李向陽(yáng) 侯 林 晏 磊

(1.國(guó)家獸用藥品工程技術(shù)研究中心,河南洛陽(yáng) 471003;2.普萊柯生物工程股份有限公司,河南洛陽(yáng) 471000)

復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的制備工藝研究

李向陽(yáng)1，2侯 林1，2晏 磊1，2

(1.國(guó)家獸用藥品工程技術(shù)研究中心,河南洛陽(yáng) 471003;2.普萊柯生物工程股份有限公司,河南洛陽(yáng) 471000)

通過(guò)對(duì)復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的輔料及分散工藝進(jìn)行研究,確定了復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的制備工藝。選擇0.4%的羧甲基纖維素鈉作為助懸劑;確定了2.5%的檸檬酸鈉作為反絮凝劑;確定了高剪切作為分散工藝,最終確定了復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的制備工藝。將產(chǎn)品按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果符合規(guī)定。

復(fù)方磺胺嘧啶;混懸液;制備工藝

磺胺嘧啶（Sulfadiazine，SD）是一種磺胺類化學(xué)合成抗菌藥，其抗菌譜廣，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、衣原體和某些原蟲(chóng)有效。甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）屬于人工合成的二氨基嘧啶類抗菌增效劑，其抗菌譜與磺胺類相似而活性較強(qiáng)。SD通過(guò)干擾敏感菌的葉酸代謝而抑制其生長(zhǎng)繁殖，TMP通過(guò)抑制四氫葉酸的合成從而阻礙敏感菌葉酸代謝和利用[1]。SD與TMP合用時(shí)可雙重阻斷葉酸代謝，在增強(qiáng)抗菌作用的同時(shí)，可避免耐藥性產(chǎn)生[2]。復(fù)方磺胺嘧啶混懸液（Compound Sulfadiazine Suspension）是磺胺嘧啶和甲氧芐啶按5：1比例制成的復(fù)方制劑，其抗菌譜擴(kuò)大、抗菌作用大大增強(qiáng)，獸醫(yī)臨床主要用于防治雞大腸桿菌、沙門(mén)氏菌感染，以及淡水魚(yú)氣單胞菌、假單胞菌等引起的細(xì)菌性疾病[3]。本文就復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的制備工藝進(jìn)行了研究，得到質(zhì)量可靠的產(chǎn)品，保證臨床用藥安全、有效。

1 儀器與材料

1.1 材料

磺胺嘧啶，批號(hào)20160901，含量98.2%（以C10H10N4O2S計(jì)），山西金源通制藥有限公司；甲氧芐啶，批號(hào)20160424，含量99.5%（以C14H18N4O3計(jì)），山西金源通制藥有限公司；羧甲基纖維素鈉，安徽山河藥用輔料股份有限公司；甲基纖維素（M-20），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；失水山梨醇單油酸酯（司盤(pán)-80），南京威爾化工有限公司；檸檬酸鈉，湖南華日制藥有限公司；氫氧化鈉，四川金山制藥有限公司。

1.2 儀器設(shè)備

IKA-RW20DS25高剪切機(jī)，德國(guó)IKA公司；JMS-50膠體磨，廊坊正端機(jī)械有限公司；AH-100D 高壓均質(zhì)機(jī)，加拿大ATS工業(yè)系統(tǒng)有限公司；UV-P光學(xué)顯微鏡，北京和眾視野公司；YP-150SD藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)箱，北京恒泰豐科試驗(yàn)設(shè)備有限公司；waters2695高效液相色譜儀，美國(guó)沃特斯公司；pH計(jì)，梅特勒-托利多公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 檢測(cè)方法

【含量測(cè)定】 照高效液相色譜法測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑：以磷酸二氫鉀1.09g與三乙胺0.8g，加水800ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至4.0+0.1，加甲醇稀釋至1000ml的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按磺胺嘧啶峰計(jì)算應(yīng)不小于1000。

測(cè)定法 磺胺嘧啶 取本品約0.75g，精密稱定，置100ml量瓶中，加1mol/L鹽酸溶液50ml，置超聲浴中超聲15分鐘，冷卻，用1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，離心；精密量取上清液1ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取磺胺嘧啶對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

甲氧芐啶 取本品0.4g，精密稱定，置50ml量瓶中，加二甲基亞砜25ml，置超聲浴中超聲15min，冷卻，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml，置50ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的甲氧芐啶對(duì)照品50mg，置100ml量瓶中，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

【沉降體積比】將混懸液分別裝入50ml具塞量筒中，用力振搖1分鐘，靜置，測(cè)混懸物的開(kāi)始高度H0，3h后測(cè)得混懸物的高度H，計(jì)算沉降體積比：F=H/H0。

【粘度】 用5mL刻度吸管吸取混懸液5.0ml，豎直令其自然流出，記錄流出5ml所需要的時(shí)間。

【分散性】 取混懸液10ml，振搖30s，轉(zhuǎn)移至玻璃容器中，不得觀察到結(jié)塊或沉淀物。

【掛壁】 取混懸液10mL，置10mL安瓿瓶中，密閉后上下振搖3次，靜置2h，觀察安瓿瓶壁，不得有淚狀刮痕。

2.2 處方考察

2.2.1 助懸劑的選擇

為了使復(fù)方磺胺嘧啶混懸液擁有良好的懸浮性，避免沉降，需要在混懸液中添加相應(yīng)的助懸劑，以保證混懸液的粘度、沉降體積比和分散性合格[4]。

選擇的助懸劑有：甲基纖維素M-20、羧甲基纖維素鈉。以沉降體積比、粘度、分散性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合考慮三種評(píng)價(jià)指標(biāo)的結(jié)果，優(yōu)選沉降體積比大、粘度小、分散性良好的處方，選擇合適的助懸劑種類及用量。

配制方法：在燒杯中先將適量的助懸劑和純化水混合均勻，加熱至約80℃使其溶脹，然后在攪拌狀態(tài)下放冷至室溫，加入磺胺嘧啶、甲氧芐啶分散均勻，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至10.0即得。不同助懸劑及不同加入量的處方檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同助懸劑種類及不同加入量的檢測(cè)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)論：由上表試驗(yàn)結(jié)果，甲基纖維素作為助懸劑時(shí)，粘度大，沉降體積比小，效果不如羧甲基纖維素鈉；0.4%的羧甲基纖維素鈉粘度較小，沉降體積比較大，因此選為最優(yōu)。

2.2.2 反絮凝劑的選擇

在混懸劑中由于混懸微粒表面游離基團(tuán)的存在或吸附溶液中的離子而帶有相同電荷的離子，同時(shí)反離子分布在它的周圍。反離子在微粒表面或周圍形成吸附層或擴(kuò)散層，吸附層與擴(kuò)散層外面正負(fù)離子分布均勻外的電位差稱動(dòng)（zeta）電位[5]。調(diào)節(jié)動(dòng)（zeta）電位的電解質(zhì)用量大時(shí)，可作為反絮凝劑。反絮凝主要用于解決微粒分散體系的物理穩(wěn)定性問(wèn)題。

為了減小混懸液的表面張力，使混懸液擁有良好的物理穩(wěn)定效果，因此需添加適當(dāng)?shù)姆葱跄齽?。選擇的反絮凝劑有：檸檬酸鈉、失水山梨醇單油酸酯（司盤(pán)-80）。

以沉降體積比、粘度、分散性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合考慮三種評(píng)價(jià)指標(biāo)的結(jié)果，優(yōu)選沉降體積比大、粘度小、分散性良好的處方，選擇合適的反絮凝劑種類及用量。

配制方法：在燒杯中先將適量的助懸劑和純化水混合均勻，加熱至約80℃使其溶脹，然后在攪拌狀態(tài)下放冷至室溫，加入不同的反絮凝劑，然后再加入磺胺嘧啶、甲氧芐啶分散均勻，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至10.0即得。不同反絮凝劑及不同加入量的處方檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同反絮凝劑及不同加入量檢測(cè)結(jié)果表

試驗(yàn)結(jié)論：由上表試驗(yàn)結(jié)果，檸檬酸鈉作為反絮凝劑時(shí)，粘度小，沉降體積較大，與司盤(pán)-80相比，用量更小，效果更好。因此選擇2.5%檸檬酸鈉作為反絮凝劑。

2.3 分散工藝對(duì)比

混懸液的穩(wěn)定性與其分散工藝有很大的關(guān)系。對(duì)分散工藝進(jìn)行考察應(yīng)從兩個(gè)方面入手：一是粒度，根據(jù)《中華人民共和國(guó)獸藥典》一部附錄，混懸型混懸液粒度應(yīng)控制在15μm以下，含15～20μm（間有個(gè)別20～50μm）者，不應(yīng)超過(guò)10%。選擇用目鏡測(cè)微尺在顯微鏡下測(cè)定其粒度[3]；二是分散后產(chǎn)品的分散性。分別對(duì)3種分散工藝的粒度和分散性進(jìn)行考察，對(duì)比測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 分散工藝考察結(jié)果（200ml：磺胺嘧啶80g+甲氧芐啶16g）

測(cè)定結(jié)果顯示，用高剪切直接分散法制備的混懸液，粒度即可以達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，故選用高剪切分散作為分散工藝。

2.4 制備工藝

準(zhǔn)確稱量羧甲基纖維素鈉0.8g，約加80ml純化水，置1000ml燒瓶中，加熱至80℃使其溶脹，攪拌，然后降溫至40℃以下備用。

然后開(kāi)啟剪切機(jī)，在攪拌狀態(tài)下，加入檸檬酸鈉5.0g，攪拌10分鐘，溶解完全后，加入加入磺胺嘧啶80.0g（折純）、甲氧芐啶16.0g（折純），通過(guò)高剪切混合均勻。

用20%氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10.0-10.5，隨著氫氧化鈉溶液加入，混懸液逐漸由粘稠狀變?yōu)橄「酄睿{(diào)pH至10.0-10.5。

加水定容至200ml。高剪切混合20分鐘，使完全分散均勻。取樣送檢，檢驗(yàn)合格后即得。

2.5 檢測(cè)結(jié)果

按照上述制備工藝制備得到復(fù)方磺胺嘧啶混懸液，取樣進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 復(fù)方磺胺嘧啶混懸液檢測(cè)結(jié)果表

3 結(jié)論

混懸劑一般系指不溶性藥物顆粒分散在液體分散介質(zhì)內(nèi)形成的不均勻分散的液體制劑。理想的混懸劑應(yīng)該滿足混懸微粒細(xì)微均勻、下沉緩慢、稍加振搖技能均勻分散。加入助懸劑、潤(rùn)濕劑、絮凝劑與反絮凝劑等穩(wěn)定劑可以增加混懸劑的穩(wěn)定性。

通過(guò)試驗(yàn)，確定了0.4%的羧甲基纖維素鈉為助懸劑；確定了2.5%檸檬酸鈉作為反絮凝劑；確定了復(fù)方磺胺嘧啶混懸液的分散工藝為高剪切分散。通過(guò)該工藝制備得到的復(fù)方磺胺嘧啶混懸液產(chǎn)品符合《復(fù)方磺胺嘧啶混懸液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》項(xiàng)下要求。

[1]陳杖榴.獸醫(yī)藥理學(xué)（第三版）[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009.

[2]錢建中，李寒松，徐學(xué)梅，等.兩種復(fù)方磺胺嘧啶混懸液在肉雞體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及生物等效性研究[J].中國(guó)家禽，2013，35（13）：20.

[3]中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2015．

[4]張愛(ài)英，梁文法.復(fù)方磺胺嘧啶合劑配制方法的改進(jìn)[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，1990，25（1）：54.

[5]劉哲.藥物混懸液的穩(wěn)定性研究[D].天津大學(xué)，2014.

李向陽(yáng)（1982—），實(shí)驗(yàn)師，從事獸藥高新制劑研究。