辛小青 董曉芳 佟建明

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193)

不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血清、雞蛋中抗體含量的影響

辛小青 董曉芳*佟建明

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193)

本試驗(yàn)旨在研究不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、器官指數(shù)和血清、雞蛋中抗體含量的影響。選取54只38周齡的京紅1號(hào)產(chǎn)蛋雞，隨機(jī)分為3組，每組18個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只雞，單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000 mg/kg微波真空干燥所得苜蓿粗多糖1(ACPS1)和減壓烘干干燥所得苜蓿粗多糖2(ACPS2)。試驗(yàn)期65 d。結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，1)在試驗(yàn)第28～36天，ACPS1組蛋雞的平均日采食量顯著增加(P<0.05)；飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞各階段的產(chǎn)蛋率和平均日增重均無顯著影響(P>0.05)。2)試驗(yàn)第63天，ACPS1組蛋雞的蛋黃顏色顯著增加(P<0.05)；試驗(yàn)第30天，飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的蛋殼顏色、蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位均無顯著影響(P>0.05)。3)ACPS1組蛋雞的肝臟指數(shù)顯著增加(P<0.05)，ACPS2組的卵巢指數(shù)顯著降低(P<0.05)；且ACPS1組的肝臟指數(shù)和卵巢指數(shù)均顯著高于ACPS2組(P<0.05)。飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的脾臟指數(shù)和輸卵管指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。4)ACPS1組蛋雞血清中免疫球蛋白Y(IgY)含量顯著增加(P<0.05)，ACPS1和ACPS2組血清中新城疫抗體(NDV-Ab)、蛋黃中NDV-Ab、蛋清中免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量均顯著增加(P<0.05)；且ACPS1組蛋黃中NDV-Ab、蛋清中IgA和IgM含量均顯著高于ACPS2組(P<0.05)。以上結(jié)果表明，飼糧中添加苜蓿粗多糖能加深蛋雞的蛋黃顏色，增加血清和雞蛋中的抗體含量，且ACPS1的效果更佳。

苜蓿粗多糖；蛋雞；生產(chǎn)性能；蛋品質(zhì)；抗體含量

自20世紀(jì)60年代以來，多糖的免疫調(diào)節(jié)作用就一直備受人們的關(guān)注。多糖能夠通過增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能，從而促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)或改善其生產(chǎn)性能。苜蓿粗多糖(crude polysaccharides isolated from alfalfa，ACPS)是從苜蓿莖、葉中提取的水溶性雜多糖，屬非淀粉多糖；為淺黃色粉末，不含鞣質(zhì)和淀粉，為酸性多糖。經(jīng)毛細(xì)管電泳法檢測(cè)，苜蓿粗多糖主要含木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸，是苜蓿的主要生物活性物質(zhì)之一。已有研究表明，飼糧中添加一定劑量的苜蓿粗多糖可以促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、改善肉品質(zhì)、提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力[5-6]、降脂、抗氧化、調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系、促進(jìn)有益菌的增殖等，其作為一種綠色環(huán)保的新型飼料添加劑越來越受到人們的重視。劉晴雪等[10]研究表明，飼糧中添加苜蓿多糖能顯著提高肉仔雞的體液免疫和細(xì)胞免疫功能。江振瑩等[11]研究表明，肉仔雞早期飼糧中添加苜蓿多糖能顯著提高血清新城疫抗體滴度。張世軍等[12]通過給仔豬皮下注射豬瘟兔化弱毒疫苗同時(shí)配伍肌內(nèi)注射苜蓿多糖，結(jié)果顯示，與豬瘟兔化弱毒疫苗對(duì)照組相比，苜蓿多糖配伍豬瘟兔化弱毒疫苗顯著提高仔豬外周血液免疫球蛋白G(IgG)含量，增強(qiáng)了自身抵抗力。但目前關(guān)于苜蓿粗多糖對(duì)雞蛋中抗體含量的影響尚未見報(bào)道。

研究表明，植物多糖的生物學(xué)活性與其理化組分、水溶性、分子質(zhì)量大小、分支度、黏度和高級(jí)螺旋結(jié)構(gòu)等緊密相關(guān)，主要受樣品處理方法、提取工藝參數(shù)和干燥方法3大因素的影響，其中分子質(zhì)量大小和黏度與干燥方法密切相關(guān)[13]。熱風(fēng)干燥、真空干燥、微波干燥等干燥方法均能對(duì)多糖的構(gòu)象產(chǎn)生顯著影響[14]，使多糖發(fā)生不可逆變化，影響多糖的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性[15]。Fan等[15]和Ma等[16]分別研究不同干燥方法對(duì)靈芝多糖和白樺茸多糖抗氧化活性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干燥方法對(duì)多糖的抗氧化活性有顯著影響。Wu[17]分析冷凍干燥、熱風(fēng)干燥和真空干燥方法對(duì)佛手多糖化學(xué)組分和抗氧化活性的影響，結(jié)果也表明干燥方法能夠影響多糖的生物學(xué)功能。然而，目前有關(guān)干燥方法對(duì)苜蓿多糖生物學(xué)活性影響的研究尚無相關(guān)報(bào)道。因此，本研究以京紅1號(hào)產(chǎn)蛋雞為研究對(duì)象，通過在玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧中分別添加微波真空干燥苜蓿粗多糖1(ACPS1)和減壓烘干干燥苜蓿粗多糖2(ACPS2)，研究其對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、器官指數(shù)和血清、雞蛋中抗體含量的影響，并優(yōu)選最佳干燥方法，旨在為苜蓿粗多糖作為新型飼料添加劑提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)開發(fā)利用高活性苜蓿粗多糖具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用苜蓿粗多糖由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所飼料添加劑研究室提供。采用水提、醇沉、脫蛋白法提取，具體操作如下：紫花苜蓿收割、晾曬、打捆，切割為40～60 cm長(zhǎng)度的草段，稱重，加入8倍重量的水，100 ℃循環(huán)提取4 h，200目篩過濾，減壓濃縮，醇沉，3%三氯乙酸脫蛋白，再醇沉，然后分別用微波真空干燥和減壓烘干干燥工藝加工得到ACPS1和ACPS2，最后真空包裝，備用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)動(dòng)物選用38周齡京紅1號(hào)產(chǎn)蛋雞54只。試驗(yàn)飼糧以玉米、豆粕為主要原料，參考NRC(1994)推薦的蛋雞營(yíng)養(yǎng)需要量確定營(yíng)養(yǎng)水平，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of the diet：Mn 63.6 mg，Zn 69 mg，F(xiàn)e 30 mg，Cu 6.25 mg，I 0.4 mg，Se 0.2 mg，VA 8 000 IU，VD33 000 IU，VE 15 IU，VK32 mg，VB12 mg，VB24 mg，VB64 mg，VB120.01 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 12 mg，煙酸 nicotinic acid 40 mg，葉酸 folic acid 1 mg，生物素 biotin 0.1 mg，膽堿 choline 212.5 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平均為計(jì)算值。Nutrient levels were all calculated values.

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用54只38周齡、體重和產(chǎn)蛋率相近、健康的京紅1號(hào)產(chǎn)蛋雞，隨機(jī)分為3組，每組18個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只雞。單籠飼養(yǎng)，籠上標(biāo)明組號(hào)和重復(fù)號(hào)。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼糧分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000 mg/kg ACPS1和ACPS2。預(yù)試期7 d，試驗(yàn)期65 d。在試驗(yàn)第30天，肌內(nèi)注射新城疫Ⅳ系活疫苗(LaSota株)進(jìn)行免疫。

飼養(yǎng)試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所動(dòng)物房進(jìn)行，試驗(yàn)開展于冬季，具體試驗(yàn)時(shí)間為2014年11月11日至2015年1月15日。采用3層層疊式籠養(yǎng)，單籠飼養(yǎng)，每天喂料3次，自由采食和飲水。采用自然加人工補(bǔ)光，恒定光照時(shí)間為16 h(采用雞舍照明控制器)，每天記錄舍內(nèi)溫度、濕度，觀察雞只健康狀況，并隨時(shí)記錄病死雞。每隔1天清糞1次，保持舍內(nèi)清潔衛(wèi)生。試驗(yàn)期間雞舍溫度為(15.30±1.21) ℃。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.4.1 苜蓿粗多糖各組分含量

分別按照《GB/T 6435—2014飼料中水分的測(cè)定方法》、《GB/T 6432—94飼料中粗蛋白質(zhì)的測(cè)定方法》和《GB/T 6438—2007飼料中粗灰分的測(cè)定方法》測(cè)定2種苜蓿粗多糖樣品中水分、粗蛋白質(zhì)和粗灰分的含量；以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸法測(cè)定樣品中多糖含量；以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法測(cè)定樣品中黃酮含量；以齊墩果酸為標(biāo)準(zhǔn)品，采用5%香草醛-冰醋酸顯色法測(cè)定樣品中皂苷含量。

1.4.2 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間，以重復(fù)為單位記錄試驗(yàn)雞每天的產(chǎn)蛋數(shù)；試驗(yàn)第27、36、50和64天晚上結(jié)料，記錄各重復(fù)試驗(yàn)雞的耗料量，并計(jì)算平均日采食量(ADFI)；試驗(yàn)第1、28和65天空腹稱重，記錄各重復(fù)試驗(yàn)雞的體重，并計(jì)算平均日增重(ADG)。

1.4.3 蛋品質(zhì)

于試驗(yàn)第30和63天，采集試驗(yàn)雞當(dāng)天所產(chǎn)雞蛋，12 h內(nèi)測(cè)定蛋品質(zhì)。采用蛋殼顏色測(cè)定儀(QCR，TSS公司，英國)測(cè)定蛋殼顏色；采用蛋品質(zhì)測(cè)定儀(EMT-2500，Robotmation公司，日本)測(cè)定蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色。

1.4.4 器官指數(shù)

于試驗(yàn)第65天，將所有試驗(yàn)雞頸動(dòng)脈放血致死，迅速摘取肝臟、脾臟、卵巢和輸卵管稱重并記錄，計(jì)算各組織器官的器官指數(shù)。

1.4.5 血清和雞蛋中抗體含量

新城疫Ⅳ系活疫苗免疫后第7天早上，空腹用真空采血針翅靜脈采血，收集于5 mL離心管中，室溫靜置，待有血清析出，分離血清并分裝到1.5 mL離心管中備用。血清中免疫球蛋白Y(IgY)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)和新城疫抗體(NDV-Ab)含量采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)測(cè)定，測(cè)定所用試劑盒均購自北京奇松生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。

同日下午，收集全部雞蛋并標(biāo)號(hào)，用于蛋黃中IgY和NDV-Ab總量、含量以及蛋清中IgA和IgM總量、含量的測(cè)定，測(cè)定方法同血清。在測(cè)定蛋黃和蛋清中抗體總量和含量時(shí)，首先要對(duì)蛋清和蛋黃進(jìn)行預(yù)處理，方法如下：

蛋黃前處理：用蛋清蛋黃分離器將蛋黃分離出來，置于干凈的培養(yǎng)皿中，用蒸餾水沖洗蛋黃膜，用濾紙吸干蛋黃膜上的水，用鑷子去除系帶和卵黃膜，記錄蛋黃液體積并收集蛋黃液。蛋黃抗體的制備按照文獻(xiàn)[18]的方法，取2 mL蛋黃液，加4 mL杜氏磷酸鹽緩沖液(D-PBS)，漩渦振蕩器上充分混勻，加入6 mL氯仿，充分混合，形成乳濁液，1 000×g室溫離心30 min；離心后，離心管中液體分離為3層，底層為卵磷脂層，中間層為蛋黃半固體乳狀層，上層為蛋黃中蛋白質(zhì)水化層；將含有免疫球蛋白的上清液移出，分裝并貯存于-20 ℃待測(cè)。

蛋清前處理：從蛋小頭打破雞蛋，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)雞蛋促進(jìn)蛋清流出并將蛋清收集到量筒中，用巴斯德吸管將蛋殼中剩余的蛋清一并轉(zhuǎn)入量筒中，記錄蛋清體積。蛋清抗體的制備按照文獻(xiàn)[13]的方法，取2 mL蛋清，加入4 mL D-PBS，漩渦振蕩器上充分振蕩混合均勻，然后加入0.21 g粉末狀聚乙二醇8000(PEG-8000)使終濃度為3.5%(重量體積比)，并充分混合直到PEG-8000完全溶解；再用超高速離心機(jī)將樣品在14 000×g室溫離心10 min，收集含有免疫球蛋白的上清液，分裝，貯存于-20 ℃待測(cè)。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖各組分含量采用SAS 9.2軟件t檢驗(yàn)進(jìn)行方差分析，其余數(shù)據(jù)采用ANOVA程序進(jìn)行方差分析，用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較，以P<0.05為差異顯著水平。其中產(chǎn)蛋率經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖各組分含量

由表2可知，ACPS1中多糖、黃酮和皂苷含量顯著高于ACPS2(P<0.05)，水分含量顯著低于ACPS2(P<0.05)；不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖中粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量無顯著差異(P>0.05)。

表2 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖各組分含量

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，在試驗(yàn)第28～36天，ACPS1組蛋雞的平均日采食量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，與ACPS2組差異不顯著(P>0.05)；其余各階段各組的平均日采食量均無顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞各階段的產(chǎn)蛋率和平均日增重均無顯著影響(P>0.05)；在試驗(yàn)第1～65天，ACPS1和ACPS2組的平均日增重分別較對(duì)照組分別增加了85.7%和34.7%。

表3 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.3 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表4可知，試驗(yàn)第63天，ACPS1組蛋雞的蛋黃顏色顯著高于對(duì)照組(P<0.05),與ACPS2組無顯著差異(P>0.05)；ACPS1和ACPS2組的蛋白高度和哈氏單位與對(duì)照組相比均增加，但差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)第30天，與對(duì)照組相比，飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的蛋殼顏色、蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位均無顯著影響(P>0.05)。

表4 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

蛋殼顏色數(shù)值為光反射率，以白色為83.6%、黑色為0校準(zhǔn)。

Shell color values were the luminous reflectance, calibrate before detection (white, 83.6%; black, 0).

2.4 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞器官指數(shù)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，ACPS1組蛋雞的肝臟指數(shù)顯著增加(P<0.05)，ACPS2組的卵巢指數(shù)顯著降低(P<0.05)；且ACPS1組的肝臟指數(shù)和卵巢指數(shù)均顯著高于ACPS2組(P<0.05)。與對(duì)照組相比，飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的脾臟指數(shù)和輸卵管指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。

表5 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞器官指數(shù)的影響

2.5 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞血清、蛋黃和蛋清中抗體含量的影響

由表6可知，ACPS1組蛋雞血清中IgY含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，與ACPS2組無顯著差異(P>0.05)；與對(duì)照組相比，ACPS1和ACPS2組血清中NDV-Ab含量顯著增加(P<0.05)。與對(duì)照組相比，ACPS1和ACPS2組蛋黃中NDV-Ab總量和含量均顯著增加(P<0.05)，且ACPS1組蛋黃中NDV-Ab含量顯著高于ACPS2組(P<0.05)。ACPS1和ACPS2組蛋清中IgA、IgM總量和含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，且ACPS1組蛋清中IgA和IgM含量顯著高于ACPS2組(P<0.05)。

表6 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞血清、蛋黃和蛋清中抗體含量的影響

3 討 論

3.1 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響

植物多糖能夠通過增強(qiáng)機(jī)體免疫力[19-20]、抗氧化[21]、抗炎[22-23]、抗感染[24-25]，促進(jìn)腸道有益微生物乳酸桿菌、雙歧桿菌的增殖[26]，促進(jìn)粗蛋白質(zhì)代謝率、加快蛋白質(zhì)的合成[27]及減少動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)[28]等，最終影響動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育、生產(chǎn)性能和畜產(chǎn)品品質(zhì)。Liu等[29]對(duì)熱應(yīng)激狀態(tài)下新西蘭雄兔的研究表明，飼糧中添加0.5%的苜蓿多糖能夠顯著增加試驗(yàn)第1～21天的平均日采食量和平均日增重，降低飼料轉(zhuǎn)化率。歐陽克蕙等研究表明，飼糧中添加1.0%和1.5%的水溶性苜蓿多糖均能顯著增加肉仔雞的平均體重和平均日增重，降低料重比，且1.0%添加組的效果要優(yōu)于1.5%添加組。也有研究表明，植物多糖對(duì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能無顯著影響。Chen等[30]研究表明，飼糧中分別添加黃芪多糖和牛膝多糖對(duì)肉仔雞的日增重、采食量、料重比和死亡率均無顯著影響。江振瑩等[11]研究表明，肉仔雞早期飼糧中添加苜蓿多糖對(duì)生產(chǎn)性能無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能無顯著影響，僅在試驗(yàn)第28～36天，ACPS1組蛋雞的平均日采食量顯著高于對(duì)照組，這與Chen等[30]和江振瑩等[11]的結(jié)果相一致。造成上述試驗(yàn)結(jié)果不一致的原因可能與苜蓿多糖的來源、提取工藝、干燥工藝、純度及動(dòng)物的種類、年齡、飼養(yǎng)環(huán)境不同有關(guān)。試驗(yàn)第29～65天時(shí)，對(duì)照組蛋雞的平均日增重為-4.72 g。這可能是由于天氣寒冷、雞舍溫度低，機(jī)體能量代謝加快以增加自身抵抗寒冷的能力，然而平均日采食量增加不顯著造成能量代謝的負(fù)平衡，平均日增重出現(xiàn)了負(fù)增長(zhǎng)；而苜蓿粗多糖添加組的蛋雞由于平均日采食量增加，機(jī)體抗應(yīng)激的能力增強(qiáng)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率增加，平均日增重增加。

蛋白高度和哈氏單位是雞蛋新鮮程度的重要指標(biāo)。蛋白高度和哈氏單位越大，蛋白越黏稠，蛋白的品質(zhì)越好[31]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)第63天，ACPS1和ACPS2組的蛋白高度和哈氏單位均高于對(duì)照組。這可能是由于苜蓿粗多糖增強(qiáng)了雞蛋中蛋白質(zhì)的代謝[27]，從而使蛋白高度和哈氏單位增加。蛋黃顏色的深淺取決于家禽從飼糧中攝取的類胡蘿卜素的數(shù)量和種類。家禽不能合成類胡蘿卜素物質(zhì)，只能從飼糧中攝取[32]。葉黃素是飼糧中常見的類胡蘿卜素物質(zhì)，飼糧中二酯形態(tài)的葉黃素，經(jīng)動(dòng)物消化道水解(皂化)變成自由態(tài)的葉黃素才能被吸收進(jìn)入血液，血液中的葉黃素又經(jīng)酯化作用形成二酯態(tài)葉黃素儲(chǔ)存于蛋黃內(nèi)。本試驗(yàn)中2種干燥工藝加工的苜蓿粗多糖均增加了試驗(yàn)第63天的蛋黃顏色，這可能是由于多糖具有抗氧化能力[33]，阻止葉黃素被氧化，從而增加了色素的沉積。其中ACPS1組的蛋黃顏色顯著高于對(duì)照組，這可能與ACPS1中多糖含量高有關(guān)，還需從多糖分子質(zhì)量大小、結(jié)構(gòu)等方面做進(jìn)一步探究。

3.2 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞器官指數(shù)的影響

脾臟是動(dòng)物機(jī)體最大的免疫組織，含有大量的免疫活性細(xì)胞。免疫器官的重量可以直接反映其發(fā)育狀況，而免疫器官的發(fā)育狀況能初步反映動(dòng)物機(jī)體的免疫應(yīng)答水平，并能影響免疫功能和抵御疾病的能力。研究表明，多糖能夠緩解免疫抑制機(jī)體免疫器官的萎縮，促進(jìn)免疫器官的發(fā)育[10,34-35]。Chen等[36]給環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠口服純化的五味子多糖能夠顯著提高胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，且脾臟指數(shù)隨五味子多糖劑量的增加而增加。Wang等[37]給小鼠腹腔注射不同劑量的蛹蟲草多糖，與空白對(duì)照組相比，70 mg/kg蛹蟲草多糖陽性對(duì)照組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著增加；17.5、35.0和70.0 mg/kg蛹蟲草多糖的環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著增加，且呈劑量依賴關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞的脾臟指數(shù)無顯著影響，這可能與動(dòng)物品種、年齡及健康狀態(tài)有關(guān)，免疫抑制狀態(tài)下，植物多糖能夠緩解動(dòng)物機(jī)體的免疫器官萎縮，促使機(jī)體恢復(fù)正常的免疫水平，因此作用效果更加顯著；而正常產(chǎn)蛋雞自身的免疫器官已經(jīng)發(fā)育成熟，免疫系統(tǒng)處于較為平衡的狀態(tài)，因此作用效果不顯著。

肝臟指數(shù)是反映肝臟健康狀況的指標(biāo)之一。昌友權(quán)等[38]研究表明，玉米須多糖能夠顯著降低四氯化碳(CCl4)肝損傷小鼠的肝臟指數(shù)，起到保肝作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，ACSP1組蛋雞的肝臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組。研究結(jié)果不一致的原因可能是由于本試驗(yàn)是在冬季開展，雞舍溫度為(15.30±1.21) ℃，而雞舍最適宜產(chǎn)蛋溫度為18～23 ℃；而在北方，尤其是冬天，長(zhǎng)期保持寒冷的天氣(4 ℃以下，尤其是-10 ℃以下)，家禽常常會(huì)產(chǎn)生寒冷應(yīng)激，維持需要增加[39]；此時(shí)苜蓿粗多糖可能通過促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成、抑制蛋白質(zhì)分解，使組織中蛋白質(zhì)的沉積增加，從而提高肝細(xì)胞活性，增加產(chǎn)蛋雞肝臟的代謝能力，提高機(jī)體對(duì)寒冷的抵抗能力，這也與苜蓿粗多糖添加組的平均日采食量增加而生產(chǎn)性能無顯著變化相一致。

卵巢是雌性動(dòng)物的重要生殖分泌器官，是產(chǎn)生卵子及類固醇激素的重要場(chǎng)所。卵巢中含有各級(jí)卵泡的數(shù)目及形態(tài)都可反映卵巢的功能及機(jī)體生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)的狀況。家禽卵巢指數(shù)是反映卵巢功能狀況的指標(biāo)之一。官麗輝等[40]研究表明，黃芪多糖能夠通過調(diào)節(jié)生殖激素含量，改善母雞的卵巢功能，促進(jìn)卵泡發(fā)育與排卵。本試驗(yàn)結(jié)果表明，ACPS2組蛋雞的卵巢指數(shù)顯著低于對(duì)照組，與上述結(jié)果不一致，需要進(jìn)一步研究證實(shí)。

3.3 不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞血清、蛋黃和蛋清中抗體含量的影響

動(dòng)物機(jī)體血清中免疫球蛋白含量是衡量體液免疫的重要指標(biāo)。研究表明，多糖能夠增強(qiáng)機(jī)體血清中免疫球蛋白的含量，提高機(jī)體免疫力[41-44]。楊侃侃等[26]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加800 mg/kg的刺五加多糖能夠顯著增加試驗(yàn)第1～21天斷奶仔豬血清中IgG、IgA和IgM含量，增強(qiáng)仔豬的抵抗力。張世軍等[12]研究發(fā)現(xiàn)，仔豬皮下接種豬瘟兔化弱毒疫苗的同時(shí)肌肉注射0.2 mL的苜蓿多糖溶液能夠顯著促進(jìn)外周血B淋巴細(xì)胞數(shù)量和IgG含量。李淑芳等[45]研究表明，米糠多糖能夠顯著促進(jìn)試驗(yàn)第7、14和21天京白939雛雞血清中IgG和IgA含量，顯著促進(jìn)試驗(yàn)第7和14天血清中IgM含量，而對(duì)試驗(yàn)第21天血清中IgM含量無顯著影響。Yu等[46]研究表明，蘆薈多糖能顯著增加口腔潰瘍小鼠血漿中IgG、IgA和IgM含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明，ACPS1組蛋雞血清中IgY含量顯著高于對(duì)照組，ACPS1和ACPS2組血清中NDV-Ab含量顯著高于對(duì)照組，這與上述結(jié)果相一致，說明飼糧中添加苜蓿粗多糖能夠通過提高血清抗體含量，增加機(jī)體免疫力。

雞卵黃能夠富集從血清轉(zhuǎn)移來的大量抗體[47]。雞蛋中的非特異性抗體主要為IgY、IgA和IgM，其中血清中的IgY通過卵巢濾泡上的受體，經(jīng)胞吞轉(zhuǎn)運(yùn)方式進(jìn)入卵黃[48]，而IgA和IgM則由輸卵管黏膜分泌且主要存在于蛋清中[49]。研究證實(shí)，沉積到卵黃中的IgY含量和血清中IgY含量呈正相關(guān)關(guān)系[50]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，ACPS1和ACPS2組蛋雞蛋黃中IgY含量增加，但與對(duì)照組相比無顯著差異，而蛋黃中NDV-Ab總量和含量顯著高于對(duì)照組，蛋清中IgA、IgM總量和含量顯著高于對(duì)照組。這可能與飼糧中添加苜蓿粗多糖提高了血清中的抗體含量有關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果也表明，ACPS1組蛋清中IgA、IgM含量和蛋黃中NDV-Ab含量均顯著高于ACPS2組，這可能與微波真空干燥溫度低、干燥速度快且均勻、對(duì)干燥物料的質(zhì)量影響小且具有滅菌功能等特性有關(guān)，有待于進(jìn)行粗多糖結(jié)構(gòu)和組分分析，進(jìn)一步探究原因。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加ACPS1和ACPS2對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能均無顯著影響。

② 飼糧中添加ACPS1顯著增加了試驗(yàn)第63天蛋雞的蛋黃顏色。

③ 飼糧中添加不同干燥工藝加工的苜蓿粗多糖顯著增加了蛋雞血清、蛋黃和蛋清中的抗體含量，且ACPS1的效果更佳。

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EffectsofCrudePolysaccharidesIsolatedfromAlfalfaUsedDifferentDryingProcessonPerformance,EggQualityandSerumandEggAntibodyContentsofLayingHens

XIN Xiaoqing DONG Xiaofang*TONG Jianming

(InstituteofAnimalScience,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193,China)

This experiment was conducted to study the effects of crude polysaccharides isolated from alfalfa (ACPS) used different drying process on performance, egg quality, organ indexes and serum and egg antibody contents of laying hens. Fifty four 38-week-oldJinghongNo.1 laying hens were randomly allocated to 3 groups with 18 replicates per group and 1 hen per replicate fed in single cage. The hens in control group were fed a corn-soybean meal basal diet, and those in experimental groups were fed the basal diet supplemented with 1 000 mg/kg ACPS by microwave vacuum drying method (ACPS1) and ACPS by decompression drying method (ACPS2), respectively. The experiment lasted for 65 days. The results showed as follows： compared with the control group, 1) the average daily feed intake of laying hens in ACPS1 group was significantly increased from 28 to 36 days (P<0.05). Dietary ACPS used different drying process had no significant effects on egg production and average daily gain of laying hens among all phases (P>0.05). 2) The yolk color of laying hens in ACPS1 group was significantly increased at 63 days (P<0.05). Dietary ACPS used different drying process had no significant effects on eggshell color, yolk color, albumen height and Haugh unit at 30 days (P>0.05). 3) The liver index of laying hens in ACPS1 group was significantly increased (P<0.05), the ovarian index in ACPS2 group was significantly decreased (P<0.05), and the liver index and ovarian index in ACPS1 group were significantly higher than those in ACPS2 group (P<0.05). Dietary ACPS used different drying process had no significant effects on spleen index and oviduct index (P>0.05). 4) The content of immunoglobulin Y (IgY) in serum of laying hens in ACPS1 group was significantly increased (P<0.05), the contents of Newcastle disease antibody (NDV-Ab) in serum, NDV-Ab in yolk and immunoglobulin A (IgA) and immunoglobulin M (IgM) in albumen in ACPS1 and ACPS2 groups were significantly increased (P<0.05). The contents of NDV-Ab in yolk and IgA and IgM in albumen in ACPS1 group were higher than those in ACPS2 group (P<0.05). These data suggest that dietary ACPS can deepen the yolk color, increase the content of antibody in serum and egg, and ACPS1 has a better effect.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(12)：4603-4612]

crude polysaccharides isolated from alfalfa; laying hens; performance; egg quality; antibody content

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.12.043

S816.7

A

1006-267X(2017)12-4603-10

2017-05-22

“十二五”國家科技支撐計(jì)劃課題(2013BAD10B04)；國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(CARS-41-K16)；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS08)

辛小青(1990—)，女，甘肅天水人，碩士研究生，從事蛋雞營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail: xxqing2015@163.com

*通信作者：董曉芳，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: xiaofangd1124@sina.com

*Corresponding author, associate professor, E-mail: xiaofangd1124@sina.com

(責(zé)任編輯 李慧英)