2017年蘇州市規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

(江蘇省蘇州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇蘇州 215125)

2017年蘇州市規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

(江蘇省蘇州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇蘇州 215125)

為了解我蘇州地區(qū)豬偽狂犬病的野毒感染情況,對(duì)蘇州市3個(gè)市(區(qū))的15家自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)共971份豬血清樣品進(jìn)行了豬偽狂犬病gB抗體和gE抗體的監(jiān)測(cè)與分析,結(jié)果顯示:971份樣品中,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性497份,gE抗體陽(yáng)性率為51.15%,其中生產(chǎn)母豬樣品394份,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性率為63.2%;公豬樣品130份,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性率為46.92%。結(jié)果顯示,蘇州地區(qū)中存在豬偽狂犬病痛毒感染,且某些豬場(chǎng)豬偽狂犬病病毒的感染率較高。

豬偽狂犬病;血清學(xué)調(diào)查;凈化

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的豬的急性傳染病。該病在豬呈爆發(fā)性流行。引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎，公豬不育，新生仔豬的大量死亡，育肥豬呼吸困難、生長(zhǎng)停滯等，是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一[1]。偽狂犬病毒在全世界廣泛分布，偽狂犬病自然發(fā)生于豬、牛、綿羊、犬和貓，另外，多種野生動(dòng)物、肉食動(dòng)物也易感。我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。2006～2007年度，豬偽狂犬病在全國(guó)大范圍的傳播流行，使豬病的感染流行復(fù)雜化；2011年以來(lái)，豬偽狂犬變異株在全國(guó)多地區(qū)流行，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

疫苗接種是預(yù)防和控制偽狂犬病的根本措施。目前我國(guó)普遍使用的是偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗，且使用偽狂犬病毒gE抗體ELISA檢測(cè)試劑盒能夠檢測(cè)豬群中的偽狂犬野毒感染豬[2]。為了解我市豬偽狂犬的免疫和野毒感染情況，2017年2月至6月，對(duì)我市部分地區(qū)的18個(gè)自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行偽狂犬病抗體監(jiān)測(cè)，希望能為我市偽狂犬病的防控和凈化提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品來(lái)源

2017年2月-2017年6月，采自蘇州市常熟市、太倉(cāng)市、吳江區(qū)共18家自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)的971份豬血清樣品。其中有15家豬場(chǎng)均免疫豬偽狂犬gE基因缺失疫苗，有3家豬場(chǎng)未免疫豬偽狂犬疫苗。

1.2 檢測(cè)試劑

美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)的偽狂犬gB抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：HM634、LM951、CN405；美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)的偽狂犬gE抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：KM818、AN178、CN428。

1.3 試驗(yàn)儀器

微量移液器、微量振蕩儀、洗板機(jī)、酶標(biāo)儀等。

1.4 方法步驟

采取ELISA方法檢測(cè)：1取出抗原包被板，在每孔中加入50μl樣品稀釋液，在相應(yīng)的孔中加入50μl陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和待檢樣品，充分混勻，陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔，在室溫下孵育60in；2用300ul洗滌液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100μl酶標(biāo)抗體，在室溫下孵育20min；3再用300μl洗滌液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100μlTMD底物溶液，在室溫下避光孵育15min；4每孔加入50μl終止液終止反應(yīng)；5酶標(biāo)儀調(diào)至650nm波長(zhǎng)，讀取對(duì)照及樣品的OD值。

1.5 結(jié)果判定

S/N=樣品OD值/陰性對(duì)照OD值。S/N值小于等于0.6判定為抗體陽(yáng)性，S/N值大于0.7判定為抗體陰性，S/N值大于0.6同時(shí)小于等于0.7的判定為可疑。

2 結(jié)果

（1）對(duì)18個(gè)自繁自養(yǎng)的規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬疫苗免疫情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，15個(gè)場(chǎng)使用了偽狂犬疫苗，占采樣場(chǎng)數(shù)的83.33%。疫苗免疫場(chǎng)共采集樣品864份，其中PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)686份，陽(yáng)性率79.40%，PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)446份，陽(yáng)性率51.62%。3個(gè)未免疫場(chǎng)共采集樣品107份，PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)65份，陽(yáng)性率60.75%；PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)51份，陽(yáng)性率47.66%。（見表1、表2）

（2）本次調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)偽狂犬野毒感染場(chǎng)達(dá)100%，其中PRV gE抗體陽(yáng)性率大于10%的場(chǎng)（高風(fēng)險(xiǎn)場(chǎng)）有17個(gè)，占94.44%；PRV gE抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%的場(chǎng)有3個(gè)，占16.66%。

表1 免疫豬場(chǎng)偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

（3）本次調(diào)查按照生產(chǎn)母豬、公豬、后備母豬、育肥豬分別進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)（見表3）：生產(chǎn)母豬樣品共394份，PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)364份，陽(yáng)性率92.39%；PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)249份，陽(yáng)性率63.2%。公豬樣品共130份，PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)110份，陽(yáng)性率84.62%；PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)61份，陽(yáng)性率46.92%。后備母豬樣品共195份，PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)146份，陽(yáng)性率74.87%；PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)95份，陽(yáng)性率48.72%。育肥豬樣品共252份，PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)135份，陽(yáng)性率77.34%；PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)92份，陽(yáng)性率36.51%。

（4）據(jù)統(tǒng)計(jì)，公豬樣品采自17個(gè)豬場(chǎng)，16個(gè)場(chǎng)被檢出PRV gE抗體，公豬野毒感染場(chǎng)占94.12%；生產(chǎn)母豬樣品采自17個(gè)豬場(chǎng)，17個(gè)場(chǎng)均檢出PRV gE抗體，生產(chǎn)母豬野毒感染場(chǎng)達(dá)100%；后備母豬樣品采自13個(gè)豬場(chǎng)，8個(gè)場(chǎng)檢出PRV gE抗體，后備母豬野毒感染場(chǎng)占61.54%；育肥豬樣品采自15個(gè)豬場(chǎng)，8個(gè)場(chǎng)檢出PRVgE抗體，育肥豬野毒感染場(chǎng)占53.33%。

表2 未免疫豬場(chǎng)偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 不同豬群偽狂犬gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

3 分析與討論

（1）本次調(diào)查顯示，蘇州市部分地區(qū)豬偽狂犬野毒感染很嚴(yán)重，感染率達(dá)51.18%，調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)均有不同程度的野毒感染，且這18個(gè)豬場(chǎng)分布于3個(gè)市（區(qū)），說明偽狂犬病毒的感染在我市分布較為廣泛。根據(jù)調(diào)查，這18個(gè)豬場(chǎng)中有2個(gè)豬場(chǎng)表示曾確診過豬偽狂犬病，其他豬場(chǎng)均未曾確診相關(guān)病例；但據(jù)統(tǒng)計(jì)這些場(chǎng)的平均死胎流產(chǎn)等繁殖障礙率為2.69%，平均仔豬早期死亡率為7.69%，說明大多數(shù)豬場(chǎng)呈隱形感染狀態(tài)。綜上調(diào)查，筆者認(rèn)為本地區(qū)開展偽狂犬防控和凈化措施已迫在眉睫。

（2）調(diào)查顯示我市偽狂犬病免疫效果層次不齊，未免疫場(chǎng)占本次調(diào)查的16.67%，免疫場(chǎng)中多數(shù)場(chǎng)存在免疫程序不規(guī)范、疫苗接種形式單一、疫苗選擇不科學(xué)等問題。因此，加強(qiáng)偽狂犬病疫苗免疫是防控偽狂犬病的首要任務(wù)：選擇質(zhì)量穩(wěn)定的疫苗，滅活苗和弱毒苗科學(xué)使用；根據(jù)當(dāng)?shù)亓餍袪顩r和疫苗廠家的推薦，指定符合各豬場(chǎng)切實(shí)有效的免疫程序，不要盲目、片面的免疫；加強(qiáng)仔豬和育肥豬的免疫，采用滴鼻+肌注的形式免疫接種。

（3）本次調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)的野毒感染率非常高，很大程度上是因?yàn)楣i和生產(chǎn)母豬野毒感染非常嚴(yán)重引起的，公豬和生產(chǎn)母豬的PRV gE抗體陽(yáng)性率分別達(dá)到46.92%和63.2%。由于規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)一般都是采取“自繁自養(yǎng)”方式，若種豬感染偽狂犬病則該病將在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)持續(xù)存在[3]，做好種豬PRV野毒抗體檢測(cè)，及時(shí)清除帶毒豬，加快培育健康優(yōu)質(zhì)的后備豬群，并結(jié)合進(jìn)行免疫抗體的監(jiān)測(cè)和評(píng)估，對(duì)偽狂犬病的控制和凈化至關(guān)重要[4]。

（4）本次試驗(yàn)同時(shí)對(duì)偽狂犬gB抗體和gE抗體進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示gB抗體陽(yáng)性率為77.34%，但由于gE野毒抗體的陽(yáng)性率也較高，因此本次偽狂犬gB抗體的檢測(cè)結(jié)果并不能準(zhǔn)確反映疫苗免疫效果的好壞，只能作為部分參考用。但筆者建議常規(guī)監(jiān)測(cè)中仍應(yīng)同步檢測(cè)gB抗體與gE抗體，在凈化工作中掌握好仔豬的母源抗體水平、野毒陰性豬的免疫抗體保護(hù)水平非常重要，免疫程序的制定也需要清楚免疫抗體的消長(zhǎng)規(guī)律。

（5）偽狂犬病毒感染與豬場(chǎng)生物安全管理、區(qū)域病毒變異及豬群自身免疫水平相關(guān)[5]。良好的飼養(yǎng)管理水平，完善的生物安全措施，是凈化偽狂犬病的必要條件。如豬場(chǎng)禁養(yǎng)犬貓，定期滅鼠、殺蟲，定期對(duì)豬舍、場(chǎng)地、用具消毒，飼喂優(yōu)質(zhì)、新鮮飼料，對(duì)病死豬嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)害化處理等措施。

（6）《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020）》中已明確豬偽狂犬病的根除計(jì)劃，我省也出臺(tái)了多種政策來(lái)促進(jìn)豬偽狂犬病的凈化工作，各大科研機(jī)構(gòu)對(duì)豬偽狂犬病的研究不斷深入，再加上各豬場(chǎng)對(duì)豬偽狂犬病的凈化意識(shí)逐漸提高。筆者相信偽狂犬病的形勢(shì)會(huì)不斷好轉(zhuǎn)，很快達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。

[1]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001：411-483.

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江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項(xiàng)目“生豬偽狂犬病綜合凈化技術(shù)”合同編號(hào)：SXGC[2016]084