答:電鏡生物樣品的取材,正確與否決定著實驗結(jié)果的準確性,電鏡要求樣品必須忠實地反映其生活時的狀態(tài),應(yīng)盡量避免“死后改變”和人為假象的發(fā)生,現(xiàn)將電鏡取材注意事項總結(jié)如下:
(1)取材部位要準確:器官、部位要準確,如觀察腎小球需取腎皮質(zhì)而不要取到腎髓質(zhì)。
(2)動作迅速:活體(血供未斷)取材,材料離體后需在1 min內(nèi)放入固定液(戊二醛),使組織盡可能保持原來的生活狀態(tài)。
(3)材料體積要小:一般不超過1 mm3,使組織得到均勻而充分的固定,需要定向包埋的樣品(如皮膚、肌肉、血管等)應(yīng)切成1×3 mm2的長條。
(4)機械損傷要?。喝〔膽?yīng)用鋒利、清潔的雙面刀片(新刀片應(yīng)用酒精去除刀鋒上的油脂),盡量避免牽拉和擠壓。
(5)低溫:固定液4℃保存,取材所需器械應(yīng)進行預(yù)冷,取材過程在冰盒上進行,取好的樣品放在含固定液的小瓶中4℃保存,盡量降低酶的活性,減少細胞的損傷。