周迎春,姜太玲,李月仙,劉 倩,宋記明,文定良,劉光華
(1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱帶經(jīng)濟作物研究所,云南保山 678000;2.保山全心農(nóng)業(yè)科技有限公司,云南保山 678000)
蛋白質(zhì)水解物(Protein hydrolysate) 的生產(chǎn)方式分為化學(xué)降解法和酶降解法[1]?;瘜W(xué)法是利用酸堿水解蛋白質(zhì),至今已有100多年的歷史,反應(yīng)條件劇烈,酸催化蛋白質(zhì)水解時可破壞色氨酸,堿催化蛋白質(zhì)水解則使胱氨酸、半胱氨酸、精氨酸等受到破壞,還能引起氨基酸的外消旋化[2]。酶法水解與化學(xué)法相比,具有效率高、條件溫和等優(yōu)點,水解過程中氨基酸的結(jié)構(gòu)和構(gòu)型保持不變,僅使肽鍵斷裂,也不會產(chǎn)生有毒有害的物質(zhì)[3-4]。蛋白質(zhì)酶水解前后的功能特性與生物活性顯著不同,水解產(chǎn)物主要是氨基酸和多肽,其中含量最多的是多肽,多肽不但具有與蛋白質(zhì)相類似的功能特性,還有蛋白質(zhì)無可比擬的生物活性。
隨著肽鍵的斷裂,蛋白質(zhì)的水解物主要發(fā)生3種變化:①帶電基團增加親水性和凈電荷增加;②分子結(jié)構(gòu)變化導(dǎo)致蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水基團暴露;③抗原性降低。這些變化在微觀上導(dǎo)致蛋白質(zhì)包括分子大小、表面活性和疏水性、與碳水化合物相互作用等物化性質(zhì)發(fā)生變化,在宏觀上能引起功能特性(如溶解性、起泡性、乳化性等) 的改變[5]。
功能特性是指蛋白質(zhì)、肽在配置、加工、貯藏和制取過程中的理化性質(zhì),包括溶解性、乳化性、起泡性等,其功能特性的優(yōu)劣取決于蛋白質(zhì)、肽本身的化學(xué)組成、構(gòu)象、環(huán)境因素(如濃度、pH值、離子強度、脂類、碳水化合物、表面活性劑、風(fēng)味物質(zhì)),以及加工處理的條件(如加熱、pH值調(diào)整、離子強度)[6-7]。
無論水解度有多大,蛋白質(zhì)水解物溶解度在等電點附近有顯著增加,這是因為蛋白質(zhì)在水解酶的作用下,打破了蛋白質(zhì)中特定的肽鍵,蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生的肽具有更小的分子,相比天然的蛋白質(zhì)少了二級結(jié)構(gòu),親水性氨基和羧基增加的緣故[4,8]。
黃建韶等人[9]利用木瓜蛋白酶對大豆分離蛋白(SPI)進行酶法改性試驗。結(jié)果顯示,酶水解能顯著提高SPI的溶解性。當(dāng)酶解條件為pH值7.0,溫度55℃,底物質(zhì)量分?jǐn)?shù)3%,酶濃度12 000 U/g,酶解時間3 h時,SPI的水解度超過25%,即使在SPI的等電點處,其酶解液仍然具有較好的溶解性??紫檎涞热薣10]用Alcalase酶解面筋蛋白,酶解物的溶解性在pH值2~11時有較高的溶解性(>60%),與原始蛋白質(zhì)相比,蛋白質(zhì)酶解物的溶解性顯著提高。Mune M M A等人[11]用胃蛋白酶水解豇豆蛋白濃縮物,蛋白質(zhì)的溶解性在等電點和中性pH值處有所增加。Zhao Q等人[12]利用復(fù)合蛋白酶水解米渣蛋白,在很寬的pH值范圍內(nèi),溶解性都超過80%。
蛋白質(zhì)水解物的乳化性受水解度的影響很大,可通過控制水解度而使乳化性提高。有研究表明,輕度酶水解時,蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水基團暴露,有利于膠束形成,并使大量肽分子進入油水界面,降低了界面張力,使乳化性提高;進一步水解時,親水性明顯增強,疏水性下降,乳化性降低[13]。
據(jù)報道,大豆分離蛋白經(jīng)胰蛋白酶水解后乳化性提高較為明顯,最佳可達(dá)74.69%,通過酸與胃蛋白酶的共同處理,乳化性也得到顯著提高[14-15]。胰蛋白酶水解大麻分離蛋白,則導(dǎo)致了水解物乳化活性指數(shù)的降低[16]。侯瑤[17]利用中性蛋白酶和胰蛋白酶限制性水解大豆?jié)饪s蛋白,其乳化活性和乳化穩(wěn)定性均有顯著提高。Demirhan E等人[18]采用堿性蛋白酶酶解芝麻餅粕蛋白,隨著水解度的增加,水解物的乳化穩(wěn)定性降低,乳化活性則增加。
發(fā)泡力(FP) 和泡沫穩(wěn)定性(FS) 是評價發(fā)泡性質(zhì)的2個常用指標(biāo),發(fā)泡能力良好的多肽,其泡沫穩(wěn)定性較差;而發(fā)泡能力較差的多肽,其泡沫的穩(wěn)定性卻較好。
有研究表明,蛋白質(zhì)經(jīng)酶解后,許多疏水基被暴露出來,使酶解溶液疏水性增加,表面張力減弱,發(fā)泡力會增強[13],而水解度的高低也影響水解物的起泡性。大豆分離蛋白經(jīng)胰蛋白酶水解后,起泡性在水解度6.38%時最高,達(dá)到350 mL;經(jīng)木瓜蛋白酶水解后,起泡性和泡沫穩(wěn)定性均在水解度5.23%時最好,分別為475 mL和42.55%;經(jīng)米曲蛋白酶水解后,起泡性在水解度8%時達(dá)到最高點,泡沫體積為495mL[14]。芝麻餅粕經(jīng)堿性蛋白酶水解,隨著水解度的增加,發(fā)泡穩(wěn)定性降低,發(fā)泡活性增加[18]。
蛋白質(zhì)的酶水解產(chǎn)物中含量大量具有生理活性的多肽,包括抗氧化活性肽、抑制血管收縮素轉(zhuǎn)化酶(ACE)活性的多肽類(即降血壓多肽類)、抗菌活性肽、免疫調(diào)節(jié)肽、促進礦物質(zhì)吸收的多肽等。
把具有抑制生物大分子過氧化或清除體內(nèi)自由基功效的生物活性肽稱為抗氧化活性肽(簡稱抗氧化肽)[19]。無論是植物蛋白還是動物蛋白,有些蛋白經(jīng)酶水解后的產(chǎn)物都具有抗氧化活性。
采用堿性蛋白酶水解蕎麥球蛋白,酶解液的分子量在1 000 D以下時具有較強的抗氧化能力,清除超氧陰離子自由基、羥自由基和DPPH自由基的IC50值分別為0.75,0.897,0.38 mg/mL,用同樣的蛋白酶酶解蕎麥清蛋白,酶解產(chǎn)物對超氧陰離子自由基清除率達(dá)37.06%[20-21];蛋清蛋白用胃蛋白酶水解,其水解物表現(xiàn)出抗氧化活性,當(dāng)水解度為16.93%時,對DPPH自由基清除活性為96.07%±3.84%,羥自由基清除活性為36.82%±1.46%,超氧陰離子清除活性為67.72%±2.51%[22-23];卵蛋黃蛋白用消化酶水解,其水解物也具有抗氧化活性[24]。許多學(xué)者還用蛋白酶水解植物物料(如大米、菜籽、麥胚、玉米、甘薯、棕櫚仁餅、鷹嘴豆、黃菜豆、豌豆種子、核桃仁、脫脂后的核桃渣等)中的蛋白質(zhì),其水解產(chǎn)物表現(xiàn)出一定的抗氧化活性[25-35];用蛋白酶水解動物物料(如乳清、鱈魚皮、帶魚皮、草魚、羅非魚、竹莢魚內(nèi)臟、蝦虎魚肌肉、飛行魷魚肌肉等)中的蛋白質(zhì),其水解產(chǎn)物也都具有抗氧化活性[36-43]。
天然蛋白水解得到的肽具有顯著的降血壓作用,因而被稱為降血壓肽,降血壓肽主要是通過競爭性抑制人體中的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE) 的活性而達(dá)到降低血壓的作用。
趙元暉等人[44]先后用菠蘿蛋白酶和Alcalase蛋白酶水解海地瓜的體壁蛋白,水解產(chǎn)物中<2 kDa的組分具有很強的ACE抑制活性,其IC50值為0.615mg/mL。姚興存等人[45]用木瓜蛋白酶酶解條斑紫菜,抑制降血壓的活性可達(dá)30%以上,ACE抑制肽的IC50值為4.48mg/mL;用堿性蛋白酶對雞蛋蛋清進行水解,其水解產(chǎn)物對ACE的抑制作用達(dá)78.9%,用木瓜蛋白酶對其進行水解,產(chǎn)物可以抑制ACE的活性[23,46]。蜥魚肌肉蛋白經(jīng)中性蛋白酶水解,其水解物中含有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽,也能起到降血壓的作用[47]。另外,用蛋白酶水解酪蛋白、杏仁、利馬豆、貽貝、黃菜豆、核桃中的蛋白質(zhì),其水解產(chǎn)物都在一定程度上能抑制 ACE 的活性,達(dá)到降血壓的目的[32,35,48-52]。
抗菌肽(Antibacterialpeptide)又叫抗生素肽(Antibiotics peptide)、抗微生物肽 (Antimicrobial peptide),是由多種生物細(xì)胞特定的基因編碼經(jīng)外界條件誘導(dǎo)而產(chǎn)生的一類具有廣譜抗細(xì)菌、真菌、病毒、寄生蟲、抑殺腫瘤細(xì)胞等活性作用的多肽。
酪蛋白經(jīng)過用胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶水解,其水解產(chǎn)物對大腸桿菌都有較強的抑菌活性[53-56];胃蛋白酶水解乳鐵蛋白得到的多肽對大腸桿菌具有較強的抑菌活性,抑菌率達(dá)到98.8%[57];革胡子鯰魚骨蛋白經(jīng)胃蛋白酶水解,獲得的水解物對大腸桿菌、藤黃微球菌及枯草芽孢桿菌的抑菌率分別為71.40%,56.88%和64.54%[58];麻瘋樹粕蛋白通過蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、中性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、酸性蛋白酶)水解,其產(chǎn)物也具有抗菌活性[59]。
蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白酶水解后,能產(chǎn)生具有免疫活性的多肽,從乳酪蛋白酶解產(chǎn)物中已分離鑒定出許多免疫調(diào)節(jié)肽,如αs1-酪蛋白源免疫調(diào)節(jié)肽、β-酪蛋白源免疫調(diào)節(jié)肽、κ-酪蛋白源免疫調(diào)節(jié)肽[60]。彭汶鐸等人[61]研究表明,木瓜蛋白酶水解鮑魚所得的酶解提取物可改善氫化可的松型免疫低下小鼠的體重、胸腺和脾質(zhì)量,能提高胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力;以羊骨粉為底物,用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶制備復(fù)合酶解物,適當(dāng)劑量的羊骨酶解物能提高小鼠的非特異性免疫、體液免疫和細(xì)胞免疫能力[62]。
以牛乳酪蛋白為原料,選用適當(dāng)?shù)牡鞍酌笇⑵渌?,從中分離純化而得到的一類富含磷酸絲氨酸的生物活性肽,被稱之為酪蛋白磷酸肽(CPPs)。CPPs可作為無機離子載體促進腸膜對鐵、鋅、硒的吸收和利用,在動物小腸內(nèi)能與鈣結(jié)合,阻止磷酸鈣沉淀的形成,使腸內(nèi)溶解鈣的量大大增加,從而促進鈣的吸收和利用,CPPs是目前報道的唯一促進鈣吸收的活性肽[63-65]。
蛋白質(zhì)作為一切生命物質(zhì)的基礎(chǔ),其酶水解物在實際生產(chǎn)中也發(fā)揮著重要作用。它的功能特性可用于食品行業(yè)中,酶水解物的溶解性、黏度的大小可以決定飲料的感官品質(zhì);水解物的乳化性質(zhì)、發(fā)泡性質(zhì)等在面團焙烤產(chǎn)品(面包、蛋糕等)中起到了決定性的作用;酶水解物的功能特性在乳制品(干酪、冰激凌)、肉制品、糖果制品等食品的生產(chǎn)中也發(fā)揮了極其重要的作用。另外,蛋白質(zhì)酶水解物所具有的生物活性可用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。利用蛋白質(zhì)水解物的抗氧化活性及抑菌作用,可開發(fā)出天然抗氧化劑和防腐劑,應(yīng)用于食品行業(yè)中能起到防腐保鮮的作用;水解產(chǎn)物中含有的降血壓多肽類、抗菌活性肽、免疫調(diào)節(jié)肽等可以應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生中,制成降血壓藥、抗生素的替代品等。
蛋白質(zhì)酶水解物的功能特性和生物活性,在食品和醫(yī)藥行業(yè)將會有很廣闊的應(yīng)用前景。我國對于蛋白質(zhì)酶水解物的研究與開發(fā)相對于國外研究還存在較大的差距,在今后的研究中,蛋白質(zhì)酶水解物仍將是一個值得關(guān)注、研究的問題,若能將其開發(fā)出更多的產(chǎn)品,并應(yīng)用到日常生產(chǎn)和生活中,將會帶來更好的社會及經(jīng)濟效益。
[1]曹龍奎,刁靜靜.玉米蛋白水解物的功能特性及其活性肽分離純化的研究進展 [J].農(nóng)產(chǎn)食品科技,2008,2(3):7-9.
[2]闞建全.食品化學(xué) [M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2010:57.
[3]謝慶武,鄭海艷,李德榮.固定化蛋白酶法制備低苦味蛋白質(zhì)水解物的研究 [J].食品與藥品,2010,12(9):305-307.
[4]鈕琰星,周瑞寶,黃鳳洪.蛋白質(zhì)酶水解物功能特性及其在食品工業(yè)應(yīng)用 [J].糧食與油脂,2003(5):16-18.
[5]Mahmoud M I.Physicochemical and functional properties of protein hydrolysates in nutritional products[J].Food Technology,1994,48 (10):89-95.
[6]鞠興榮,何海艷,何榮,等.固態(tài)發(fā)酵菜籽肽功能特性研究 [J].食品科學(xué),2010,31(21):45-49.
[7]闞建全.食品化學(xué) [M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2010:64.
[8]Yalcin E,Cllik S.Solubility properties of barley flour,protein isolates and hydrolysates[J].Food Chemistry,2007(4):1 641-1 647.
[9]黃建韶,張洪,黃鑒,等.改善大豆分離蛋白溶解性的試驗 [J].食品工業(yè),2002(5):35-37.
[10]孔祥珍,周惠明,錢海峰.小麥面筋蛋白酶解物的制備及其功能性研究 [J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,39(3):593-598.
[11]Mune M M A,Minka SR,Mbome IL.Functional properties of acetylated and succinylated cowpea protein concentrate and effectof enzymatic hydrolysis on solubility[J].International Journal of Food Sciences and Nutrition,2011,62 (4):310-317.
[12]Zhao Q,Xiong H,Selomulya C,et al.Enzymatic hydrolysis of rice dreg protein:Effects of enzyme type on the functional properties and antioxidant activities of recovered proteins[J].Food Chemistry,2012 (3):1 360-1 367.
[13]高安全,姬學(xué)亮,張二琴.大豆蛋白酶法改性研究 [J].開封大學(xué)學(xué)報,2004,18(3):92-94.
[14]徐紅華,劉欣.不同酶類改性對大豆分離蛋白功能性質(zhì)的影響 [J].食品科技,2007,32(3):35-38.
[15]Yuan B,Ren J Y,Zhao M M,et al.Effects of limited enzymatic hydrolysis with pepsin and high-pressure homogenization on the functional properties of soybean protein isolate[J].LWT-Food Science&Technology,2012 (2):453-459.
[16]Yin SW,Tang C H,Cao J S,et al.Effects of limited enzymatic hydrolysis with trypsin on the functional proper-ties of hemp(Cannabis sativa L).protein isolate[J].Food Chemistry,2008 (3):1 004-1 013.
[17]侯瑤.大豆?jié)饪s蛋白和分離蛋白限制酶解及功能性變化 [D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2008.
[18]Demirhan E,?zbek B.Influence of enzymatic hydrolysis on the functional properties of sesame cake protein[J].Chemical Engineering Communications,2013 (5):655-666.
[19]張君慧,張暉,王興國,等.抗氧化活性肽的研究進展 [J].中國糧油學(xué)報,2008,23(6):227-233.
[20]侯文娟,張美莉,付媛,等.酶法水解蕎麥球蛋白制備抗氧化活性肽的研究 [J].食品科學(xué),2009,30(23):274-280.
[21]付媛,張美莉,侯文娟.酶法水解蕎麥清蛋白制備抗氧化活性肽的研究 [J].食品科學(xué),2009,30(15):142-147.
[22]Sun SG,Ma M H,Lin Q L.Systematic investigation of antioxidant activity of egg white protein hydrolysates obtained by pepsin[J].Advance Journal of Food Science and Technology,2013,5 (1):57-62.
[23]Chen C,Chi Y J.Antioxidant,ace inhibitory activities and functional properties of egg white protein hydrolysate[J].Journal of Food Biochemistry,2012,36 (4):383-396.
[24]Zambrowicz A,Pokora M,Eckert E,etal.Antioxidantand antimicrobial activity of lecithin free egg yolk protein preparation hydrolysates obtained with digestive enzymes[J].Functional Foods in Health and Disease,2012 (12):487-500.
[25]曹輝,馬海樂,曲文娟,等.大米蛋白的木瓜酶酶解及其水解物的抗氧化活性 [J].中國糧油學(xué)報,2009,24(7):10-13.
[26]鞠興榮,胡蓉,王丹丹,等.不同酶水解菜籽蛋白的水解物的抗氧化活性研究 [J].中國糧油學(xué)報,2011,26(4):47-51.
[27]王琳,李芳,王文杰,等.雙酶酶解杏仁蛋白制備杏仁肽工藝研究 [J].農(nóng)產(chǎn)品加工,2015(18):24-26.
[28]Zhou K,Sun S,Canning.Production and functional characterisation of antioxidative hydrolysates from corn protein via enzymatic hydrolysis and ultrafiltration[J].Food Chemistry,2012 (3):1 192-1 197.
[29]Zhang M,Mu T H,Sun M J.Sweet potato protein hydrolysates:antioxidant activity and protective effects on oxidative DNA damage[J].International Journal of Food Science and Technology,2012,47 (11):2 304-2 310.
[30]Zarei M,Ebrahimpour A,Hamid A A,et al.Production of defatted palm kernel cake protein hydrolysate as a valuable source of natural antioxidants[J].International Journal ofMolecular Sciences,2012,13 (7):8 097-8 111.
[31]YustM D,Millán-Linares M D,Alcaide-Hidalgo JM,et al.Hypocholesterolaemic and antioxidantactivities of chickpea(Cicer arietinum L).protein hydrolysates[J].Journal of the Science of Food and Agriculture,2012 (9):1 994-2 001.
[32]Valdez-Ortiz A,F(xiàn)uentes-Gutiérrez C I,Germán-Báez L J,et al.Protein hydrolysates obtained from Azufrado(sulphur yellow) beans(Phaseolus vulgaris):Nutritional,ACE-inhibitory and antioxidative characterization[J].LWT-Food Science&Technology,2012,46 (1):91-96.
[33]Ndiaye F,Vuong T,Duarte J,et al.Anti-oxidant,antiinflammatory and immunomodulating properties of an enzymatic protein hydrolysate from yellow field pea seeds[J].European Journal of Nutrition,2012,51(1):29-37.
[34]Chen N,Yang H,Sun Y,et al.Purification and identification of antioxidant peptides from walnut(Juglans regia L).protein hydrolysates[J].Peptides,2012,38(2):244-349.
[35]徐慧嬌,郝艷賓,齊建勛,等.核桃蛋白酶解物體外抗氧化及降血壓活性研究 [J].農(nóng)產(chǎn)品加工(創(chuàng)新版),2009 (10):38-42.
[36]Lin S,TianW,LiH,etal.Improving antioxidantactivities of whey protein hydrolysates obtained by thermal preheat treatment of pepsin,trypsin,alcalase and flavourzyme [J].International Journalof Food Science&Technology,2012,47 (10):2 045-2 051.
[37]劉淇,李慧,趙玲,等.鱈魚皮膠原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性 [J].食品工業(yè)科技,2012,33(1):135-137,140.
[38]Nazeer R A,Deeptha R.Antioxidantactivity and amino acid profiling of protein hydrolysates from the skin of sphyraena barracuda and lepturacanthussavala[J].International Journalof Food Properties,2013,16 (3):500-511.
[39]Li X,Luo Y,You J,et al.In vitro antioxidant activity of papain-treated grass carp (Ctenopharyngodon idellus) protein hydrolysate and the preventive effect on fish mince system[J].International Journal of Food Science&Technology,2012,47 (5):961-967.
[40]Fan J,He J,Zhuang Y,et al.Purification and identification of antioxidant peptides from enzymatic hydrolysates of tilapia(Oreochromis niloticu)s frame protein[J].Molecules,2012,17 (11):12 836-12 850.
[41]Satya S K N,Abdul N R,Rengarajan J.In vivo antioxidant activity of peptide purified from viscera protein hydrolysate of horsemackerel(Magalaspis cordyla) [J].International Journal of Food Science&Technology,2012,47 (7):1 558-1 562.
[42]Nasri R,Bougatef A,Khaled H B,et al.Antioxidant and free radical-scavenging activities of goby(Zosterisessor ophiocephalus)muscle protein hydrolysates obtained by enzymatic treatment[J].Food Biotechnology,2012,26 (3):266-279.
[43]Fang X,Xie N,Chen X,et al.Optimization of antioxidanthydrolysate production from flying squid muscle protein using response surface methodology[J].Food and Bioproducts Processing,2012 (4):676-682.
[44]趙元暉,李八方,曾名湧,等.一種低值海參蛋白酶解物降血壓活性的研究 [J].漁業(yè)現(xiàn)代化,2009,36(1):56-59.
[45]姚興存,蔣棟磊,盤賽昆,等.條斑紫菜蛋白酶解物降血壓活性 [J].食品與發(fā)酵工業(yè),2011,37(2):62-64,69.
[46]廖丹葵,吳華萍,孫秀華,等.雞蛋蛋清蛋白質(zhì)酶法制備降血壓肽的研究 [G]//第三屆全國化學(xué)工程與生物化工年會論文摘要集(下).南寧:中國化工學(xué)會,2006.
[47]Wu S,Sun J,Tong Z,et al.Optimization of hydrolysis conditions for the production of angiotensin-Iconverting enzyme-inhibitory peptides and isolation of a novel peptide from lizard fish(Saurida elongata) muscle protein hydrolysate[J].Mar Drugs,2012,10 (5):1 066-1 080.
[48]孫輝,趙新淮.酪蛋白類蛋白物的溶劑分級和酶水解對ACE抑制活性的影響 [J].中國乳品工業(yè),2011,39(12):4-7,11.
[49]楊銘,胡志和.酪蛋白雙酶水解物ACE抑制肽的分離純化 [J].食品科學(xué),2012,33(9):50-53.
[50]劉寧,仇農(nóng)學(xué).堿性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制備ACE抑制肽 [J].農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊),2009(3):149-152.
[51]Luis C G,Mario D M,Alma M A,et al.Lima bean(Phaseolus lunatus) protein hydrolysates with ACE-I inhibitory activity[J].Food and Nutrition Sciences,2012,3 (4):511-521.
[52]毋瑾超,汪依凡,方長富.貽貝蛋白酶解降血壓肽的降壓活性劑相對分子質(zhì)量與氨基酸組成 [J].水產(chǎn)學(xué)報,2007,31 (2):165-170.
[53]袁永俊,胡婷,朱家驊.酪蛋白抗菌肽的酶法制備 [J].食品與機械,2010,26(2):1-4.
[54]杜軍,袁永俊,侯恩娟.酪蛋白酶解物中抗菌肽的分離及其分子量的測定 [J].食品工業(yè)科技,2012,33(10):177-179.
[55]付莉,陳二兵.響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶制備酪蛋白抗菌肽的研究 [J].中國農(nóng)學(xué)通報,2012,28(30):296-300.
[56]付莉,王冰.中性蛋白酶制備酪蛋白抗菌肽的研究 [J].中國農(nóng)學(xué)通報,2012,28(27):283-289.
[57]王新保,盧蓉蓉,任舉,等.酶法制備乳鐵蛋白抗菌肽的工藝 [J].食品與發(fā)酵工業(yè),2008,34(2):73-78.
[58]馬儷珍,張建榮,任小青,等.鯰魚骨蛋白酶解產(chǎn)物抗菌性的酶解工藝優(yōu)化 [J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報,2009,24 (4):354-358.
[59]Xiao J,Zhang H.An escherichia coli cellmembrane chromatography-offline LC-TOF-MSmethod for screening and identifying antimicrobial peptides from Jatropha curcasmeal protein isolate hydrolysates[J].Journalof Biomolecular Screening,2012,17 (6):752-760.
[60]黎觀紅,張杰,樂國偉,等.乳酪蛋白源免疫調(diào)節(jié)肽 [J].中國食品添加劑,2004(6):54-58.
[61]彭汶鐸,陳啟亮,趙金華.鮑魚酶解提取物的營養(yǎng)成分及對免疫低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用 [J].中國食品衛(wèi)生雜志,2005,17(6):494-497.
[62]霍乃蕊,劉玉花,孔保華,等.羊骨酶解物的免疫調(diào)節(jié)活性研究 [J].核農(nóng)學(xué)報,2010,24(4):772-776.
[63]張黎明.固定化胰蛋白酶酶解酪蛋白產(chǎn)生酪蛋白磷酸肽的條件研究 [D].成都:西華大學(xué),2009.
[64]闞建全.食品化學(xué) [M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2010:59.
[65]李如蘭,王力克,戴四發(fā).酪蛋白磷酸肽功能研究進展 [J].家禽科學(xué),2012(2):43-45.◇