布魯氏菌病患者中PD-1和PD-L1的表達①

龐 盼 張峰波 朱玥潔 賈 斌 張躍新 張春桃 甫拉提·熱西提 丁劍冰

(新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011)

布魯氏菌病患者中PD-1和PD-L1的表達①

龐 盼 張峰波②朱玥潔③賈 斌④張躍新④張春桃 甫拉提·熱西提 丁劍冰

(新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011)

目的研究程序性死亡受體1(PD-1)/與配體(PD-L1)以及相關(guān)細胞因子轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)和白細胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)在布魯氏菌病(Brucellosis)患者中的變化。方法選取60例布魯氏菌病患者與60例健康志愿者，采用流式細胞術(shù)分別檢測其外周血單個核細胞(PBMC)中CD3+T細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞中PD-1的表達，以及樹突狀細胞(Dendritic cell，DC)中PD-L1的表達，同時采用流式液相多重蛋白定量技術(shù)(Cytometric bead array，CBA )檢測血清中TGF-β和IL-10的變化，采用Pearson法分析布魯氏菌病患者體內(nèi)PD-1與TGF-β及IL-10的相關(guān)性，并對34例布魯氏菌病治愈患者進行了追蹤隨訪。結(jié)果與正常對照組相比，布魯氏菌病患者組外周血中PD-1、PD-L1的表達及血清中TGF-β和IL-10的水平均明顯升高(P<0.01),而治愈組外周血中PD-1、PD-L1的表達及血清中TGF-β和IL-10的水平較治療前明顯降低(P<0.01),并且布魯氏菌病患者組PD-1的表達與TGF-β (r=0.817,P<0.01)及IL-10均呈正相關(guān)(r=0.835,P<0.01)。結(jié)論PD-1/PD-L1及TGF-β和IL-10在布魯氏菌病患者體內(nèi)高表達，可能共同參與了布魯氏菌對宿主免疫應(yīng)答的負性調(diào)控作用。

PD-1；PD-L1；布魯氏菌?。患毎蜃?/p>

布魯氏菌病(Brucellosis)簡稱“布病”，是由布魯氏菌(Brucella)感染引起的人畜共患病，在我國牧區(qū)流行較為嚴(yán)重，新疆是該病的高發(fā)地區(qū)之一，目前研究發(fā)現(xiàn)布病的發(fā)生與宿主免疫功能下降有關(guān)[1-4]。 我們前期檢測布病患者血清中可溶性負性協(xié)同刺激分子Tim-3(T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein-3，Tim-3)和可溶性程序性死亡蛋白1(Programmed death-1，PD-1)，發(fā)現(xiàn)布病患者血清中sTim-3和sPD-1升高，并存在Th1/Th2細胞的失衡[5,6]。負性協(xié)同刺激分子PD-1以膜型和可溶型兩種形式存在，屬于CD28/細胞毒性T淋巴細胞抗原4(Cytotoxic T lymphocyte antigen 4，CTLA-4)免疫球蛋白超家族，主要表達于活化的T細胞表面，在抗感染免疫中可下調(diào)或抑制T細胞的活化和某些細胞因子的產(chǎn)生，增強免疫抑制功能，從而使宿主對病原體的清除能力減弱[7-9]。程序性死亡分子配體(Programmed death ligands，PD-L1，B7-H1) 主要表達于樹突狀細胞(Dendritic cell，DC)表面[10,11]。許多研究證實膜型PD-1和PD-L1在結(jié)核病、肝炎以及艾滋病等感染性疾病中發(fā)揮重要的免疫抑制作用[12-14],但其在布病中的作用機制目前未見報道。本研究采用流式細胞術(shù)檢測布病患者組、治愈組以及健康對照組外周血中T細胞表面PD-1的表達，DC細胞表面PD-L1的表達，同時采用CBA檢測TGF-β及IL-10的變化，分析負性免疫分子PD-1/PD-L1和TGF-β及IL-10在布病感染治療前后的變化特點。

1 資料與方法

1.1資料 收集2016年1月～2017年4月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科就診的60例門診患者，年齡5～80歲，中位年齡為45歲，其中男性患者49例，女性患者11例。收集34例布病患者治愈組，年齡6～78歲，中位年齡43歲，其中男性患者26例，女性患者8例。布病病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：布病的診斷參照2012年我國頒布的《布魯氏菌病診療指南(試行)》標(biāo)準(zhǔn)[15]：有流行病學(xué)史，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、多汗、骨關(guān)節(jié)痛、睪丸痛、全身乏力等癥狀，血清學(xué)檢查中虎紅平板凝集試驗陽性，試管凝集試驗(SAT)滴度為1∶100及以上或菌培養(yǎng)陽性，排除傷寒、副傷寒、風(fēng)濕熱及結(jié)核、敗血癥等疾病。同時選取60例同期體檢的健康人群作為正常對照組，年齡性別均與病例組無統(tǒng)計學(xué)差異。所有對照及患者均簽署知情同意書，實驗經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)(20150225-94)。

1.2方法

1.2.1樣本處理 將收集到的60例布病患者組、34例治愈組以及60例對照組的全血標(biāo)本均經(jīng)2 000 r/min離心10 min,吸取上清于EP管中；將剩下的血細胞吸取至15 ml離心管中，加入與血細胞等體積的PBS用巴氏管輕輕吹打混勻，再取與血細胞等體積的淋巴細胞分離液(北京索萊寶|P8610|人外周血淋巴細胞分離液)注入50 ml離心管中，將與PBS充分混勻的血細胞用巴氏管沿管壁緩慢注入50 ml離心管中，2 000 r/min離心20 min，提取單核細胞。

1.2.2TGF-β和IL-10的檢測 采用CBA技術(shù)檢測60例布病患者組、34例治愈組和60例正常對照組血清中TGF-β和IL-10(Cytometric Bead Array Human TGF-β、IL-10 Cytokine Kit，BD公司)的水平，標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋濃度依次為 5 000、2 500、1 250、625、312.5、156、80、40、20、0 pg/ml，實驗步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行操作，用流式細胞儀分析讀取數(shù)據(jù)(流式細胞儀為德國美天旎生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中TGF-β和IL-10的水平。

1.2.3PD-1和PD-L1的檢測 用提取的單核細胞分別檢測布魯氏菌患者組、治愈組、對照組T細胞表面的PD-1和DC細胞表面的PD-L1。在T細胞流式管中分別加入APC標(biāo)記的CD3、Percp 標(biāo)記的CD4、FITC 標(biāo)記的CD8、PE 標(biāo)記的PD-1單克隆抗體，分別為1 μl、2 μl、2 μl、2 μl；在DC細胞流式管中分別加入Percp 標(biāo)記的CD11c、PE 標(biāo)記的PD-L1、PE-cy7 標(biāo)記的HLA-DR 單克隆抗體各2 μl(所有流式單克隆抗體均購自BD公司，流式細胞儀為德國美天旎生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品)，室溫避光15 min 后，用PBS 洗滌2 次，PBS 重懸細胞，調(diào)整細胞密度為1×106ml-1。上機檢測至少10 000 個細胞，采用FSC/SSC 雙參數(shù)設(shè)門，分析PD-1;采用FSC/SSC 雙參數(shù)設(shè)門，再用HLA-DR/CD11c設(shè)門，選定HLA-DR+CD11c+細胞即為DC，進一步分析DC表面PD-L1 表達情況。

2 結(jié)果

2.1布病患者基本資料情況 收集的60例布病患者均有流行病學(xué)史、經(jīng)虎紅實驗陽性確診為布病的患者?；厩闆r如表1、2所示。

2.2布病患者組、治愈組和正常對照組PD-1和PD-L1的表達 本研究用流式細胞儀分析T細胞表面PD-1，結(jié)果顯示，與正常對照組相比，布病組PD-1在CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞表面的表達均明顯增高(P<0.01)，而治愈組PD-1在CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞表面的表達較治療前明顯降低(P<0.01)。見表3，圖1、2。

2.3布病患者組、治愈組和正常對照組血清中TGF-β和IL-10的水平 本研究用CBA法檢測出布病患者組、治愈組和正常對照組血清中TGF-β的水平分別為(912.77±91.05)pg/ml、(418.19±63.40)pg/ml、(406.59±67.35)pg/ml，與正常對照組相比，布病患者組TGF-β的水平明顯增高(P<0.01)，而治愈組TGF-β的水平較治療前明顯降低(P<0.01)；用CBA法檢測出布病患者組、治愈組和正常對照組血清中IL-10的水平分別為(27.18±5.88)pg/ml、(5.48±1.79)pg/ml、(5.10±1.31)pg/ml，與正常對照組相比，布病患者組IL-10的水平明顯增高(P<0.01)，而治愈組IL-10的水平較治療前明顯降低(P<0.01)，見圖3。

2.4布病患者PD-1的表達與TGF-β 和IL-10的相

表1布病患者的臨床特征

Tab.1ClinicalcharacteristicsofpatientswithBrucella

CharacteristicsCategoriesNumber(percentage,%)ofpatients(n=60)ThehistoryofepidemiologyBreedingandcontacthistoryofcattleandsheep57(95%)Eatingundercookedmeatanddairyproducts3(5%)Fever37-37.9℃2(3%)38-38.9℃24(40%)≥39℃34(57%)WeakYes60(100%)HyperhidrosisYes58(97%)No2(3%)ArthrodyniaYes56(93%)No4(7%)GenderMalepatients49(82%)Femalepatients11(18%)Age(years)≥45years34(57%)<45years26(43%)AST1∶1006(10%)1∶20012(20%)1∶40042(70%)

關(guān)性 本研究用流式細胞術(shù)檢測出PD-1在布病患者外周血單核細胞上表達增高，利用CBA法檢測出TGF-β 和IL-10在布病患者血清中水平增高。通過Pearson 法分析布病患者體內(nèi)PD-1與TGF-β 和IL-10的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)布病患者體內(nèi)PD-1的表達與TGF-β(r=0.817，P<0.01)和IL-10(r=0.835，P<0.01)的水平均呈明顯的正相關(guān)，見圖4。

圖1 布病患者組、治愈組和對照組CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞表面PD-1的表達Fig.1 Expression of PD-1 on CD3+T cells,CD4+T cells and CD8+T cells in brucellosis patients group(A),cured group(B) and control group(C)Note: A.The expression of PD-1 on CD3+T cells,CD4+T cells and CD8+T cells of brucellosis patients group;B.The expression of PD-1 on CD3+T cells,CD4+T cells and CD8+T cells of cured group;C.The expression of PD-1 on CD3+T cells,CD4+T cells and CD8+T cells of control group.

表2布病患者組、治愈組和正常對照組急性炎癥因子

Tab.2Brucellosispatientsgroup，curedgroupandnormalcontrolgroupofacuteinflammation

GroupsNumber(n)Procalcitonin(ng/ml)IL-6(pg/ml)Hs-CRP(mg/ml)WBC(×109L-1)Neutrophils(%)Brucellosis607.94±1.211)59.11±2.691)31.4±2.681)11.9±1.281)0.83±0.021)Cured340.99±0.012)2.76±0.672)1.06±0.022)5.23±1.352)0.43±0.012)Control600.28±0.122.28±0.430.57±0.014.01±0.850.46±0.02

Note：Compared with control group,brucellosis patients group had the higher acute inflammation expression，1)P<0.01；while in the patients receiving follow-up cured,the acute inflammation expression were remarkably lower than those in pretherapy，2)P<0.01.

表3布病患者組、治愈組和正常對照組PD-1和PD-L1的表達

Tab.3ExpressionofPD-1/PD-L1inbrucellosispatientsgroup,curegroupandcontrolgroup

GroupsNumber(n)PD-1(%)CD3+TcellCD4+TcellCD8+TcellPD-L1(%)DCcellBrucellosis6048.71±6.431)42.72±5.061)77.30±5.891)60.10±7.431)Cured349.97±1.022)4.12±1.032)10.10±1.042)9.83±1.262)Control606.74±1.476.67±1.038.83±1.578.18±1.04

Note：Compared with control group,brucellosis patients group had the higher PD-1/PD-L1 expression，1)P<0.01；while in the patients receiving follow-up cured,the PD-1/PD-L1 expression were remarkably lower than those in pretherapy，2)P<0.01.

圖2 布病患者組、治愈組和對照組PD-L1的表達Fig.2 Expression of PD-L1 in brucellosis patients group,cured group and control group

圖3 各組血清中TGF-β和IL-10的水平Fig.3 Comparison of serum TGF-β and IL-10 in 3 groupsNote: *.P<0.01，brucellosis group and control group； #.P<0.01,brucellosis group and cured group.

3 討論

PD-1/PD-L1在宿主體內(nèi)發(fā)揮重要的負性調(diào)控作用，主要通過向T細胞內(nèi)傳遞抑制信號，阻礙效應(yīng)T細胞活化和增殖，參與自身免疫病、腫瘤和感染性疾病的發(fā)生發(fā)展[16-18]。通常PD-1主要表達于活化的T細胞表面，而PD-L1分布較為廣泛，在T細胞、B細胞以及抗原提呈細胞等表面均有表達，DC細胞屬于專職抗原提呈細胞，能夠激活初始和記憶性CD8+T細胞、CD4+T細胞和B細胞，在免疫應(yīng)答的啟動、調(diào)控及維穩(wěn)中發(fā)揮重要作用[19]。因此，本研究通過檢測布病患者T細胞表面PD-1和DC細胞表面PD-L1，發(fā)現(xiàn)布病患者組CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞表面PD-1的表達與DC細胞表面PD-L1的表達均高于正常對照組，而治愈組PD-1與PD-L1的表達較治療前明顯降低，推測在布病患者體內(nèi)PD-1發(fā)揮著重要的負性調(diào)控作用，抑制T細胞的免疫功能，使布魯氏菌發(fā)生免疫逃逸；當(dāng)布病患者體內(nèi)T細胞表面PD-1高達到一定程度時，與DC細胞表面的PD-L1結(jié)合，PD-1/PD-L1通路形成，抑制DC細胞的抗原提呈作用，進而使T細胞的功能減弱，分泌的相關(guān)細胞因子減少，不利于布魯氏菌的清除。

圖4 PD-1與TGF-β和IL-10的相關(guān)性Fig.4 Correlation analysis of PD-1 with TGF-β and IL-10

TGF-β和IL-10是具有免疫抑制作用的主要細胞因子，大多由調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory cell，Treg)分泌，Treg細胞可分為天然產(chǎn)生的自然調(diào)節(jié)性T細胞(nTreg)和誘導(dǎo)產(chǎn)生的適應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細胞(aTreg 或 iTreg)，如Th3、Tr1，其中Tr1細胞分泌IL-10，Th3細胞分泌TGF-β[20]。研究表明，Treg細胞在布魯氏菌感染中可通過分泌細胞因子TGF-β和IL-10抑制T細胞的免疫應(yīng)答[21-23]。本研究通過檢測布病患者組、治愈組和對照組血清中TGF-β和IL-10的水平發(fā)現(xiàn)，布病組TGF-β和IL-10的水平明顯高于正常對照組，而治愈組TGF-β和IL-10的水平較治療前明顯降低，推測在布魯氏菌感染過程中Treg細胞增多，分泌的相應(yīng)細胞因子功能增強。關(guān)于PD-1/PD-L1的研究報道發(fā)現(xiàn)，TGF-β可通過激活Smad3信號上調(diào)PD-1，進而抑制T細胞的功能[24]。Diana等[25]在研究腫瘤疫苗時發(fā)現(xiàn)，IL-10增加可抑制抗原提呈細胞(Antigen presenting cell,APC)的功能，抑制T細胞活化，同時可作用于DC細胞上調(diào)PD-L1。本研究通過分析布病患者體內(nèi)PD-1與TGF-β和IL-10的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)布病患者體內(nèi)PD-1的表達與TGF-β和IL-10的水平均呈明顯的正相關(guān)，推測在布魯氏菌感染中Treg可能增高，其分泌的相關(guān)性細胞因子TGF-β和IL-10也隨之增多，TGF-β可能通過激活Smad3信號上調(diào)PD-1，IL-10可能通過作用于DC細胞上調(diào)PD-L1，有利于PD-1/PD-L1信號通路的形成，傳遞大量的負性刺激信號，在布魯氏菌感染中起著重要的負調(diào)控作用。

綜上所述，在布魯氏菌感染中，TGF-β和IL-10表達增高使PD-1/PD-L1通路被激活，負調(diào)控機體的免疫應(yīng)答，抑制T細胞的殺菌功能，使布魯氏菌不能被有效清除，導(dǎo)致機體持續(xù)感染。若能研制出下調(diào)TGF-β、IL-10、 PD-1和PD-L1的靶向藥物，布病將可能會得到很好的控制。

[1] Jia B,Zhang F,Lu Y,etal.The clinical features of 590 patients with brucellosis in Xinjiang,China with the emphasis on the treatment of complications[J].PLoS Negl Trop Dis,2017,11(5):e0005577.

[2] Zhang F,Li Z,La X,etal.Multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis of Brucellaisolates from patients in Xinjiang China[J].Int J Clin Exp Med,2015,8(9):15716-15723.

[3] 龐 盼,朱玥潔,胡金偉,等.布魯氏菌病患者血清sTim-3/HMGB1水平及外周血單個核細胞產(chǎn)生TGF-β斑點形成細胞的變化[J].中國免疫學(xué)雜志,2017,33(2):247-251.

[4] Cannella AP,Arlehamn CS,Sidney J,etal.Brucella melitensis T Cell Epitope Recognition in Humans with Brucellosis in Peru[J].Infect Immun,2014,82(1):124-131.

[5] 龐 盼,李 明,段亞楠,等.布魯氏菌病患者血清中可溶性Tim-3/Galectin-9與相關(guān)細胞因子的變化[J].免疫學(xué)雜志,2017,33(1):54-58.

[6] 龐 盼,朱玥潔,賈 斌，等.布魯菌病患者血清中可溶性程序性死亡蛋白1及配體的水平升高[J].細胞與分子免疫學(xué)雜志,2016,32(12):1675-1678.

[7] Lindauer A,Valiathan CR,Mehta K,etal.Translational pharmacokinetic/pharmacodynamic modeling of tumor growth inhibition supports dose-range selection of the anti-PD-1 antibody pembrolizumab[J].CPT Pharmacometrics Syst Pharmacol,2017,6(1):11-20.

[8] Shepard MT,Bonney EA.PD-1 regulates T cell proliferation in a tissue and subset specific manner during normal mouse pregnancy[J].Immunol Invest,2013,42(5):385-408.

[9] Xu P,Chen YJ,Chen H,etal.The expression of programmed death-1 in circulating CD4+and CD8+T cells during hepatitis B virus infection progression and its correlation with clinical baseline characteristics[J].Gut Liver,2014,8(2):186-195.

[10] Planès R,BenMohamed L,Leghmari K,etal.HIV-1 Tat protein induces PD-L1 (B7-H1) expression on dendritic cells through tumor necrosis factor Alpha-and toll-like receptor 4-mediated mechanisms[J].J Virol,2014,88(12):6672-6689.

[11] Moret FM,van der Wurff-Jacobs KM,Bijlsma WJ,etal.Synovial T cell hyporesponsiveness to myeloid dendritic cells is reversed by preventing PD-1/PD-L1 interactions[J].Arthritis Res Ther,2014,16(6):497.

[12] Shen L,Gao Y,LiuY,etal.PD-1/PD-L pathway inhibits M.tb-specific CD4+T-cell functions and phagocytosis of macrophages in active tuberculosis[J].Sci Rep,2016,6:38362.

[13] Fontugne J,Augustin J,Pujals A,etal.PD-L1 expression in perihilar and intrahepatic cholangiocarcinoma[J].Oncotarget,2017,8(15):24644-24651.

[14] Fromentin R,Bakeman W,Lawani MB,etal.CD4+T Cells Expressing PD-1,TIGIT and LAG-3 Contribute to HIV Persistence during ART[J].PLoS Pathog,2016,12(7):e1005761.

[15] 中華人民共和國衛(wèi)生部.布魯氏菌病診療指南(試行)[J].傳染病信息，2012，25(6):323-359.

[16] Shi H,Ye J,Teng J,etal.Elevated serum autoantibodies against co-inhibitory PD-1 facilitate T cell proliferation and correlate with disease activity in new-onset systemic lupus erythematosus patients[J].Arthritis Res Ther,2017,19:52.

[17] Lázár-Molnár E,Scandiuzzi L,Basu I,etal.Structure-guided development of a high-affinity human programmed cell death-1:implications for tumor immunotherapy[J].EBio Med,2017,17:30-44.

[18] Tang ZS,Hao YH,Zhang EJ,etal.CD28 family of receptors on T cells in chronic HBV infection:Expression characteristics,clinical significance and correlations with PD-1 blockade[J].Mol Med Rep,2016,14(2):1107-1116.

[19] Elster JD,Krishnadas DK,Lucas KG.Dendritic cell vaccines:A review of recent developments and their potential pediatric application[J].Hum Vaccin Immunother,2016,12(9):2232-2239.

[20] Hotta K,Aoyama A,Oura T,etal.Induced regulatory T cells in allograft tolerance via transient mixed chimerism[J].JCI Insight,2016,1(10):e86419.

[21] Nymo IH,Seppola M,Al Dahouk S,etal.Experimental challenge of atlantic cod (Gadus morhua) with a brucella pinnipedialis strain from hooded seal (cystophora cristata)[J].PLoS One,2016,11(7):e0159272.

[22] Corsetti PP,de Almeida LA,Carvalho NB,etal.Lack of endogenous il-10 enhances production of proinflammatory cytokines and leads to brucella abortus clearance in mice[J].PLoS One,2013,8(9):e74729.

[23] Ganji A,Mosayebi G,Ghaznavi-Rad E,etal.Evaluation of regulatory T cells in patients with acute and chronic brucellosis[J].Rep Biochem Mol Biol,2017,5(2):91-96.

[24] Park BV, Freeman ZT, Ghasemzadeh A,etal.TGF-β1-mediated Smad3 enhances PD-1 expression on antigen-specific T cells in cancer[J].Cancer Discov,2016,6(12):1366-1381.

[25] Llopiz D, Ruiz M,Infante S,etal.IL-10 expression defines an immunosuppressive dendritic cell population induced by antitumor therapeutic vaccination[J].Oncotarget,2017,8(2):2659-2671.

ExpressionofPD-1andPD-L1inpatientsinfectedwithBrucella

PANGPan,ZHANGFeng-Bo,ZHUYue-Jie,JIABin,ZHANGYue-Xin,ZHANGChun-Tao.REXITI·Fulati,DINGJian-Bing.

CollegeofPreclinicalMedicine,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China

Objective:To investigate the roles of PD-1 and PD-L1,as well as related cytokines TGF-β and IL-10 in patients infected with Brucella.MethodsThe expression of PD-1/PD-L1 in peripheral blood mononuclear cell CD3+T cells,CD4+T cells,CD8+T cells,and dendrites cells was detected by flow cytometry in 60 patients infected with Brucella and 34 patients receiving follow-up cured and 60 healthy controls,the serum levels of TGF-β and IL-10 were detected by CBA.The correlations of PD-1 with TGF-β and IL-10 levels in patients infected with Brucella were analyzed by pearson correlation test.ResultsCompared with control,brucellosis patients had the higher PD-1/PD-L1,TGF-β and IL-10 expression (P<0.05),while in the patients receiving follow-up cured,the PD-1/PD-L1,TGF-β and IL-10 were remarkably lower than those in pretherapy (P<0.01),the change of PD-1 was positively correlated with the levels of TGF-β (r=0.817,P<0.01) and IL-10 (r=0.835,P<0.01).ConclusionHigh expression of PD-1/PD-L1 and TGF-β and IL-10 in patients with Brucella may be involved in the negative regulation of Brucella on host immune response.

PD-1;PD-L1;Brucellosis;Cytokine

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.12.017

R392.11R378.5

A

1000-484X(2017)12-1838-05

①本文為國家自然科學(xué)基金項目(81560322)、新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金項目(2015211C100)和新疆醫(yī)科大學(xué)科學(xué)創(chuàng)新基金(XYDCX201507)。

②新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科,烏魯木齊 830011。

③新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖助孕科,烏魯木齊 830011。

④新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科，烏魯木齊 830011。

龐 盼(1990年-),女,在讀碩士,主要從事布魯氏菌感染方面的研究,E-mail: 2449579487@qq.com。

及指導(dǎo)教師：丁劍冰(1960 年-),女,博士,教授,免疫教研室主任,博士生導(dǎo)師,主要從事感染免疫和生殖免疫方面的研究, E-mail: djbing002@sina.com。

[收稿2017-06-21 修回2017-08-08]

(編輯 倪 鵬)