郝瑩 陳園園 張瑾 馬惠姿 顧衛(wèi)紅

·神經(jīng)系統(tǒng)遺傳性疾病·

青少年型亨廷頓病10例臨床表型及基因突變分析

郝瑩 陳園園 張瑾 馬惠姿 顧衛(wèi)紅

目的總結青少年型亨廷頓病患者臨床表型及IT15基因胞嘧啶?腺嘌呤?鳥嘌呤（CAG）重復突變特點。方法采用聚合酶鏈反應結合熒光標記毛細管電泳片段分析方法，對159個亨廷頓病家系272名成員進行IT15基因CAG重復序列檢測，并對其中10例青少年期發(fā)病患者的臨床表現(xiàn)、影像學特征以及臨床表型與基因型相關性進行分析。結果經(jīng)基因檢測共發(fā)現(xiàn)211例攜帶異常擴展的IT15基因CAG重復序列，其中10例為青少年型亨廷頓病患者，臨床表現(xiàn)各異，主要以不自主運動和認知功能障礙為主；發(fā)病年齡平均（12.50±4.55）歲，IT15基因CAG重復序列平均（63.70±14.83）個，Pearson相關分析顯示，二者呈負相關關系（r=?0.865，P=0.001）。結論青少年型亨廷頓病與成年型亨廷頓病患者臨床表現(xiàn)不同，前者主要表現(xiàn)為認知功能障礙；對于無明確家族史、臨床表現(xiàn)疑似亨廷頓病的患者，基因檢測是明確診斷的依據(jù)；亨廷頓病發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復次數(shù)呈負相關，但不能完全解釋發(fā)病年齡的變異性，尤以青少年型亨廷頓病患者顯著，可能存在其他遺傳調節(jié)因素。

杭廷頓??； 青少年； 表型； 基因； 突變； 系譜

亨廷頓?。跦D，在線人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM）編號：143100］是常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，發(fā)病年齡30～50歲，病程15～20年，臨床主要表現(xiàn)為舞蹈樣動作、進行性認知功能減退和神經(jīng)精神癥狀，影像學可見尾狀核和大腦皮質萎縮［1?4］。致病基因IT15定位于4p16.3，第1外顯子內存在高度多態(tài)性胞嘧啶?腺嘌呤?鳥嘌呤（CAG）重復序列，該重復序列異常擴展導致亨廷頓病［5］。亨廷頓病發(fā)病率為5～8/10萬［6］，通常于成年期發(fā)病，具有明顯的外顯不全和延遲外顯。青少年型亨廷頓病較為少見，臨床表型存在異質性。本研究回顧分析10例青少年型亨廷頓病患者的臨床資料，對其臨床表型和IT15基因CAG重復突變進行細致分析。

對象與方法

一、研究對象

研究對象均來自2005年8月-2016年5月中日友好醫(yī)院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心收集的159個臨床擬診為亨廷頓病家系共272名成員，均為漢族，男性143名，女性129名；年齡6～72歲，平均（36.76±13.73）歲。本研究經(jīng)中日友好醫(yī)院道德倫理委員會審核批準，所有受試者及其家屬均知情同意并簽署知情同意書。

二、研究方法

1.樣本采集 空腹采集所有受試者外周靜脈血5 ml，以質量分數(shù)為3.8%枸櫞酸鈉進行抗凝，標準酚氯仿法提取基因組DNA。

2.聚合酶鏈反應 根據(jù)IT15基因第1外顯子CAG重復片段兩側的序列設計引物，由北京賽百盛基因技術有限公司合成，正向引物（F引物）序列：5'?AGTAAGGCCTTCGAGTCCCTCAAGTCCTCC ?3'；反向 引 物（R引 物）序 列 ：5'?AAACTCACGGTCGGTGCAGCGGCTCCTCAG ?3'。PCR 反應體系共 25 μl，依次加入 dNTPs 2.50 mmol、2×GC緩沖液Ⅰ12.50 μl、正向引物和反向引物分別5 pmol、模板 DNA 100 ng和r?Taq 1U，加滅菌去離子水補充至25 μl；反應條件為95℃預變性5 min，95 ℃ 90 s、62.5 ℃ 60 s、72 ℃ 120 s，共循環(huán)35次，72℃延伸10 min。PCR擴增產物行質量分數(shù)為1.5%的瓊脂糖凝膠電泳共40 min，電壓100 V，對出現(xiàn)2條電泳條帶的樣本進行基于毛細管電泳的片段分析。

3.基于毛細管電泳的片段分析 采用熒光標記引物進行PCR擴增反應，引物序列包括經(jīng)D4熒光標記的上述正向引物和反向引物，其中D4熒光標記的正向引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反應體系共計25 μl，依次加入dNTPs 2.50 mmol、2× GC 緩沖液Ⅰ12.50 μl、正向引物和反向引物各5 pmol、模板 DNA 100 ng和r?Taq 1U，加滅菌去離子水補充至25 μ l。采用美國Beckman Coulter公司生產的CEQ8000核酸分析儀對PCR擴增產物進行片段分析：甲酰胺 20 μl，以 0.25 μl CEQ DNA Size Standard Kit?600片段作為標準內標，異源雙鏈聚合酶鏈反應（HD?PCR）擴增產物1 μl混勻、上樣；預設程序進行電泳分離，分離條件為毛細管溫度達50℃時，90℃變性120 s，2 kV電壓下注入樣本30 s、4.80 kV電壓下電泳70 min，以預設的分析參數(shù)進行片段分析。

4.統(tǒng)計分析方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析。采用Kolmogorov?Smirnov檢驗和Shapiro?Wilk檢驗（N＜50）行正態(tài)性檢驗；呈正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復序列的相關分析采用Pearson相關分析。以P≤0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結 果

基因檢測顯示，159個亨廷頓病家系共272名成員中211例攜帶異常擴展的IT15基因CAG重復序列，其中已發(fā)病且臨床資料完整患者149例，男性83例，女性66例；年齡9～69歲，平均（42.52±12.81）歲；發(fā)病年齡 6～66歲，平均為（38.25±12.34）歲；IT15基因CAG重復序列36～80個，平均（45.10±7.55）個。Pearson相關分析顯示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復序列呈負相關（r=?0.750，P=0.000）。211例攜帶異常擴展CAG重復序列的患者中10例于青少年期發(fā)病，9例為父系遺傳，其中7例有明確家族史，余1例為母系遺傳。10例青少年型亨廷頓病患者的臨床資料參見表1。

一、臨床特征

例1（患者3） 男性，19歲，主因不自主運動伴震顫2～3年，于2008年5月12日至我院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診?；颊?年前無明顯誘因出現(xiàn)不自主運動伴震顫，行走易跌倒，易受驚嚇。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，語言流利，反應尚可，面部有摔傷；眼球各向活動充分，未見明顯眼震；四肢肌力5級、肌張力正常，雙側指鼻試驗明顯意向性震顫，雙側跟?膝?脛試驗尚穩(wěn)準，直線行走稍差，腱反射正常，病理征陰性。影像學檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質輕度萎縮，尾狀核頭部明顯萎縮（圖1a）。患者家系可追溯4代共2例患者，均為男性，呈常染色體顯性遺傳。其父現(xiàn)年41歲，于35歲發(fā)病，神經(jīng)系統(tǒng)檢查可見不自主運動，雙側指鼻試驗穩(wěn)準、雙側快復輪替動作笨拙、直線行走稍差。

表1 10例青少年型亨廷頓病患者臨床資料Table 1. The clinical features of 10 cases with juvenile?onset HD

例2（患兒4） 男性，14歲，主因間斷性不自主聳肩、動作不協(xié)調4年，于2008年7月23日至我院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診。患兒4年前無明顯誘因出現(xiàn)不自主聳肩，行走不協(xié)調，向左側傾倒，雙腿僵硬，睡眠欠佳，睡眠中踢腿、打拳等動作較多。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，言語欠流利，智力下降；眼球各向活動緩慢，未見明顯眼震，可見角膜色素環(huán)；四肢肌力5級，上肢肌張力5級、下肢肌張力增高，雙側指鼻試驗和跟?膝?脛試驗欠穩(wěn)準，腱反射活躍，病理反射未引出。影像學檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質中度萎縮，尾狀核頭部明顯萎縮（圖1b）。患者家系可追溯3代共4例患者，男性3例，女性1例，呈常染色體顯性遺傳。其父于35歲發(fā)病，表現(xiàn)為不自主運動、行走不穩(wěn)，于43歲因心肌梗死死亡；其姑母亦表現(xiàn)出相似癥狀。

例3（患兒6） 男性，16歲，主因運動功能下降伴智力減退2年，于2009年9月8日至我院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診。患兒2年前無明顯誘因出現(xiàn)動作笨拙、運動功能下降、智力減退等癥狀與體征，進行性加重。神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，言語欠流利，反應遲鈍；雙眼上下視不能，眼球各向活動緩慢，未見明顯眼震；四肢肌力5級、肌張力增高，雙側指鼻試驗笨拙但尚穩(wěn)準，雙側快復輪替動作笨拙，行走時可見肌張力障礙姿勢，頸部和肩部歪斜，腱反射亢進，病理反射未引出。影像學檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質輕度萎縮，尾狀核頭部輕度萎縮（圖1c）。無明確家族史，其父現(xiàn)年38歲，其母40歲，均無相似臨床癥狀，神經(jīng)系統(tǒng)檢查未見明顯異常。

例4（患者10） 男性，28歲，主因行走不穩(wěn)伴言語模糊8年，于2015年5月27日至我院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診?；颊?年前無明確誘因出現(xiàn)行走不穩(wěn)、言語模糊，反應較慢，不自主抖動，進行性加重。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，口吃，構音障礙；面部不自主運動，姿勢異常，四肢小幅度不自主抖動；眼球各向活動欠充分，未見明顯眼震；四肢肌力5級、肌張力增高，雙側快復輪替動作笨拙，雙側指鼻試驗和跟?膝?脛試驗欠穩(wěn)準，腱反射對稱，病理征可疑陽性。影像學檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質輕度萎縮，尾狀核頭部中度萎縮（圖1d）?；颊呒蚁悼勺匪?代共4例患者，男性2例，女性2例，呈常染色體顯性遺傳。其父現(xiàn)年53歲，于40歲發(fā)病，就診時全身呈大幅度不自主運動；其他家系成員無法追溯。

圖1 4例青少年型亨廷頓病患者頭部MRI檢查所見 1a 例1（患者3）橫斷面T1WI顯示大腦皮質輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部明顯萎縮（細箭頭所示） 1b 例2（患兒4）橫斷面T2WI顯示大腦皮質中度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部明顯萎縮（細箭頭所示） 1c 例3（患兒6）橫斷面T2WI顯示大腦皮質輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部輕度萎縮（細箭頭所示） 1d 例4（患者10）橫斷面T2WI顯示大腦皮質輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部中度萎縮（細箭頭所示）Figure 1 Head MRI findings of 4 patients with juvenile?onset HD Axial T1WI of Case 3 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and obvious atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1a).Axial T2WI of Case 4 showed moderate atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and obvious atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1b).Axial T2WI of Case 6 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1c).Axial T2WI of Case 10 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and moderate atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1d).

二、IT15基因CAG重復片段分析

共10例青少年型亨廷頓病患者，男性7例，女性3例；年齡9～28歲，平均（32.00±5.88）歲；發(fā)病年齡 6～20歲，平均（12.50±4.55）歲；IT15基因CAG重復序列43～80個，平均（63.70±14.83）個。Pearson相關分析顯示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復序列呈負相關（r=?0.865，P=0.001）。

討 論

亨廷頓病是一種以運動障礙為突出表現(xiàn)的常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，多于中年期隱匿起病，臨床表現(xiàn)除進行性加重的舞蹈樣動作、認知功能障礙和行為異?！叭?lián)征”外，還伴有共濟失調、吞咽困難和構音障礙［7］，主要病變部位位于紋狀體（包括尾狀核和殼核）和大腦皮質，病殘率較高，嚴重影響患者生活質量，目前全世界范圍內其發(fā)病率為5～10/10萬［8］。亨廷頓病最早于1872年由Huntington［9］系統(tǒng)描述而得名，于 1993年克隆出其致病基因IT15基因，定位于4p16.3，包含67個外顯子，其mRNA包含13 474個核苷酸，編碼1個包含3142 個氨基酸殘基的蛋白即亨廷頓蛋白（Htt）［10?11］，其第1外顯子內存在一段高度多態(tài)性CAG重復序列，該重復序列異常擴展可以導致亨廷頓病。

亨廷頓病發(fā)病年齡為24～46歲，平均（35.8±11.8）歲；病程 7～ 16年，平均（11.6± 5.6）年［12］，約25%患者于50歲甚至70歲后發(fā)病，臨床癥狀輕微。成年型亨廷頓病臨床表現(xiàn)多以運動障礙、智力減退和精神行為異常為主；青少年型亨廷頓病臨床少見，發(fā)病率0.50 ～ 1.00/10萬，占成年型的1/10［13］，多為父系遺傳，20歲前發(fā)病，臨床表現(xiàn)與成年型不同，主要表現(xiàn)為運動障礙、肌強直、腱反射亢進、眼動異常、嚴重認知功能障礙，特別是10歲前發(fā)病患者，臨床常出現(xiàn)帕金森樣表現(xiàn)，如肌張力障礙、震顫、運動遲緩等。本研究經(jīng)基因檢測確定159個亨廷頓病家系共211例患者攜帶異常擴展的CAG重復序列，其中149例已發(fā)病，絕大多數(shù)于成年期發(fā)病，僅10例于青少年期發(fā)病，8例表現(xiàn)為小腦體征、7例出現(xiàn)不自主運動、6例出現(xiàn)認知功能障礙、3例出現(xiàn)精神行為異常、1例出現(xiàn)震顫、1例無明確家族史患者出現(xiàn)肌張力障礙。10例患者中4例發(fā)病年齡≤10歲，分別為10、6、7和9歲；IT15基因CAG重復序列分別為80、73、79和79次，其中，10歲發(fā)病的患兒4臨床表現(xiàn)為不自主運動、行走不穩(wěn)、智力下降、睡眠中出現(xiàn)打拳、踢腿等動作；6歲發(fā)病的患兒5表現(xiàn)為行走姿勢異常、足內翻、雙上肢和面部不自主抖動、智力下降、反應較慢、情緒異常；7歲發(fā)病的患兒8表現(xiàn)為行走易跌倒、不自主運動、學習成績較差、性格孤僻；9歲發(fā)病的患兒9表現(xiàn)為雙側快復輪替動作笨拙、不自主運動，上述4例患兒均無舞蹈樣動作。國外曾報道多例青少年型亨廷頓病患者，例如，Yoon等［14］報告3例10歲前發(fā)病的患兒，CAG重復序列分別為120、100和93次，早期表現(xiàn)為精神行為異常、煩躁、多動、共濟失調、易跌倒，后期均出現(xiàn)嚴重構音障礙。Ribai等［15］研究顯示，29例法國青少年型亨廷頓病患者中19例（65.52%）最常見癥狀是嚴重認知功能障礙和精神行為異常，包括酒精和藥物依賴及精神障礙，平均發(fā)生于發(fā)病后6年；3例出現(xiàn)肌陣攣伴頭部震顫，3例為舞蹈樣動作，1例為進行性小腦共濟失調；10歲前發(fā)病的患者均為父系遺傳。Patra和 Shirolkar［16］報告 1 例 IT15 基因 CAG重復序列為83次的青少年型亨廷頓病患者，8歲發(fā)病，臨床表現(xiàn)為嚴重癲發(fā)作、共濟失調、運動遲緩、易跌倒，無明確家族史，病情進展較快，9歲時出現(xiàn)嚴重抽搐發(fā)作，病程中無舞蹈樣動作；頭部MRI顯示雙側尾狀核對稱性T2WI高信號，輕度萎縮。我們研究團隊曾報告1例少年型亨廷頓病患兒，其父未發(fā)病，但是攜帶CAG中間重復等位基因［17］。青少年型亨廷頓病與成年型亨廷頓病患者臨床表型的差異提示受累神經(jīng)核團不完全相同，可能與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程有關。

臨床上有些疾病表型與亨廷頓病極為相似，應注意鑒別診斷。（1）類亨廷頓病1型（HDL1型）：呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡21～34歲，致病基因為PRNP基因；臨床以精神癥狀為主，此外還表現(xiàn)為共濟失調、構音障礙、協(xié)調能力差、認知功能障礙、癡呆、舞蹈樣動作、面部不自主運動和肌強直等［18］。（2）類亨廷頓病2型（HDL2型）：呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡35～40歲，致病基因為JPH3基因，其變位剪切體處存在一段多態(tài)性CAG重復序列，正常重復次數(shù)為6～28次，≥41次為異常重復次數(shù)；臨床主要表現(xiàn)為肌張力障礙、舞蹈樣動作、肌強直、構音障礙、運動遲緩、癡呆、動作性震顫和精神癥狀等；頭部影像學顯示紋狀體萎縮［19］。（3）類亨廷頓病3型（HDL3型）：呈常染色體隱性遺傳，發(fā)病年齡為3～5歲，致病基因定位于4p15.3；臨床表現(xiàn)為共濟失調、痙攣、舞蹈樣動作、肌張力障礙、癲發(fā)作、錐體外系癥狀和精神癥狀等；頭部影像學顯示尾狀核和額葉皮質萎縮［20］。（4）類亨廷頓病4型（HDL4型）：又稱脊髓小腦共濟失調17型（SCA17型），呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡19～48歲，致病基因為TBP基因，其第3外顯子區(qū)存在一段多態(tài)性CAG重復序列，正常重復次數(shù)為25～42次，異常重復次數(shù)為45～66次；臨床表現(xiàn)為共濟失調、構音障礙、意向性震顫、精神癥狀、癡呆、肌陣攣、肌張力障礙和舞蹈樣動作等［21］。

多項研究顯示，CAG重復序列＜27次為正常等位基因，不引起疾??；27～35次為可引起突變的等位基因，不引起疾病，但在減數(shù)分裂過程中易發(fā)生擴展突變，使后代致??；36～40次易發(fā)生外顯不全，其根本原因是代間傳遞不穩(wěn)定，使后代重復發(fā)生明顯擴展，攜帶者可能發(fā)病也可能不發(fā)病；＞40次為完全外顯的異常等位基因，引起疾?。?2?26］。對于無明確家族史的散發(fā)病例，應通過基因檢測明確診斷，同時還應對其父母進行基因檢測，以免漏診。

發(fā)病年齡與擴展的CAG重復序列呈負相關，但僅能解釋50%～70%的發(fā)病年齡變異性。有文獻報道，青少年型亨廷頓病患者CAG重復序列＞50次，成年期發(fā)病患者CAG重復序列約為40次［27］。本研究家系中211例攜帶異常擴展的IT15基因CAG重復序列的患者中149例已發(fā)病，CAG重復序列約為40次的患者多于成年期發(fā)病，如攜帶43次CAG重復序列的患者發(fā)病年齡多≥40歲。本研究10例青少年型亨廷頓病患者中4例CAG重復序列≤50次，分別為47、49、43和50次，相對應的發(fā)病年齡分別為17、15、16和20歲，尤其是重復43次的患者16歲即發(fā)病，提示青少年型亨廷頓病患者存在其他調節(jié)因素影響發(fā)病年齡，有學者認為可能與DNA穩(wěn)定性相關遺傳調節(jié)因素有關［28］。

亨廷頓病是一種常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，逐漸出現(xiàn)運動障礙、認知功能障礙和情感障礙。由于越來越多的家系后代逐漸具備一定的醫(yī)學常識，看到上一代病情后，難免產生恐懼心理。目前該病尚無有效治療方法，基于對家系患者的明確診斷開展產前診斷和植入前診斷，中斷致病突變的傳遞，對家系后代十分重要。此外，康復訓練和心理指導對神經(jīng)變性病患者及其家屬也是至關重要的，亨廷頓病患者應盡早開展運動功能和認知功能康復，對于情感和精神障礙，應盡早予心理指導；家屬也應充分了解該病特點和病程規(guī)律，采取相應的照料，亦需要心理支持。國外最新文獻報道，神經(jīng)變性病動物模型顯示，海藻糖具有抑制異常蛋白質聚集、保護神經(jīng)細胞的作用，可能對于多聚谷氨酰胺類疾病具有一定延緩疾病發(fā)展的作用［29］。與此同時，深入研究亨廷頓病相關遺傳調節(jié)因素，對發(fā)病機制和干預治療的探索具有重要意義。

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Clinical and genetic analysis of juvenile?onset Huntington's disease:10 cases report

HAO Ying1,CHEN Yuan?yuan1,ZHANG Jin1,MA Hui?zi2,GU Wei?hong11Movement Disorder&Neurogenetics Research Center,China?Japan Friendship Hospital,Beijing 100029,China
2Department of Neurology,Beijing Tiantan Hospital,Capital Medical University,Beijing 100050,China
Corresponding authors:MA Hui?zi(Email:mahuizi1127@126.com);
GU Wei?hong(Email:jane55.gu@vip.sina.com)

ObjectiveTo investigate the clinical features and dynamic mutation of 10 cases with juvenile?onset Huntington's disease(HD).MethodsThe cytosine?adenine?guanine(CAG)repeats of IT15 gene were detected by polymerase chain reaction(PCR)and capillary electrophoresis in 272 individuals of 159 pedigrees with preliminary diagnosis of HD.The correlation between clinical features and expanded CAG repeats in the IT15 gene of 10 cases with juvenile?onset HD were studied carefully.Results Among 211 individuals carried expanded CAG repeats,10 cases onset before 20 years of age.The predominant clinical manifestations were involuntary movement and cognitive impairment.The average age of onset was(12.50±4.55)years,and the average CAG repeat number of IT15 gene was 63.70±14.83.Pearson correlation analysis showed that the age of onset was significantly and negatively correlated with the CAG repeat number(r= ?0.865,P=0.001).Conclusions1)The juvenile?onset case of HD presented with different clinical features compared with adult?onset cases.The most common presentation is cognitive decline.2)Analysis of CAG repeats of IT15 gene is necessary for the diagnosis of juvenile?onset case of HD with no family history.3)The variability in age of onset is not completely explained by the effects of expanded CAG repeats of IT15 gene,which is more prominently for the juvenile?onset cases,therefore,it is suggested that other factors may modulate the age of onset.

Huntington disease; Adolescent; Phenotype; Genes; Mutation; Pedigree

This study was supported by Grant Awarded 2010-2012 from Ministry of Health Foundation of China.

10.3969/j.issn.1672?6731.2017.08.008

衛(wèi)生部部署（管）醫(yī)院2010-2012年度臨床學科重點項目

100029北京，中日友好醫(yī)院運動障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心（郝瑩，陳園園，張瑾，顧衛(wèi)紅）；100050首都醫(yī)科大學附屬北京天壇醫(yī)院神經(jīng)內科（馬惠姿）

馬惠姿（Email：mahuizi1127@126.com）；顧衛(wèi)紅（Email：jane55.gu@vip.sina.com）

2017?06?14）