陳康勇,鐘為銘,高志鵬,2

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長沙 410128；2.水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南 常德 415000)

蛭弧菌是一類專門寄生于其他細(xì)菌并能導(dǎo)致其裂解的革蘭氏陰性菌，對多種致病菌具有良好的裂解效果[1]，屬于蛭弧菌科，比一般細(xì)菌小，能通過細(xì)菌濾器，廣泛存在于土壤、河流、下水道污泥等環(huán)境中。蛭弧菌不侵染真核細(xì)胞，對人和動物無致病性[2-3]，薛恒平等[4-6]報(bào)道了蛭弧菌對仔雞、小鼠、鯽魚(Carassiusauratus)的生長沒有毒害作用。蛭弧菌作為“活性抗生素”在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)學(xué)以及環(huán)保方面已展現(xiàn)出其應(yīng)用價(jià)值[7-9]，它能夠在短時(shí)間內(nèi)裂解弧菌屬(Vibrio)、氣單胞菌屬(Aeromonas)、假單胞菌屬(Pseudomomas)等主要水生動物病原菌，林茂等[10]研究表明，蛭弧菌BDH21-02的宿主范圍極為廣泛，對氣單胞菌屬、弧菌屬、假單胞菌屬、愛德華氏菌屬(Edwardsiella)中常見種具有裂解作用。養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)控已成為發(fā)展生態(tài)養(yǎng)殖的關(guān)鍵，蛭弧菌可有效控制水體中氨氮、亞硝酸鹽、硫化物等有害物質(zhì)的含量，達(dá)到改良水質(zhì)的目的。李怡等[11]研究發(fā)現(xiàn)蛭弧菌可有效降低烏鱧(Ophiocephalusargus)養(yǎng)殖池氨氮、亞硝酸鹽氮和弧菌的含量，同時(shí)增加水中溶解氧。

目前，細(xì)菌性疾病是制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素，抗生素類藥物是防治細(xì)菌性疾病的主要手段，但抗生素的濫用導(dǎo)致多種病原菌產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)在水生動物、水體中藥物殘留的毒副作用日益顯著，這給食品安全、養(yǎng)殖環(huán)境以及自然生態(tài)環(huán)境都帶來巨大威脅。因此，蛭弧菌以其凈化水質(zhì)、消除病原菌的特性[12]，在水生動物生態(tài)、健康養(yǎng)殖中具有廣闊的應(yīng)用前景。

1 蛭弧菌的作用機(jī)理

蛭弧菌的生活史有兩個(gè)階段，一個(gè)是自由生活、能運(yùn)動、不進(jìn)行增殖的階段，即非生長攻擊階段，另一個(gè)是在特定宿主細(xì)菌的周質(zhì)空間中利用宿主菌成分為營養(yǎng)源并通過復(fù)分裂進(jìn)行增殖，最后裂解宿主細(xì)菌并釋放成熟子代個(gè)體，兩個(gè)階段交替進(jìn)行[13]，具體可分為識別定位、吸附侵入、生長繁殖、裂解釋放4個(gè)階段。(1)識別定位階段：早期研究認(rèn)為蛭弧菌通過跳躍式的隨機(jī)碰撞尋找宿主，并直接吸附至宿主菌上[14]。但最新研究表明，某些蛭弧菌菌株對水中氨基酸和其他有機(jī)化合物有趨向性，蛭弧菌可通過識別宿主菌群產(chǎn)生的絲氨酸內(nèi)酯向宿主菌富集區(qū)域高速前進(jìn)[15]。(2)吸附侵入階段：蛭弧菌高度猛烈碰撞宿主菌，并以無鞭毛端與宿主菌細(xì)胞壁接觸，與宿主菌形成一個(gè)短暫的可逆結(jié)合，當(dāng)蛭弧菌通過識別確認(rèn)是一個(gè)合適宿主時(shí)，通過外膜蛋白、脂多糖或纖毛與宿主相互作用發(fā)生不可逆結(jié)合[16]。吸附于宿主菌后，菌體以100 r/s以上的轉(zhuǎn)速在宿主菌細(xì)胞壁產(chǎn)生機(jī)械“鉆孔”效應(yīng)，并通過釋放聚糖酶、肽酶、N-脫乙?；?、?；D(zhuǎn)移酶和一種去除脂蛋白的酶[17-20]，使宿主菌的細(xì)胞壁外膜降解、變薄并形成滲透孔，然后蛭弧菌通過纖毛的伸縮推進(jìn)蛭弧菌穿過滲透孔[15]。蛭弧菌入侵宿主菌后導(dǎo)致宿主菌不斷膨脹，并成為對滲透壓不敏感的球形體，最終導(dǎo)致宿主菌死亡[21]。因此，宿主菌被一個(gè)蛭弧菌吸附后，不能再被其他蛭弧菌吸附。其他沒有找到合適宿主菌的蛭弧菌會因消耗大量能量而死亡[22]。(3)生長繁殖階段：蛭弧菌侵入宿主菌周質(zhì)空間的同時(shí)失去鞭毛，宿主菌由桿狀變?yōu)榍驙?，形成蛭質(zhì)體，蛭弧菌把宿主菌作為營養(yǎng)源進(jìn)行自身生物大分子合成，并利用宿主DNA 降解得到的核苷酸來合成自身DNA[23]。研究發(fā)現(xiàn)BbacteriovorusHD100有一套完整的嘌呤和嘧啶合成基因，這說明蛭弧菌本身也具有合成核苷酸的能力[15]。當(dāng)宿主營養(yǎng)被完全吸收后，絲狀的菌體均勻伸長數(shù)倍，并均勻地以復(fù)分裂方式形成多個(gè)游動細(xì)胞，同時(shí)合成鞭毛。(4)裂解釋放階段：蛭弧菌的增殖和水解酶的產(chǎn)生使宿主菌細(xì)胞壁分解，進(jìn)而裂解釋放出子代蛭弧菌，開始新的生命周期。

目前，已有部分研究者從分子水平闡明蛭弧菌的裂解機(jī)制[24-26]，Schwudke等[27]研究顯示，蛭弧菌菌毛蛋白基因的表達(dá)在裂解宿主菌的過程中具有重要作用。Messing等[28]發(fā)現(xiàn)蛭弧菌bd0713基因表達(dá)產(chǎn)物BdRppH為RNA焦磷酸水解酶，與裂解酶的分泌有關(guān)。Lambert等[29]研究表明，蛭弧菌的編碼甲基接受趨化蛋白基因mcp2敲除后將會導(dǎo)致侵染宿主菌的速度變慢，證明了該基因在蛭弧菌尋找宿主菌方面有趨向性作用。

2 蛭弧菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用

當(dāng)今，人們對健康的水產(chǎn)品的需求量日益增長，但是我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)片面地追求降低飼料系數(shù)、提高產(chǎn)量，追求經(jīng)濟(jì)利益，從而無節(jié)制地使用抗生素、化學(xué)藥物來防治病害，使養(yǎng)殖環(huán)境不斷遭到破壞，出現(xiàn)水體富營養(yǎng)化、重金屬污染、藥物殘留超標(biāo)等現(xiàn)象，加之自然環(huán)境的日益惡化，導(dǎo)致水生動物疾病頻發(fā)，我國水產(chǎn)業(yè)每年因病害造成的經(jīng)濟(jì)損失約為140億元，其中細(xì)菌性疾病尤為嚴(yán)重，約占水產(chǎn)養(yǎng)殖病害的46%[30]。蛭弧菌以其天然、無污染、無殘留的特點(diǎn)在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中具有廣闊的發(fā)展前景，有望成為抗生素的替代品，減輕抗生素濫用帶來的各種困擾，減少抗生素濫用帶來的巨大經(jīng)濟(jì)損失，蛭弧菌已經(jīng)成為水生動物健康、生態(tài)、高效養(yǎng)殖的新工具。

2.1 改善養(yǎng)殖水質(zhì)

隨著我國水資源污染加重，河流、湖泊等養(yǎng)殖水源遭到破壞，養(yǎng)殖水質(zhì)面臨嚴(yán)重的問題。在養(yǎng)殖過程中，水生動物排泄物以及剩余餌料不斷積累，一旦水體中有機(jī)物增加的速度大于水體自凈的速度，就會使溶解氧下降，氨氮、亞硝酸態(tài)氮上升，致病微生物大量繁殖，導(dǎo)致疾病頻發(fā)、水生動物生長發(fā)育異常，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。蛭弧菌制劑發(fā)酵過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可分解、轉(zhuǎn)化水中的亞硝酸鹽，改善養(yǎng)殖水體水質(zhì)，減少蛋白態(tài)氮向氨和胺轉(zhuǎn)化，從而減輕水中氨和有機(jī)質(zhì)污染[31]。

曲疆奇等[32]研究表明，蛭弧菌微生態(tài)制劑可有效利用養(yǎng)殖水體中的含氮化合物，使養(yǎng)殖水體中的氨氮、亞硝酸態(tài)氮快速降解，有效改善養(yǎng)殖水質(zhì)。張梁等[33]在草魚(Ctenopharyngodonidellus)養(yǎng)殖池加入蛭弧菌后發(fā)現(xiàn)，水體主要水化指標(biāo)具有明顯改善，試驗(yàn)組的平均化學(xué)耗氧量、氨氮、硫化物顯著低于對照組，溶解氧顯著高于對照組，池水細(xì)菌總數(shù)及病原菌的數(shù)量也隨著蛭弧菌濃度的增加呈幾何級數(shù)減少。陳家長等[34]研究發(fā)現(xiàn)，蛭弧菌和光合細(xì)菌聯(lián)合使用對中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)養(yǎng)殖水質(zhì)有改善作用，細(xì)菌總數(shù)由6.3×106cfu/L降至2.6×103cfu/L，試驗(yàn)組池塘的氨氮、硫化物含量以及化學(xué)需氧量均明顯下降。李歡歡等[35]研究發(fā)現(xiàn)，蛭弧菌BDH12 可有效抑制九孔鮑(Haliotisdiversicoloraquatilis)腸道和養(yǎng)殖水體中總菌和弧菌數(shù)量，在病原菌數(shù)量快速增長時(shí)，蛭弧菌BDH12表現(xiàn)出較強(qiáng)抑制作用，有效改善水質(zhì)，九孔鮑的存活率和生長率顯著提高。可見，蛭弧菌在改善養(yǎng)殖水質(zhì)方面有非常顯著的效果，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有十分廣闊的應(yīng)用前景。

2.2 預(yù)防水生動物細(xì)菌性疾病

抗生素的長期使用容易使病原菌產(chǎn)生耐藥性，利用蛭弧菌對病原菌獨(dú)特的寄生和裂解特性，可有效清除養(yǎng)殖水體及水生動物體內(nèi)的病原菌，減少病原菌數(shù)量，使其無法達(dá)到致病密度，以達(dá)到防治病害、提高成活率的效果。因此，蛭弧菌具有取代抗生素的潛力，成為控制水生動物疾病的新手段。蛭弧菌作為水體自凈的生物因子，可有效清除河水中的大腸桿菌(Escherichiacoli)、沙門氏菌(Salmonella)和不凝集弧菌(non-agglutinableVibrio)，清除率均在90%以上[36]。張呂平等[37]研究證實(shí)，蛭弧菌對凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei)養(yǎng)殖水體中弧菌的殺滅效果顯著優(yōu)于二氯異氰尿酸和季銨鹽絡(luò)合碘消毒劑，可有效預(yù)防凡納濱對蝦弧菌病的發(fā)生。陳靜等[38]研究表明，使用5×107pfu/m3的蛭弧菌可使養(yǎng)殖水體中細(xì)菌總數(shù)由原來的4.60×105cfu/mL降至2.62×103cfu/mL，有效預(yù)防羅非魚(Oreochromisspp)細(xì)菌性疾病，與光合細(xì)菌配合使用可取得更好效果。張志祥[39]用蛭弧菌Bdm4拌飼投喂鯉魚(Cyprinuscarpio)和黃鰭鯛(Acanthopagruslatus)，并采用嗜水氣單胞菌(A.hydrophila)和溶藻弧菌(V.alginolytica)進(jìn)行感染，試驗(yàn)組的存活率分別為65%和55%，而對照組的存活率均為35%。熊英等[40]向池塘中潑灑蛭弧菌1個(gè)月后，與對照塘相比，試驗(yàn)塘草魚發(fā)病率、死亡率明顯下降，蛭弧菌可有效預(yù)防由病原菌引起的草魚赤皮病、爛鰓病和腸炎。

蛭弧菌可有效減少抗生素、消毒劑等化學(xué)藥劑的使用，有效降低化學(xué)藥物在水生動物體內(nèi)的殘留，進(jìn)而減少藥物殘留對人類健康的危害。在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)“防先于治”的今天，蛭弧菌以其無毒害、無殘留等優(yōu)點(diǎn)，已成為促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康、可持續(xù)發(fā)展的重要因素。

2.3 治療水生動物細(xì)菌性疾病

水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)頻頻遭到細(xì)菌性疾病的侵襲，甚至引發(fā)了大規(guī)模的死亡，限制了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。水生動物細(xì)菌性疾病的病原菌以氣單胞菌屬、假單胞菌屬、弧菌屬為主，這3個(gè)屬細(xì)菌均為革蘭氏陰性菌，能被蛭弧菌裂解，且裂解率高達(dá)70%以上[41]。生產(chǎn)上可利用蛭弧菌對革蘭氏陰性菌的裂解特性治療水生動物細(xì)菌性疾病。秦生巨[31]利用蛭弧菌制劑治療由弧菌引起的大菱鲆(Scophthalmusmaximus)出血病，結(jié)果證明連續(xù)使用復(fù)合蛭弧菌制劑3 d，267尾嚴(yán)重出血的大菱鲆的治愈率為98.7%，效果顯著。陳麗蕓等[42]使用蛭弧菌治療由假單胞菌屬、弧菌屬中的某些菌種為主要病原菌引起的大菱鲆紅嘴病，低密度組(103pfu/mL)7 d基本達(dá)到治愈紅嘴病的效果，高密度組(107pfu/mL)能在5 d內(nèi)治愈全部患病大菱鲆，蛭弧菌密度越高，紅嘴病痊愈越快。黃立斌等[43]試驗(yàn)證實(shí)，蛭弧菌能夠明顯降低鯽魚感染嗜水氣單胞菌的發(fā)病率和死亡率，使用蛭弧菌的試驗(yàn)組鯽魚存活率達(dá)30%以上，而對照組全部死亡。蛭弧菌不如抗生素效應(yīng)快，其制劑4～6 h才能效應(yīng)，但作用效果能持續(xù)15 d以上，這一點(diǎn)顯著優(yōu)于抗生素及其他化學(xué)藥物[31]。但是當(dāng)發(fā)生爆發(fā)性強(qiáng)、發(fā)病急的細(xì)菌性疾病時(shí)，蛭弧菌的效應(yīng)時(shí)間較長，難以達(dá)到治療的效果，所以使用蛭弧菌應(yīng)以防預(yù)為主，并在細(xì)菌性疾病發(fā)病初期使用。

2.4 提高水生動物免疫活性

免疫系統(tǒng)是機(jī)體的防御系統(tǒng)，其防御功能的高低，直接影響到機(jī)體的抗病能力和生產(chǎn)能力。尤其是蝦類、貝類等低等無脊椎動物，其免疫系統(tǒng)進(jìn)化程度低，僅由少量免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫因子組成，缺乏特異性免疫應(yīng)答。蛭弧菌進(jìn)入水生動物腸道后，在聚糖酶、肽酶等酶的作用下釋放細(xì)胞壁中的肽聚糖或者其它免疫物質(zhì)，從而發(fā)揮免疫增強(qiáng)劑的功能，刺激溶菌酶活性，增強(qiáng)與魚類免疫功能相關(guān)酶活性[44]。陳小紅等[45]研究表明，在養(yǎng)殖水體中添加蛭弧菌后，九孔鮑超氧化物歧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶的活力均高于對照組。用嗜水氣單胞菌攻毒后，對照組九孔鮑的存活率為53%，而蛭弧菌添加組的九孔鮑的存活率均達(dá)到89% 以上?？梢?，在養(yǎng)殖過程中應(yīng)用蛭弧菌可有效提高九孔鮑的非特異性免疫應(yīng)答和抗病力。張梁等[46]用添加蛭弧菌劑量為5 g/kg的飼料喂養(yǎng)草魚，草魚血清抗菌活性、溶菌酶活性、脾臟和胸腺的免疫器官指數(shù)逐漸升高，血液中的氯化硝基四氮唑藍(lán)陽性細(xì)胞數(shù)量是對照組的2.2倍。鄧時(shí)銘等[47]試驗(yàn)證實(shí)，蛭弧菌能有效刺激鯽魚脾臟和頭腎等免疫器官的生長，在試驗(yàn)的第21 d，其血液中紅細(xì)胞數(shù)量和氯化硝基四氮唑藍(lán)陽性細(xì)胞的數(shù)量分別是對照組的2.11和1.80倍。韓宇翔等[44]研究表明，飼料中添加蛭弧菌對西伯利亞鱘(Acipenserbaeri)體內(nèi)免疫相關(guān)酶系統(tǒng)產(chǎn)生顯著的調(diào)理改善作用，試驗(yàn)組的溶菌酶活性都顯著增強(qiáng)，飼料中蛭弧菌劑量為6 mg/g 與 9 mg/g 的兩組西伯利亞鱘魚血清中堿性磷酸酶、過氧化酶活性相對于對照組都有極顯著的增強(qiáng)，使其非特異性免疫力得到提高。可見，蛭弧菌對水生動物免疫活性的增強(qiáng)作用為疾病防控、綠色養(yǎng)殖尋找到新的切入點(diǎn)。

2.5 用于水產(chǎn)品保質(zhì)

水產(chǎn)品是人類重要的蛋白源，然而在種類繁多的水產(chǎn)品中存在多種危害人體的病原菌[48]，如大腸桿菌、霍亂弧菌(V.cholerae)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、沙門氏菌等，這些細(xì)菌是引起食物中毒的主要原因。因此，水產(chǎn)品保質(zhì)是水產(chǎn)加工業(yè)發(fā)展過程中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，也是關(guān)系到水產(chǎn)品品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)效益的重要問題。蛭弧菌能夠通過裂解引起水產(chǎn)品變質(zhì)的病原菌，達(dá)到水產(chǎn)品長期保鮮的目的。蔣小平等[49]在草魚片大腸桿菌控制試驗(yàn)中表明，蛭弧菌BDYJAL 低、高密度組在試驗(yàn)3～36 h內(nèi)都能有效控制新鮮草魚魚片中大腸桿菌的生長。李娜等[50]研究表明，蛭弧菌M01處理草魚片與超高壓、雙氧水相比，能在較長時(shí)間內(nèi)(48 h)控制草魚魚片中豬霍亂沙門氏菌(Salmonellaentericacholeraesuis)的增長，保持魚片良好的感官狀態(tài)，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)超高壓處理組豬霍亂沙門氏菌數(shù)高于蛭弧菌試驗(yàn)組0.63 Log。可見，蛭弧菌為草魚片提供了綠色的加工途徑。閆劉慧等[51]將蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體以1∶1比例混合制備的蛭弧菌混合體作為微生物制劑用于大馬哈魚(Oncorhynchusketa)生魚片的制作，將加工初洗時(shí)的生鮮原料浸漬于蛭弧菌混合體中，當(dāng)蛭弧菌混合體菌液密度達(dá)103pfu/mL時(shí)，大馬哈魚片菌落總數(shù)和病原菌的殘留率均為0，從而有效地預(yù)防食物中毒并延長了魚片的保質(zhì)期。蛭弧菌作為一種新型的防腐劑，能有效清除引起水產(chǎn)品變質(zhì)的病原菌，保持原有風(fēng)味，同時(shí)不會造成食物營養(yǎng)的流失，還能有效降低水產(chǎn)品中包括病原菌在內(nèi)的生物負(fù)荷量。在食物安全越來越被重視的今天，蛭弧菌的顯著效果為水產(chǎn)品保質(zhì)提供了一條新思路。

3 蛭弧菌應(yīng)用中存在的問題

雖然蛭弧菌在改良水質(zhì)、疾病防控、水產(chǎn)品保質(zhì)等方面具有良好的應(yīng)用效果，但蛭弧菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖應(yīng)用中依然存在諸多問題，這些問題也制約了蛭弧菌的廣泛使用。其中主要存在的問題包括：(1)國內(nèi)外關(guān)于蛭弧菌的研究主要集中于應(yīng)用，而忽略了基礎(chǔ)理論研究的重要性，例如，蛭弧菌吸附于宿主菌表面的識別位點(diǎn)以及不可逆結(jié)合的具體反應(yīng)仍然有待研究，蛭弧菌裂解機(jī)理的研究還需完善。(2)水產(chǎn)用蛭弧菌制劑的劑型較為單一，而單一的高密度蛭弧菌在水體中的作用時(shí)間較短，需要頻繁加入才能維持控菌效果，而且生產(chǎn)上使用的絕大多菌種為通用菌種，對適用對象及范圍缺乏針對性。(3)尚未建立一種簡易的蛭弧菌篩選方法，目前使用的蛭弧菌制劑效率較低，并且會因?yàn)榭股氐人幬锏氖褂枚Щ?。今后?yīng)該加強(qiáng)關(guān)于蛭弧菌篩選方法的研究，以獲得針對不同養(yǎng)殖品種、不同生長時(shí)期、不同環(huán)境條件的耐藥性較強(qiáng)的蛭弧菌菌株，并使其作用更專一。(4)蛭弧菌增殖速度較慢，不同蛭弧菌的宿主菌裂解譜存在差異性，如何使其增殖速度更快、裂解譜更廣也是一個(gè)有待解決的問題。因此，高效增殖方法以及擴(kuò)增蛭弧菌的裂解譜研究甚為迫切。(5)蛭弧菌在生產(chǎn)應(yīng)用中發(fā)揮作用的有效劑量還缺乏研究，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中蛭弧菌的使用量也多是基于經(jīng)驗(yàn)，尚無科學(xué)依據(jù)。(6)實(shí)驗(yàn)室條件下多運(yùn)用液氮超低溫法、冷凍真空干燥法保藏蛭弧菌，關(guān)于蛭弧菌持效穩(wěn)定、適合生產(chǎn)應(yīng)用的保藏方法的研究甚少。(7)許多細(xì)菌都有天然的轉(zhuǎn)化能力，頻繁的使用蛭弧菌可以提高其與病原菌發(fā)生有害基因水平轉(zhuǎn)移的可能性，使蛭弧菌轉(zhuǎn)變成新的有害菌，產(chǎn)生新的問題，因此蛭弧菌使用的安全性方面值得注意。(8)目前的研究主要強(qiáng)調(diào)了蛭弧菌的實(shí)驗(yàn)室條件下的應(yīng)用效果，這些試驗(yàn)不能支撐蛭弧菌在不同養(yǎng)殖品種、不同水質(zhì)條件的實(shí)際生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用。因此，蛭弧菌制劑的應(yīng)用技術(shù)研究有待加強(qiáng)。

蛭弧菌制劑產(chǎn)品仍不夠成熟，上述存在問題制約著蛭弧菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此，解決這些問題并選育出高效廣譜、適應(yīng)能力強(qiáng)、耐藥性強(qiáng)、增殖快的菌種將是今后對蛭弧菌研究的重點(diǎn)。

4 展 望

目前，雖然已經(jīng)進(jìn)行了許多關(guān)于水產(chǎn)用蛭弧菌的研究，但還有很多工作需要繼續(xù)開展，我國水產(chǎn)蛭弧菌制劑還處于起步階段，還有很多理論和實(shí)踐問題需要進(jìn)一步探索。第一，缺乏有效控制蛭弧菌變異的方法，選育出高效廣譜且適應(yīng)能力強(qiáng)的蛭弧菌是工作的關(guān)鍵，可以通過分子克隆、基因工程等分子生物學(xué)技術(shù)對蛭弧菌的基因進(jìn)行改造。第二，改良水質(zhì)是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)問題，單靠一種功能菌往往不能實(shí)現(xiàn)，不同蛭弧菌或者蛭弧菌與其他益生菌間的協(xié)同作用有助于其效果的增強(qiáng)。通過不同功能蛭弧菌的協(xié)同作用，配制出多功能的復(fù)合制劑，解決菌種單一、應(yīng)用效果不佳的現(xiàn)狀。因此，如何將不同蛭弧菌或者蛭弧菌與其他益生菌有效聯(lián)合使用，將成為今后研究的主要方向。第三，加強(qiáng)蛭弧菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的生產(chǎn)性試驗(yàn)，加強(qiáng)蛭弧菌對不同品種、規(guī)格的水生動物以及養(yǎng)殖環(huán)境發(fā)揮作用的有效劑量的研究，為生產(chǎn)提供最直接的參考。第四，優(yōu)化生產(chǎn)工藝，以產(chǎn)出容易保藏、便于運(yùn)輸、使用簡單的蛭弧菌制劑為目標(biāo)，從而有利于推廣使用。第五，充分考慮蛭弧菌對水生動物自身有益菌的影響，以及病原菌有害基因的水平轉(zhuǎn)移等安全性問題，防止產(chǎn)生新的生態(tài)失衡。

當(dāng)前，解決抗生素問題迫在眉睫，漁用抗生素的濫用更是屢次被推上風(fēng)口浪尖，農(nóng)業(yè)部第2292號公告提出，食品動物養(yǎng)殖中禁止使用洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星，2017農(nóng)業(yè)部擬定起草了《全國遏制動物源細(xì)菌耐藥行動計(jì)劃》，這一次針對更多的抗生素，如金霉素、黃霉素、喹乙醇等。保障水產(chǎn)品質(zhì)量安全已經(jīng)成為水產(chǎn)養(yǎng)殖工作的重點(diǎn)，蛭弧菌已在我國商品化生產(chǎn)，以其綠色、環(huán)保、健康的特點(diǎn)有望取代抗生素，并在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中廣泛應(yīng)用，必定會帶來良好的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)和生態(tài)效應(yīng)。

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