楊青松，陳茂林，李 林

(巴中市中心醫(yī)院病理科，四川 巴中 636000)

鼠雙微體2在卵巢漿液性和黏液性腫瘤中的表達(dá)及臨床意義

楊青松，陳茂林，李 林

(巴中市中心醫(yī)院病理科，四川 巴中 636000)

目的探討原癌基因鼠雙微體2(MDM2)在漿液性和黏液性卵巢上皮腫瘤(良性、交界性和惡性)中的表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義。方法收集手術(shù)切除的原發(fā)性卵巢漿液性和黏液性腫瘤標(biāo)本82例，其中良性囊腺瘤22例(漿液性12例，黏液性10例)、交界性囊腺瘤30例(漿液性22例，黏液性8例)、惡性囊腺癌30例(漿液性18例，黏液性12例)。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)標(biāo)本中MDM2的水平，比較它們的表達(dá)強(qiáng)度。結(jié)果MDM2在良性、交界性和惡性囊腺癌中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為0.0%、20.0%和66.7%，惡性囊腺癌組織中MDM2的表達(dá)高于交界性、良性囊腺瘤(P<0.05)。惡性漿液性囊腺癌中MDM2的陽(yáng)性率低于惡性黏液性囊腺癌(44.4%比83.3%，P<0.05)。結(jié)論良性卵巢漿液性和黏液性囊腺瘤組織中MDM2未見(jiàn)表達(dá)，而惡性卵巢漿液性囊腺癌，尤其是惡性黏液性囊腺癌中MDM2表達(dá)的陽(yáng)性率更高。

鼠雙微體2； 原發(fā)性卵巢漿液性腫瘤； 原發(fā)性卵巢黏液性腫瘤

卵巢上皮惡性腫瘤是致死性最強(qiáng)的婦科腫瘤。其按組織學(xué)類型分為漿液型、黏液型、子宮內(nèi)膜型、透明細(xì)胞型、移行細(xì)胞型、鱗狀型、混合性型和未分化型，其中以漿液性和黏液性腫瘤最常見(jiàn)。每種組織學(xué)形態(tài)的腫瘤按惡性程度分為良性、交界性和惡性三個(gè)亞型，其中交界性預(yù)后較好，惡性預(yù)后極差。惡性腫瘤細(xì)胞的快速增殖必然依賴細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)，研究與腫瘤增殖相關(guān)的基因和蛋白分子有利于惡性腫瘤的診斷及治療。鼠雙微體2(MDM2)基因作為一種原癌基因，是p53的重要調(diào)節(jié)因子，參與細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、凋亡和細(xì)胞周期調(diào)控等環(huán)節(jié)[1]。交界性漿液性腫瘤中p53的表達(dá)為陰性，但在漿液性癌中p53陽(yáng)性表達(dá)率為50%。有研究[2]認(rèn)為，MDM2在膽囊、前列腺、生殖系統(tǒng)和軟組織腫瘤的病理生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。已有報(bào)道[3]顯示，MDM2 309基因多態(tài)性與卵巢癌相關(guān)。本研究采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)卵巢上皮腫瘤組織中MDM2的表達(dá)，以探討MDM2對(duì)該類疾病的臨床意義。

1 資料與方法

1.1病例資料

收集巴中市中心醫(yī)院病理科存檔的2014年1月至2016年6月手術(shù)切除的卵巢上皮腫瘤標(biāo)本82例，來(lái)自年齡為31～69(55.3±6.5)歲的患者。其中22例良性囊腺瘤(漿液性12例，黏液性10例)，交界性囊腺瘤30例(漿液性22例，黏液性8例)，惡性囊腺癌30例(漿液性18例，黏液性12例)?；颊咝g(shù)前均未接受化療和放療。不同性質(zhì)腫瘤組織的年齡分布具有均衡性。

1.2主要試劑

鏈菌素親生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連接法(S-P)試劑盒、鼠抗人MDM2蛋白單克隆抗體均由北京中杉生物技術(shù)有限公司提供。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

全部標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm 厚連續(xù)切片。分別用于HE、免疫組織化學(xué)染色，操作步驟依據(jù)實(shí)驗(yàn)試劑盒說(shuō)明書，每例標(biāo)本染色后均經(jīng)2名專業(yè)病理醫(yī)師確診。

1.4陽(yáng)性結(jié)果判定

MDM2蛋白陽(yáng)性著色定位于細(xì)胞核和(或)胞質(zhì)中，呈黃色或棕黃色顆粒。在高倍鏡(100)下隨機(jī)選取10個(gè)視野，計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比(0%=0；<10%=1；10%～50%=2；>50%～80%=3；>80%=4)及染色強(qiáng)度(無(wú)色=0；淡黃色=1；棕黃色=2；棕褐色=3)綜合分析并判斷結(jié)果，以兩者乘積>3為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)經(jīng)Excel數(shù)據(jù)庫(kù)整理，采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。率的比較用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1MDM2在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)

82例標(biāo)本中，MDM2表達(dá)陽(yáng)性共26例(31.7%)。其中18例(22.0%)在胞漿中表達(dá)，8例(9.8%)在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中同時(shí)表達(dá)，僅在細(xì)胞核中表達(dá)0例。

2.2MDM2在不同性質(zhì)卵巢上皮腫瘤組織中的表達(dá)

惡性囊腺癌MDM2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于良性、交界性瘤組織(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不同性質(zhì)卵巢上皮腫瘤MDM2的表達(dá)

*P<0.05與惡性囊腺癌比較。

2.3MDM2在卵巢漿液性、黏液性囊腺癌中的表達(dá)

黏液性囊腺癌中MDM2陽(yáng)性率明顯高于漿液性囊腺癌(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 MDM2在卵巢漿液性、黏液性囊腺癌中的表達(dá)

*P<0.05與黏液性囊腺癌比較。

3 討論

MDM2的檢測(cè)可以用于指導(dǎo)卵巢癌的治療，MDM2拮抗劑可以減輕順鉑的致凋亡作用[4]。Mir等[5]發(fā)現(xiàn)MDM2還可以減輕卵巢癌細(xì)胞的耐藥。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)了原癌基因MDM2在漿液性和黏液性卵巢上皮腫瘤(良性、交界性和惡性)中的表達(dá)特點(diǎn)，82例標(biāo)本中，26例(31.7%)MDM2陽(yáng)性。Dogan等[6]檢測(cè)45例卵巢腫瘤患者中，MDM2陽(yáng)性13例(28.9%)，與本文結(jié)果相似。

細(xì)胞核或細(xì)胞漿中出現(xiàn)明顯染色判定為MDM2陽(yáng)性[7]。本研究發(fā)現(xiàn)MDM2在細(xì)胞漿表達(dá)占22.0%，在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中均有表達(dá)占9.8%，在細(xì)胞核中未見(jiàn)表達(dá)。在Hav等[8]的研究中，MDM2在細(xì)胞漿表達(dá)為36%，在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中均有表達(dá)占11%，23%僅在細(xì)胞核中表達(dá)。Turbin等[9]認(rèn)為，MDM2僅在細(xì)胞核中表達(dá)非常少，而大多表達(dá)于細(xì)胞漿中。MDM2在腫瘤細(xì)胞各部位的不同表達(dá)可能與其在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，在細(xì)胞核中，MDM2與p53結(jié)合后，轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞漿中的蛋白酶體，并可使MDM2降解[10]。

本研究顯示，良性腫瘤組織中MDM2表達(dá)均為陰性；而Cho等[11]發(fā)現(xiàn)，良性腫瘤組織亦未見(jiàn)MDM2染色。因此，MDM2表達(dá)陰性可成為排除卵巢囊腺癌的診斷指標(biāo)。但Palazzo等[7]認(rèn)為，56.2%的良性卵巢囊腺瘤MDM2染色陽(yáng)性，這可能與研究過(guò)程中使用的抗體不同、陽(yáng)性的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)不同有關(guān)。

本研究結(jié)果提示，惡性囊腺瘤MDM2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于交界性囊腺瘤(66.7%比20.0%，P<0.05)。Skomedal等[12]發(fā)現(xiàn)I期卵巢癌患者M(jìn)DM2陽(yáng)性表達(dá)率高于交界性腫瘤(13%比4%，P<0.05)；Rivera Calderon等[13]亦認(rèn)為，MDM2的表達(dá)可作為晚期癌癥的信號(hào)，這與本文結(jié)果類似。但Palazzo等[7]以MDM2在細(xì)胞核中染色才判定為MDM2陽(yáng)性，他們發(fā)現(xiàn)MDM2在卵巢惡性腫瘤和交界性腫瘤中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為70%和90%。產(chǎn)生這一差異的原因在于對(duì)MDM2表達(dá)陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)不同所致。

Cho等[11]研究發(fā)現(xiàn)，MDM2在漿液性囊腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為46.8%。本研究中MDM2在漿液性囊腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為44.4%，在黏液性囊腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為83.3%，這種在漿差異化表達(dá)可能為這兩種不同組織學(xué)類型的腫瘤靶向治療提出新思路。

綜上所述，良性卵巢漿液性和黏液性囊腺瘤MDM2無(wú)表達(dá)，而惡性卵巢漿液性和黏液性囊腺癌中MDM2表達(dá)陽(yáng)性率高，而且黏液性囊腺癌MDM2陽(yáng)性率高于漿液性囊腺癌。因此，MDM2可能成為惡性卵巢上皮腫瘤的輔助診斷標(biāo)記分子蛋白，為惡性卵巢上皮腫瘤的診斷和治療提供新方法。

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(責(zé)任編輯：羅芳)

ExpressionandClinicalSignificanceofMurineDoubleMinute2inSerousandMucinousOvarianTumors

YANGQing-song,CHENMao-lin,LILin

(DepartmentofPathology,BazhongCentralHospital,Bazhong636000,China)

ObjectiveTo explore the expression characteristics and clinical significance of murine double minute 2(MDM2) in serous and mucous ovarian epithelial tumors.MethodsThe expression of MDM2 was detected by immunohistochemistry in 82 primary serous and mucous ovarian epithelial tumor specimens,including 22 cases of benign cystadenoma(serous in 12 and mucous in 10),30 cases of borderline cystadenoma(serous in 22 and mucous in 8),and 30 cases of malignant cystadenoma(serous in 18 and mucous in 12).ResultsThe positive rate of MDM2 expression in malignant cystadenoma(66.7%) was higher than that in benign cystadenoma(0.0%) and that in borderline cystadenoma(20.0%)(P<0.05),and that in malignant serous cystadenoma(44.4%) was lower than that in malignant mucous cystadenoma(83.3%)(P<0.05).ConclusionThere is no expression of MDM2 in benign serous and mucinous ovarian epithelial tumors.However,it is highly expressed in malignant ovarian cystadenoma,especially in malignant mucous cystadenoma.

murine double minute 2; primary serous ovarian cystadenoma; primary mucous ovarian cystadenoma

R737.31

A

1009-8194(2017)08-0056-03

2016-11-09

楊青松(1981—)，男，本科，主治醫(yī)師，主要從事臨床病理學(xué)的研究。

10.13764/j.cnki.lcsy.2017.08.024