每日3次，共12周；阿托伐他汀組：予阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，國藥準字H20051408）20mg口服，每天一次，共12周。停用阿托伐他汀警戒值[4]：血清總膽固醇（TC）＜2.6mmol/L；服藥期間出現(xiàn)肌痛同時肌酸激酶（CK）正常高限5倍、天門冬酸氨基轉移酶（AST）正常高限3倍、肌酐221mmol/L等嚴重副作用需停藥。

1.4 觀察指標

記錄入選患者的年齡、性別、體重指數(shù)、吸煙指數(shù)、高血壓、糖尿病史，并取空腹血測血常規(guī)、肝腎功能、CK、HDL-C、LDL-C、TG、TC和血糖，采血前 72h 禁酒及高脂飲食，空腹 12h 取靜脈血。

1.4.1 主要試劑與儀器 全自動生化分析儀(日立P600)；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所），彩色多普勒超聲診斷儀(GE Vivid7)。

1.4.2 檢測患者CIMT 由經(jīng)驗豐富的醫(yī)生對所有患者進行頸動脈超聲檢查。采用美國通用彩色多普勒超聲診斷儀，周圍血管探頭頻率為7.5-10 MHz，于采血前后24小時內(nèi)測量雙側頸總脈、頸內(nèi)動脈和頸動脈分叉處IMT及動脈硬化斑塊。CIMT＜0.9 mm定義為內(nèi)膜中層厚度正常，0.9mm≤CIMT＜1.3 mm 為內(nèi)膜中層增厚，以內(nèi)膜局限性突出管腔、內(nèi)膜厚度≥1.3 mm為斑塊形成指標。頸動脈粥樣硬化斑塊積分方法：測定雙側頸總動脈、頸內(nèi)動脈和頸動脈分叉處斑塊面積，將斑塊面積相加即為其斑塊總積分。

1.4.3 采用免疫透射比濁法檢測超敏C反應蛋白 全自動生化分析儀測定超敏C反應蛋白。

1.4.4 SOD、GSH測定 收集各組患者血清，采用黃嘌呤過氧化物酶法、硫代巴比妥酸比色法分別測定SOD、GSH含量，具體操作按試劑盒操作步驟。

1.4.5 觀察用藥后反應 胃腸道反應，肝腎功能，出血情況及其他副作用。

1.5 統(tǒng)計學處理 全部數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進行分析，主要統(tǒng)計指標均進行正態(tài)性和方差齊性檢驗，計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用卡方檢驗；以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

入選病人共75例，隨訪12周，資料完全病例71例，A組36例，B組35例，男41例，女30例。失訪病人4例，其中違背實驗方案，未按時用藥或中途停藥者3例；服用阿托伐他汀出現(xiàn)轉氨酶升高，終止用藥1例。

2.1 兩組患者性別、年齡、體重指數(shù)、吸煙指數(shù)、合并疾病等（P＞0.05）差異無統(tǒng)計學意義。

2.2 兩組血清hs-CRP、SOD、GSH水平，CIMT和斑塊變化：兩組患者服藥前hs-CRP、SOD、GSH水平、CIMT和斑塊積分比較差異（P＞0.05)無統(tǒng)計學意義；兩組患者服藥12周HDL-C、CK、GLU、HbA1C較各自服藥前無明顯變化（P＞0.05，表2），LDL-C、TG、TC和hs-CRP水平較各自服藥前明顯降低，SOD、GSH較各自服藥前明顯升高（P＜0.05，表2），CIMT和斑塊積分較服藥前明顯降低（P＜0.05，表1），兩組服藥前后比較差異有統(tǒng)計學意義。

2.3 兩組患者用藥過程中胃腸道反應、肝腎功能、出血情況及其他副作用比較（P＞0.05，表2），差異無統(tǒng)計學意義。

TC（mmol/L） 2.91±0.92 4.21±0.91 2.79±0.87 3.9±0.88 GLU（mmol/L） 4.81±1.52 5.11±1.22 4.79±1.27 5.04±1.18 HbA1C（%） 5.65±0.58 5.37±0.42 5.59±0.62 5.29±0.47 hs-CRP（mg/l） 5.19±3.35 23.58±6.59 5.91±2.99 21.36±5.65 SOD（U/ml） 19.85±10.39 53.39±11.61 20.11±11.29 52.78±10.53 GSH（mg/L） 41.61±15.75 87.73±13.69 43.82±16.27 89.39±12.85 CIMT(mm) 1.05±0.24 0.81±0.12 1.01±0.27 0.79±0.17斑塊積分(mm2) 2.34±0.89 1.61±0.92 2.57±1.01 1.59±0.87

表2 兩組患者用藥過程中出現(xiàn)的不良反應比較

3 討論

研究表明，炎癥反應貫穿于AS 起始、進展及斑塊破裂血栓形成的全過程，是不穩(wěn)定斑塊發(fā)生破裂的中心環(huán)節(jié)[5]。炎癥反應的激活可致斑塊不穩(wěn)定甚至破裂，血小板聚集及血栓形成，進而觸發(fā)急性不良事件。因此通過抑制炎癥反應來延緩AS 的發(fā)生發(fā)展，穩(wěn)定斑塊，防止斑塊破裂，已經(jīng)成為心血管病領域的重要研究方向。傳統(tǒng)的觀點認為hs-CRP只是一種炎癥標志物，但近年研究發(fā)現(xiàn)hs-CRP本身也是一種天然免疫分子和促炎癥介質(zhì)，主動參與炎癥和免疫反應過程[6]。hs-CRP是炎性反應的敏感指標，廣泛存在于動脈粥樣硬化斑塊中[7]。其作用原理主要有：hs-CRP可與脂蛋白結合，由經(jīng)典途徑激活補體系統(tǒng)，大量的終末攻擊復合物產(chǎn)生，損傷血管內(nèi)膜，釋放大量氧自由基、脂質(zhì)代謝異常，引起血管痙攣，導致動脈粥樣硬化的進一步加重；hs-CRP還可作用于動脈內(nèi)膜，造成血管內(nèi)皮損傷，增加血管壁通透性，導致血栓形成[8]。hs-CRP在不同物種中具有極高的同源性，且在同一物種中不存在亞型，由此提示hs-CRP具有十分重要的生物學意義。表現(xiàn)在：（1）hs-CRP可以反映動脈粥樣硬化斑塊的成分并預測斑塊破裂的可能性，是心血管疾病的獨立預測因子；（2）冠心病急性冠脈綜合征患者hs-CRP往往明顯升高，如心肌梗死患者中血清hs-CRP可以急劇上升并達到100mg/L以上，其升高水平與冠狀動脈梗阻程度，冠心病終末事件的發(fā)生及預后、充血性心力衰竭的程度等均有顯著相關性；（3）冠心病患者再發(fā)心血管事件的預測價值：研究發(fā)現(xiàn)相同hs-CRP 水平的出院不穩(wěn)定心絞痛患者再發(fā)心絞痛、心梗而再次人院的危險也很高[9]。研究[10]表明，hs-CRP是AS進程中最主要的危險標志，抑制hs-CRP水平，可降低多種炎癥因子的表達，抑制AS進展。同時hs-CRP作為一種急性炎癥因子，在很大程度上反應了冠狀動脈粥樣硬化斑塊的炎癥活動，與ACS事件的發(fā)生密切相關[11]。他汀類藥物在治療ACS中的作用已得到證實，他汀類藥物除有調(diào)脂作用、改善纖溶系統(tǒng)及調(diào)節(jié)血小板的功能抑制血栓形成等作用外，還可以減少炎癥反應的作用[11]。故本實驗選用阿托伐他汀組作為對照組，研究三七總皂苷對血清hs-CRP的影響，本實驗結果顯示：三七總皂苷組、阿托伐他汀組在治療后hs-CRP水平明顯低于治療前(P＜0．05)，三七總皂苷組、阿托伐他汀組兩組同期比較血清hs-CRP水平差異無統(tǒng)計學意義；兩組CIMT和斑塊積分較服藥前明顯降低（P＜0.05），差異無統(tǒng)計學意義。說明三七總皂苷可明顯抑制血清炎癥因子hs-CRP水平，通過抑制血清hs-CRP水平，有效抑制頸動脈內(nèi)膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大，延緩AS的進展。

超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中重要的酶，是生物體內(nèi)防御氧化損傷的一種重要的氧自由基清除劑[12]，它保護細胞免受自由基的損害，對機體的氧化和抗氧化平衡起著至關重要的作用，SOD活力的高低間接反映了機體清除氧自由基的能力[13]。GSH是一種低分子清除劑，是組織中主要的非蛋白質(zhì)的巰基化合物，它能穩(wěn)定含巰基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷，GSH含量的多少是衡量機體抗氧化能力大小的重要因素。生理狀態(tài)下，血管內(nèi)皮細胞可清除基礎條件下的氧自由基，防止其對血管壁或心肌產(chǎn)生損害作用[14]。血脂異常、糖尿病、高血壓和吸煙均可損傷血管內(nèi)膜，引起自由基代謝紊亂、產(chǎn)生大量氧自由基、使機體清除自由基的能力下降，過多的氧自由基通過介導低密度脂蛋白氧化、促進細胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)磷酸化及轉錄因子活化而激活炎癥相關基因的表達，改變內(nèi)皮細胞的功能，使單核細胞向血管壁浸潤并釋放炎性分子，促進血管平滑肌細胞增殖、移行和發(fā)生炎性免疫反應，引起動脈粥樣硬化病變的發(fā)生和發(fā)展。提升SOD、GSH活性，可減少炎性因子釋放，保護內(nèi)皮細胞，阻止AS進程。本實驗結果顯示：三七總皂苷組、阿托伐他汀組在治療前SOD、GSH水平明顯低于治療后(P＜0．05)，三七總皂苷組、阿托伐他汀組兩組同期比較血清SOD、GSH水平差異無統(tǒng)計學意義；SOD、GSH水平明顯高于用藥前，差異有統(tǒng)計學意義。說明三七總皂苷可明顯提升血清SOD、GSH活性，減少炎性因子釋放，保護內(nèi)皮細胞，有效抑制頸動脈內(nèi)膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大。

傳統(tǒng)中藥三七主要藥用成分為tPNS，具有散癖止血，消腫定痛功效，目前認為tPNS抗血栓、降血脂、抗脂質(zhì)過氧化、抑制血小板聚集、改善內(nèi)皮功能等作用[15]。劉桂林等的研究[16]證實tPNS能有效降低進食高脂飲食的載脂蛋白E基因敲除小鼠血清ox-LDL水平，下調(diào)主動脈CD40、VCAM-1基因表達，保護血管內(nèi)皮細胞功能。本研究結果發(fā)現(xiàn)：外周血清hs-CRP水平在兩組用藥后明顯低于用藥前、SOD、GSH水平明顯高于用藥前，CIMT及斑塊積分明顯低于用藥前，提示三七總皂苷可有效降低hs-CRP的表達，提升SOD、GSH水平，減輕炎癥反應，抑制頸動脈內(nèi)膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大；長期服用三七總皂苷能有效降低血脂異常AS患者血清炎癥因子hs-CRP的表達，抑制頸動脈內(nèi)膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大，延緩AS的進展。

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The effect of total panax notoginseng saponins (tPNS) on serum hs-CRP and inflammatory factor expression in hyperlipidemia patients of atherosclerosis

JIANG Xiao-ping, ZENG Fan-peng, LIU Shou-ming, LIN Xiao-yuan, FENG Su-lian,SHEN Zu-hong//(The Chinese Traditional Hospital of Qingyuan city, Qingyuan 511500, Guangdong)

Objective: To study the effect of total panax notoginseng saponins (tPNS) on serum hypersensitive C-reactive protein (hs-CRP), superoxide dismutase(SOD) and Glutathione (GSH) on hyperlipidemia patients with atherosclerosis. Method:71 patients with CIMT≥0.9 mm or carotid atherosclerostic plaque were selected and randomly divided into tPNS group and atorvastatin group. Before and after medication, the levels of serum hs-CRP, SOD and GSH were measured by euzymelinked immunosorbent assay, and the change of CIMT and atherosclerotic plaque were observed by color ultrasonography. Result: After 12weeks medication, the levels of serum hs-CRP, CIMT and atherosclerotic plaque were signi ficantly lower in both tPNS group and atorvastatin group (P＜0.05). SOD and GSH were signi ficantly higher in both tPNS group and atorvastatin group (P＜0.05). No statistical signi ficance was found in the side effect of medicine between tPNS group and atorvastatin group (P＞0.05). Conclusion:tPNS inhibit CIMT and stherosclerotic plaque in hyperlipidemia patients with atherosclerosis. This effect is related with the downregulation of hs-CRP expression in hyperlipidemia patients with atherosclerosis.

Atherosclerosis；pannax notoginseng total saponin (tPNT)；hypersensitive C-reactive protein

R 287

A

1674-926X(2017)04-016-04

廣東省中醫(yī)藥局建設中醫(yī)藥強省科研基金資助項目（編號：20121098）

廣東省清遠市中醫(yī)院，廣東 清遠 511500

江小萍（1964-），女，漢族，碩士研究生，副主任醫(yī)師，心血管內(nèi)科 Email：jiangping6312@163.com

2017-01-15

（責任編輯：蔣淼）