張學(xué)海馬鐵柱
(1,吉林省梅河口市牛心頂鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 135011;2,吉林省梅河口市雙興鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 135009)
雞壞死性腸炎又名腸毒綜合征,是由魏氏梭菌感染腸道引起的雞的一種急性細(xì)菌性傳染病[1]。本病以雛雞和青年雞感染居多,發(fā)病后對雞生長發(fā)育產(chǎn)生較大影響,下面重點(diǎn)就本病的診斷要點(diǎn)和防治措施和大家作一下交流。
魏氏梭菌是一種革蘭氏染色呈陽性的大桿菌,兩端鈍圓,呈卵圓形,一般少量存在結(jié)直腸和盲腸部位,對雞健康不產(chǎn)生影響。當(dāng)大量感染或腸道微生態(tài)失衡時,魏氏梭菌會上行進(jìn)入小腸段,并在其中進(jìn)行繁殖,產(chǎn)生多種強(qiáng)烈的毒素和酶,毒素導(dǎo)致腸壁細(xì)胞的死亡和脫落,吸收入血后可引起血細(xì)胞溶血或?qū)е陆M織分解,進(jìn)而引發(fā)腸道壞死。魏氏梭菌在繁殖過程中還可產(chǎn)生大量氣體,造成胃腸鼓脹。本菌對碳水化合物的分解作用極強(qiáng),絕大多數(shù)的單糖、雙塘和多糖都可被其利用分解,分解后產(chǎn)酸產(chǎn)氣,對菊糖、甘露醇和水楊苷不分解,對明膠有緩慢液化作用,可產(chǎn)生硫化氫氣體,不產(chǎn)生靛基質(zhì),對凝固蛋白及血清無消化能力,這些都是魏氏梭菌基本的生化特征。
診斷本病必須通過微生物檢驗來確診,由于腸道微生物種類多,且分離過程中很容易受到污染,從而給本病的診斷帶來不確定性,實驗室診斷需要注意以下要點(diǎn)。
雞腸道環(huán)境是一個非無菌環(huán)境,含量大量微生物,有些是常在菌,有些是致病菌,有些是益生菌,這些菌通過相互作用形成一個微生態(tài)。健康雞腸道微生態(tài)處于相對平衡,有益菌占絕對優(yōu)勢,條件致病菌無法大量繁殖,這其中就包括魏氏梭菌[2]。
刮取壞死腸道組織,或直接取腸道內(nèi)容物,在無菌生理鹽水中將腸道組織用眼科剪剪碎或?qū)⒛c道內(nèi)容物用無菌生理鹽水吹打混勻,靜置沉淀后取上清液,分別在綿羊血瓊脂平板和普通瓊脂平板上接種,37℃培養(yǎng)24h后,如果在綿羊血瓊脂平板上有周圍出現(xiàn)雙層溶血環(huán),內(nèi)層完全溶血,外層溶血不完全,好似靶狀,菌落本身略帶灰黃色乃至淺灰褐色,與空氣接觸后逐漸變?yōu)榛揖G色的菌落,普通瓊脂平板中有菌落直徑約2~4mm,呈凸面狀,表面光滑,半透明,邊緣整齊的菌落,則將這些菌落再次接種于牛乳培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)10h左右,如果試管中產(chǎn)生大量氣體,同時酪蛋白出現(xiàn)凝固,被氣體沖散后呈海綿狀,就可確定分離的菌為魏氏梭菌。
雖然通過上述方法能成功在雞腸道中分離到魏氏梭菌,但由于本菌型眾多,目前至少歸類有A、B、C、D、E、F6種,故要想明確是哪種型感染,必須通過必要的生化鑒定方法和毒素鑒定法。目前已知的魏氏梭菌毒素至少有12種,通過鑒定生化特征和毒素作用可進(jìn)行確診,其中毒素作用主要包括致死性、溶血性、壞死性、卵磷脂酶、膠原酶、非致死性蛋白酶、非致死性透明質(zhì)酸酶等指標(biāo)。
隨著科技發(fā)展,分子生物學(xué)鑒定方法已日趨成熟,可以通過人工合成魏氏梭菌特定引物片段,采用PCR技術(shù)對目的菌的特定遺傳序列進(jìn)行擴(kuò)增[3],如果結(jié)果為陽性則表明是魏氏梭菌感染,同時通過測定序列與基因庫中的不同型序列對比,很容易判定感染菌類型。分子生物學(xué)方法具有結(jié)果可靠、方法成熟、用時時間短和精確度高的特點(diǎn),但檢測成本也高,相信隨著檢測方法的日漸成熟及推廣力度不斷加大,檢測成本必然會下降,本方法也將會在臨床得到大力應(yīng)用。
預(yù)防本病常用的方法是微生態(tài)防治和藥物防治,同時防治過程中必須加強(qiáng)雞群管理。
微生態(tài)是腸道微生物菌群間形成的一種微生物平衡,只要有益菌群能占主導(dǎo)并發(fā)揮優(yōu)勢作用,本病就不會發(fā)生。目前常用的微生態(tài)制劑有乳酸菌制劑、酵母菌制劑、地衣芽孢桿菌制劑、枯草芽孢桿菌制劑、雙歧桿菌制劑、糞腸球菌制劑等,這些微生物通過不斷的額外補(bǔ)充,達(dá)到連續(xù)抑制魏氏梭菌繁殖的目的。
口服藥物可有效抑制魏氏梭菌的繁殖,常用的藥物有林可霉素、慶大霉素、紅霉素、恩諾沙星及桿菌肽等,這些抗生素按照說明用量使用,一般連用3d,可將處于壞死性腸炎亞健康狀態(tài)的雞群恢復(fù)到健康狀態(tài)。需要提醒的是使用抗生素的同時建議配合補(bǔ)液鹽、魚肝油、電解多維等飲水使用,以加快腸黏膜細(xì)胞的修復(fù)。