葉火林，高淑平，畢向軍，孫成暉，劉漢起，譚艷玲，陳桂茹

(陽春市人民醫(yī)檢驗(yàn)科1、腫瘤科2，廣東 陽春 529600)

血清CEA、miR-1、let-7聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

葉火林1，高淑平1，畢向軍2，孫成暉2，劉漢起1，譚艷玲1，陳桂茹1

(陽春市人民醫(yī)檢驗(yàn)科1、腫瘤科2，廣東 陽春 529600)

目的探討血清癌胚抗原(CEA)、血清miR-1、let-7聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法選取陽春市人民醫(yī)檢2015年8月至2016年12月期間收治的62例肺癌患者為研究對(duì)象，選擇同期健康體檢者50例納入對(duì)照組，檢測(cè)血清CEA水平，同時(shí)采用定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)法檢測(cè)血清miR-1、let-7水平。結(jié)果肺癌組血清CEA水平為(25.18±9.85)ng/mL，明顯高于對(duì)照組的(3.86±1.54)ng/mL，血清miR-1、let-7相對(duì)表達(dá)量分別為(0.286±0.112)、(0.368±0.158)，明顯低于對(duì)照組的(0.975±0.398)、(1.296±0.547)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論血清CEA聯(lián)合miR-1、let-7的檢測(cè)有利于肺癌的早期診斷。

癌胚抗原；肺癌；微小核糖核酸；腫瘤標(biāo)志物

肺癌是嚴(yán)重危害我國居民健康和生命的最常見惡性腫瘤，其病死率遠(yuǎn)高于其他惡性腫瘤，并且其發(fā)病率和死亡率近年來在我國也呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)[1]。目前臨床已廣泛開展血清癌胚抗原(CEA)等腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)以期望對(duì)肺癌進(jìn)行早期發(fā)現(xiàn)、診療，但是單一血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)最大的不足在于靈敏度及特異性不強(qiáng)，特別是在腫瘤的早期檢出率不高[2]。微小RNA(miRNA)是一類內(nèi)源性、非編碼的單鏈小分子RNA，近年來研究證明其在惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用[3]。本研究旨在探討血清CEA聯(lián)合血清miR-1、let-7檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值，以期望為臨床上肺癌的早期診斷提供更充分的依據(jù)，為肺癌的治療研究提供新的診療策略。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取陽春市人民醫(yī)院2015年8月至2016年12月期間收治的62例肺癌患者為研究對(duì)象，其中男性36例，女性26例，年齡36～77歲，平均(62.8±11.3)歲；均經(jīng)術(shù)后病理確診為肺癌，鱗癌30例、腺癌16例、腺鱗癌10例、小細(xì)胞肺癌6例。排除合并急慢性感染、其他惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、肝腎功能不全以及合并遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者。選擇同期健康體檢者50例納入對(duì)照組，體檢結(jié)果均正常且無腫瘤病史，其中男性30例，女性20例，平均年齡(61.0±12.8)歲。兩組受檢者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法兩組受檢者均于入組次日抽取空腹靜脈血3 mL，在24 h內(nèi)以3 000 r/min離心，10 min后分離上清液并保存于-80℃條件下待測(cè)。血清CEA在Luminex200多功能流式點(diǎn)陣儀上采用流式熒光發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，血清miR-1、let-7采用定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)法進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，兩樣本均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

肺癌組血清CEA水平明顯高于對(duì)照組，血清miR-1、let-7相對(duì)表達(dá)量明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組受檢者血清CEA、miR-1、let-7水平的比較(±s)

表1 兩組受檢者血清CEA、miR-1、let-7水平的比較(±s)

組別 例數(shù)CEA(ng/mL)miR-1let-7肺癌組對(duì)照組t值P值64 50 25.18±9.85 3.86±1.54 15.147＜0.05 0.286±0.112 0.975±0.398 13.219＜0.05 0.368±0.158 1.296±0.547 12.914＜0.05

3 討論

肺癌的發(fā)病率和死亡率在我國一直居于所有惡性腫瘤的首位，調(diào)查顯示我國肺癌發(fā)病率、死亡率占所有惡性腫瘤的19.59%、24.89%[4]。肺癌早期缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，多數(shù)患者經(jīng)影像學(xué)和病理診斷時(shí)已經(jīng)發(fā)生了擴(kuò)散或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。雖然很多學(xué)者針對(duì)肺癌臨床和機(jī)制的研究已經(jīng)進(jìn)行了深入研究，但肺癌患者的預(yù)后仍然不盡人意，肺癌的五年生存率僅為11%[5]。因此，尋找可靠的肺癌腫瘤標(biāo)志物對(duì)其進(jìn)行早期診斷、早期治療對(duì)改善患者的預(yù)后具有重要的臨床意義。CEA是傳統(tǒng)的肺癌血清學(xué)標(biāo)志物，其在胚胎期表達(dá)，但是不表達(dá)于正常成年人。研究表明血清CEA升高程度與癌細(xì)胞數(shù)量、腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移均有相關(guān)性，是目前肺癌早期診斷中應(yīng)用最廣泛的血清腫瘤標(biāo)志物[6]。單一的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)可能會(huì)造成部分患者漏診，聯(lián)合檢測(cè)則可明顯提高早期腫瘤的檢出率[7]。

目前在腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制的研究中，蛋白質(zhì)編碼基因已經(jīng)成為各研究的重點(diǎn)。miRNA是一類大小約22 nt的單鏈小分子RNA，可參與到多種生物學(xué)過程包括肺癌的發(fā)生、發(fā)展[8]。miRNA在腫瘤發(fā)生時(shí)存在突變、表達(dá)上調(diào)或降低等現(xiàn)象。最近的研究顯示，miRNA表達(dá)差異有助于惡性腫瘤早期診斷和療效預(yù)測(cè)，是一種新型的腫瘤標(biāo)志物，結(jié)合傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物與相關(guān)miRNA的檢測(cè)有助于發(fā)現(xiàn)早期腫瘤，提高腫瘤診斷的正確性和特異性。研究發(fā)現(xiàn)，miR-21、miR-486、miR-375和miR-200b在痰液標(biāo)本及手術(shù)切除肺癌組織中的共表達(dá)作為預(yù)測(cè)肺腺癌的生物標(biāo)記物，敏感度與特異度分別達(dá)到了80.6%和91.7%[9]。miR-1、let-7均被眾多研究證實(shí)可在腫瘤中起到“抑癌基因”的作用。劉旭斌等[10]研究指出肝細(xì)胞癌患者血清let-7表達(dá)水平較正常對(duì)照組降低；2011年日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在肺癌患者樣本中l(wèi)et-7表達(dá)異常，這也為其診斷和治療提供了新基礎(chǔ)[11]；Mohd等[12]研究發(fā)現(xiàn)miR-1是治療肺癌的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。本研究發(fā)現(xiàn)肺癌組血清CEA水平明顯高于對(duì)照組，血清miR-1、let-7相對(duì)表達(dá)量明顯低于對(duì)照組，說明血清CEA是診斷肺癌的可靠血清標(biāo)志物，進(jìn)一步聯(lián)合血清miR-1、let-7的檢測(cè)有利于肺癌的早期診斷。

綜上所述，血清miR-1、let-7在肺癌患者明顯降低，血清CEA聯(lián)合miR-1、let-7的檢測(cè)有利于肺癌的早期診斷。

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葉火林。E-mail：13829868868@139.com

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