安仲武,馮小娟,蔣玲,李海英,馮小娟,史保強(qiáng)

(1 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013；2 連云港市東方醫(yī)院)

糖尿病腎病患者血清Vaspin水平變化及其與炎癥因子的關(guān)系

安仲武1,2,馮小娟2,蔣玲2,李海英2,馮小娟2,史保強(qiáng)2

(1 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013；2 連云港市東方醫(yī)院)

目的探討糖尿病腎病(DN)患者血清脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)水平變化及其與炎癥因子的關(guān)系。方法選擇2型糖尿病(T2DM)患者118例，按DN臨床進(jìn)展分期分組：糖尿病白蛋白尿正常組(DM組)38例、早期DN微量蛋白尿組39例(早期DN組)、臨床DN大量蛋白尿組41例(臨床DN組)，以同期45例體檢健康者為對(duì)照組。采用ELISA法檢測(cè)四組血清Vaspin、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6 )、單核細(xì)胞趨化因子1(MCP-1)和IL-10水平，比較各組水平，并進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果與對(duì)照組比較，其他各組Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1水平高(P均<0.05)，DM組、早期DN組、臨床DN組IL-6、TNF-α、MCP-1水平依次升高，Vaspin水平依次降低，各組間比較，P均<0.05。臨床DN組IL-10水平高于對(duì)照組，其余各組間比較，P均>0.05。Vaspin與促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.42、-0.42 、-0.46，P均<0.05)，與抗炎因子IL-10無(wú)關(guān)(r=0.21，P>0.05)。結(jié)論DN患者血清Vaspin水平升高，其與血清促炎因子呈負(fù)相關(guān)。

糖尿病腎?。恢咎禺愋越z氨酸蛋白酶抑制劑；炎癥因子

糖尿病性腎病(DN)是糖尿病的慢性并發(fā)癥之一，是糖尿病致死的主要因素。DN的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及到包括遺傳、環(huán)境、飲食等多因素共同作用而引發(fā)的一系列病理生理過(guò)程。越來(lái)越多研究證實(shí)，DN的每個(gè)階段病變都有炎癥因子參與，促炎因子、抗炎因子與DN的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1,2]。脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)是一種新近發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，其在2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展中有重要作用[3]。最新研究表明,Vaspin能夠抑制TNF-α表達(dá)，可能具有一定的抗炎功能[4]。2015年6月～2016年12月，本文通過(guò)分析DN患者血清Vaspin與炎癥因子在DN不同時(shí)期的水平變化，以探討Vaspin在DN發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2型糖尿病患者118例，均符合1999年WHO規(guī)定2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。男63例、女55例，年齡46～60歲、平均54.4歲，病程2.4～13.5年、中位病程7.2年，無(wú)其他并發(fā)癥。納入標(biāo)準(zhǔn)：①血壓≤130/90 mmHg；②空腹血糖(FPG)≤7.5 mmol/L；糖化血紅蛋白(HbA1c)≤7.0%；③血脂控制水平：總膽固醇(TC)<6.0 mmol/L，甘油三酯(TG)<1.7 mmol/L，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)>1.0 mmol/L，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)<3.0 mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：可能影響腎功能的疾病，如急慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、各種感染、尿路梗阻及使用腎毒性藥物等；可能引起尿白蛋白排泄率(UAER)升高的疾病。按DN不同進(jìn)展分期分為3組，糖尿病正常白蛋白尿組(DM組)38例，男20例、女18例,UAER<30 mg/24 h；早期DN微量蛋白尿組(早期DN組)39例，男20例、女19例,UAER 30～300 mg/24 h；臨床DN大量蛋白尿組(臨床DN組) 41例，男19例、女22例,UAER持續(xù)>300 mg/24 h。另選同期體檢健康者40例作為對(duì)照組，男21例、女19例，年齡45～62歲、平均55.3歲，排除糖尿病、高血壓、心血管系統(tǒng)疾病，家族中均無(wú)腫瘤或遺傳病史，心、肝、肺、腎功能檢查均正常。四組年齡、性別血壓有可比性。

1.2 血糖、血脂的測(cè)定 入選者均空腹10 h以上。清晨空腹抽取靜脈血10 mL，37 ℃放置30 min，3 000 r/min離心15 min分離血清。檢測(cè)FPG、HbA1c、TG、TC、HDL-C、LDL-C,另一管分離血清后-70 ℃冷藏待用。

1.3 血清Vaspin及炎癥因子水平檢測(cè) 采用ELISA法。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，Vaspin試劑由美國(guó)R&D公司提供，腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、單核細(xì)胞趨化因子1(MCP-1)和IL-10試劑由深圳晶美公司提供，用北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)NDM-9602G酶標(biāo)分析儀讀取數(shù)值。

2 結(jié)果

2.1 四組FPG、HbA1c及血脂比較 四組、血脂比較，P均>0.05。DM組、早期DN組、臨床DN組FPG、HbA1c水平高于對(duì)照組(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 四組FPG、HbA1c及血脂比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

2.2 四組Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1、IL-10水平比較 與對(duì)照組比較，其他各組Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1水平高(P均<0.05)，DM組、早期DN組、臨床DN組IL-6、TNF-α、MCP-1水平依次升高，Vaspin水平依次降低，各組間比較，P均<0.05。臨床DN組IL-10水平高于對(duì)照組，其余各組間比較，P均>0.05。見(jiàn)表2。

表2 四組Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1、IL-10水平比較

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05；與DM組比較，bP<0.05；與早期DN組比較，cP<0.05。

2.3 Vaspin與各炎癥因子的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Vaspin與促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.42、-0.42 、-0.46 ，P均<0.05)，與抗炎因子IL-10無(wú)關(guān)(r=0.21，P>0.05)。

3 討論

Vaspin是最近研究較多的脂肪細(xì)胞因子，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑家族成員，具有胰島素增敏作用，參與多種疾病特別是2型糖尿病患者體內(nèi)糖、脂代謝調(diào)節(jié)，在2型糖尿病的疾病進(jìn)展中有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin水平隨著糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生而下降，推測(cè)在糖尿病初期Vaspin水平升高可能是IR的一種防御機(jī)制，可能參與抑制某些與胰島素功能相關(guān)的蛋白激酶活性，隨著并發(fā)癥的發(fā)生，這種代償機(jī)制減弱，導(dǎo)致Vaspin水平下降[6]。但具體機(jī)制是否如此，仍有待研究證實(shí)。最近研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin在疾病的炎癥反應(yīng)進(jìn)程中發(fā)揮一定的抗炎作用[4]。研究發(fā)現(xiàn)，肥胖小鼠給予重組Vaspin能顯著減少炎癥因子TNF-α的表達(dá)，增加抗炎因子和糖尿病保護(hù)性因子脂聯(lián)素的表達(dá)[7]。有研究報(bào)道，Vaspin可能通過(guò)影響內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞來(lái)改變血管內(nèi)環(huán)境，發(fā)揮重要的抗炎作用，有益于斑塊的穩(wěn)定，在動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制中扮演著重要角色[8,9]。這些研究報(bào)道均表明，Vaspin參與眾多疾病的炎癥反應(yīng)進(jìn)程。

DN作為2型糖尿病的主要并發(fā)癥之一，其發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，促炎因子和抗炎因子的相互作用在DN的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。TNF-α、IL-6、MCP-1是體內(nèi)重要的促炎因子，IL-10具有一定的抗炎作用，它們?cè)贒N患者機(jī)體的免疫與炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。本文通過(guò)分析在DN炎癥進(jìn)展中血清Vaspin與4種炎癥因子水平的變化及其相互關(guān)系，探討Vaspin在DN炎癥病變中的作用。

既往研究表明，血清Vaspin水平與體內(nèi)糖脂代謝關(guān)系密切，較高的血糖、血脂水平導(dǎo)致的機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致Vaspin水平升高[10]，較高的血壓水平會(huì)激活體內(nèi)的炎癥因子[11]，本研究為減少這方面帶來(lái)的影響，特別選擇血糖、血脂、血壓控制較好的2型糖尿病患者作為研究對(duì)象。在摒除上述因素影響后，本研究顯示糖尿病患者血清IL-6、TNF-α、MCP-1水平比對(duì)照組高，并且隨著白蛋白尿的增加而逐漸升高，說(shuō)明糖尿病患者本身存在炎癥反應(yīng)，且嚴(yán)重程度與白蛋白尿量有關(guān)。血清Vaspin水平隨著蛋白尿水平增加而降低，說(shuō)明Vaspin參與了DN的炎癥反應(yīng)進(jìn)程。IL-10水平有升高但不顯著，與研究報(bào)道[12]有所差異，可能與選擇病例不同有關(guān)。另外通過(guò)單因素相關(guān)分析顯示，血清Vaspin水平與TNF-α、IL-6和MCP-1呈負(fù)相關(guān)，提示Vaspin及炎癥因子相互影響、相互作用，共同參與DN患者病情的發(fā)生、發(fā)展，但具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究?？傊?，炎癥反應(yīng)始終伴隨著DN的病情進(jìn)展，脂肪細(xì)胞因子Vaspin有一定的抗炎作用，其水平變化與炎癥因子密切相關(guān)，具體的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)2型糖尿病患者Vaspin及其他炎癥因子水平并及早干預(yù)，對(duì)DN的預(yù)防與治療有積極的臨床意義，其也是反映DN患者病變進(jìn)展的重要指標(biāo)。

[1] Wada J, Makino H. Inflammation and the pathogenesis of diabetic nephropathy[J]. Clin Sci (Lond), 2013,124(3):139-152.

[2] Duran-Salgado MB, Rubio-Guerra AF. Diabetic nephropathy and inflammation[J]. World J Diabetes, 2014,5(3):393-398.

[3] Wei X, Jian WH, Peng SM, et al. Role of serum vaspin in progression of type 2 diabetes: a 2-year cohort study[J]. PLoS One, 2014,9(4):e94763.

[4] Senolt L, Polanska M, Filkova M, et al. Vaspin and omentin: new adipokines differentially regulated at the site of inflammation in rheumatoid arthritis[J]. Ann Rheum Dis, 2010,69(7):1410-1411.

[5] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì).關(guān)于糖尿病的新診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型[J].中國(guó)糖尿病雜志,2005,8(1):527.

[6] 馬敏.Vaspin與2型糖尿病及其慢性并發(fā)癥研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)師雜志,2015,17(4):638-640.

[7] Phalitakul S, Okada M, Hara Y, Yamawaki H, et al. Vaspin prevents TNF-α-induced intracellular adhesion molecule-1 via inhibiting reactive oxygen species-dependent NF-κB and PKCθ activation in cultured rat vascular smooth muscle cells[J]. Pharmacol Res, 2011,64(5):493-500.

[8] Karbek B, Bozkurt NC, Topaloglu O, et al. Relationship of vaspin and apelin levels with insulin resistance and atherosclerosis in metabolic syndrome[J]. Minerva Endocrinol, 2014,39(2):99-105.

[9] 李海英,楊收平,秦繼寶,等.冠心病患者血清脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑與炎性因子的相關(guān)性[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2016,36(16):3957-3959.

[10] Yang L, Chen SJ, Yuan GY, et al. Changes and clinical significance of serum vaspin levels in patients with type 2 diabetes[J]. Genet Mol Res, 2015,14(3):11356-1361.

[11] 鐘海蘭.高血壓與炎癥的研究進(jìn)展[J].心血管病學(xué)進(jìn)展,2010,31(2):203-205.

[12] 咸偉,鄭航,王素娟,等.血清IL-8、IL-10及IL-18水平與不同分期2型糖尿病腎病的關(guān)系[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2013,29(13):2158-2160.

連云港市衛(wèi)生科技項(xiàng)目(局201524)。

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.45.025

R587.2

B

1002-266X(2017)45-0076-03

2017-06-07)