王金云，李小娜

磷和硫是植物生長(zhǎng)發(fā)育不可或缺的元素，土壤中磷、硫的總量不能很好表征植物的吸收水平。為了全面地反映土壤中磷、硫肥力的供應(yīng)狀況，還應(yīng)測(cè)定土壤中磷、硫的有效態(tài)含量，這對(duì)指導(dǎo)施肥和土壤改良具有重要意義。土壤中磷和硫形態(tài)比較復(fù)雜，主要可分為無(wú)機(jī)結(jié)合態(tài)和有機(jī)結(jié)合態(tài)，其中有效態(tài)主要包括水溶性態(tài)、部分吸附態(tài)及有機(jī)態(tài)［1－2］。

石灰性土壤中有效磷和有效硫的提取主要采用Na HCO3溶液浸提［3－6］，其中有效硫也有采用 CaCl2溶液浸提［7－8］。大量研究表明：Na HCO3溶液提取的有效磷和有效硫含量即可反映石灰性土壤供磷、供硫能力，與植物吸收量有較好的相關(guān)性，可用來(lái)評(píng)價(jià)土壤中磷、硫的有效性［9－11］。有效磷的測(cè)定有鉬銻抗比色法［3－4，6］和電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法（ICP-AES）［12］，有效硫的測(cè)定有BaSO4比濁法［5］和ICP-AES［13］。其中采用鉬銻抗比色法測(cè)定有效磷時(shí)，浸提出的腐殖質(zhì)會(huì)產(chǎn)生一定的影響，不少學(xué)者對(duì)此進(jìn)行過(guò)研究［14］。采用BaSO4比濁法測(cè)定有效硫時(shí)，其測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性稍差，而且不能測(cè)定出浸提液中的有機(jī)硫，造成結(jié)果偏低［15］。采用ICP-AES測(cè)定有效磷和有效硫時(shí)，不僅能克服腐殖質(zhì)顏色帶來(lái)的影響，而且能測(cè)定出浸提液中的總硫，其中有機(jī)硫的含量可以反映潛在供硫能力。ICP-AES比鉬銻抗比色法和BaSO4比濁法更穩(wěn)定，可以同時(shí)測(cè)定土壤中的有效磷和有效硫。

本工作在林業(yè)標(biāo)準(zhǔn) LY／T 1233－1999［3］和LY／T 1265－1999［5］基礎(chǔ)上，對(duì)石灰性土壤中有效磷和有效硫的同時(shí)測(cè)定進(jìn)行探討，研究水土比、振蕩時(shí)間、濾液稀釋方式、浸提溫度等對(duì)浸提結(jié)果的影響。

1 試驗(yàn)部分

1．1 儀器與試劑

i CAP 6300型電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀；ZD-2型調(diào)速多用振蕩器。

磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：100 mg·L－1，稱取經(jīng)105℃干燥2 h的KH2PO40．439 4 g置于燒杯中，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1 L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：100 mg·L－1，稱取經(jīng)105℃干燥2 h的K2SO40．543 6 g置于燒杯中，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1 L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

Na HCO3溶液：0．5 mol·L－1，p H 8．5，稱取Na HCO342．0 g，加水溶解后，用水稀釋至1 L，用4 mol·L－1Na OH 溶液調(diào)節(jié)p H 至8．5。

KH2PO4、K2SO4為優(yōu)級(jí)純，Na HCO3、鹽酸、硝酸均為分析純，試驗(yàn)用水為去離子水。

1．2 儀器工作條件

射頻功率1．15 k W，載氣為高純氬氣，霧化氣流量0．7 L·min－1，輔助氣流量0．5 L·min－1，冷卻氣流量15 L·min－1，分析泵速50 r·min－1，垂直觀測(cè)高度12 mm。元素分析譜線為P 214．914 n m，S 182．034 n m。

1．3 試驗(yàn)方法

稱取通過(guò)2 mm篩孔的風(fēng)干土樣5．00 g置于浸提瓶中，加入 0．5 mol·L－1Na HCO3溶液50．0 mL，在20～25℃下振蕩30 min，用中速定量濾紙過(guò)濾至燒杯中，分取濾液5．0 mL于燒杯中，加入1．0 mol·L－1HCl溶液5 mL稀釋，搖勻。隨同試樣做空白試驗(yàn)，按儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2．1 水土比和振蕩時(shí)間的選擇

采用正交試驗(yàn)考察水土比和振蕩時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，水土比為5∶1，10∶1，20∶1，30∶1，振蕩時(shí)間為10，30，60，90 min，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 正交試驗(yàn)結(jié)果Tab．1 Results of orthogonal test

表1 （續(xù)）

由表1可知：測(cè)定結(jié)果總體隨著振蕩時(shí)間和水土比的增大而增大，其中有效磷的測(cè)定值在振蕩時(shí)間為30 nin，水土比為10∶1和20∶1時(shí)基本一致，有效硫的測(cè)定值在水土比為5∶1和10∶1，振蕩時(shí)間達(dá)到60 min時(shí)變化不明顯。因此，試驗(yàn)選擇水土比為10∶1。林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中有效磷的測(cè)定采取水土比20∶1和振蕩時(shí)間30 min，有效硫的測(cè)定采取水土比5∶1和振蕩時(shí)間60 min。與林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法的測(cè)定結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，振蕩時(shí)間為30 min時(shí)，本方法測(cè)定值與其吻合。因此，試驗(yàn)最終選擇水土比為10∶1，振蕩時(shí)間為30 min。

2．2 濾液稀釋方式的選擇

選擇濾液顏色深的樣品進(jìn)行試驗(yàn)，重點(diǎn)考察3種濾液稀釋方式（不稀釋、用水稀釋和用1．0 mol·L－1HCl溶液稀釋）對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，結(jié)果見(jiàn)表2和表3。

表2 不同濾液稀釋方式對(duì)有效磷測(cè)定結(jié)果的影響Tab．2 Effect of different filtrate dilution methods on t he deter mination results of available phosphorous mg·kg－1

表3 不同濾液稀釋方式對(duì)有效硫測(cè)定結(jié)果的影響Tab．3 Effect of different filtrate dilution methods on the deter mination results of available sulf ur mg·kg－1

由表2－3可知：采用1．0 mol·L－1HCl溶液稀釋的測(cè)定結(jié)果比不稀釋和用水稀釋的測(cè)定結(jié)果略微偏高，平均偏差更小，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性更好。因此，試驗(yàn)選擇1．0 mol·L－1HCl溶液稀釋。

2．3 浸提溫度的選擇

浸提溫度對(duì)有效磷和有效硫的測(cè)定影響明顯，文獻(xiàn)［16］對(duì)浸提溫度影響有效磷的提取做了詳細(xì)的研究。文獻(xiàn)［17］試驗(yàn)結(jié)果表明：浸提溫度在20～25℃時(shí)，有效硫測(cè)定值基本一致，而浸提溫度達(dá)到30℃時(shí)，部分樣品測(cè)定結(jié)果明顯偏高。試驗(yàn)考察了浸提溫度為15，20，25，30℃時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 不同浸提溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響Tab．4 Effect of different extraction temperature on t he deter mination results mg·kg－1

由表4可知：當(dāng)浸提溫度在20～25℃時(shí)，測(cè)定結(jié)果變化不明顯；浸提溫度為30℃時(shí)，有效磷測(cè)定結(jié)果偏高9%～20%，有效硫測(cè)定結(jié)果偏高11%～35%，其中有效硫影響更大；當(dāng)浸提溫度為15℃時(shí)，有效磷測(cè)定結(jié)果偏低24%～38%，有效硫測(cè)定結(jié)果偏低11%～22%。因此，試驗(yàn)選擇浸提溫度為20～25℃。

2．4 分析譜線的選擇

磷的分析譜線一般選擇 P 177．495 n m，P 213．618 n m和 P 214．914 n m，硫的推薦譜線有S 180．731 n m，S 182．034 n m，S 182．624 n m。磷和硫分析譜線均處于真空紫外區(qū)，ICP-AES所用氣體為高純氬氣，可以驅(qū)趕氧氣，減少對(duì)分析譜線的吸收。浸提過(guò)程中會(huì)提取出少量鈣、鐵、鋁等元素，試驗(yàn)對(duì)鈣、鐵、鋁的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg·L－1）和磷、硫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（1．0 mg·L－1）采用鈣、鐵、鋁的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液定容，在各波長(zhǎng)處掃描，發(fā)現(xiàn)P 213．618 n m和S 182．624 n m存在干擾。結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果和波長(zhǎng)的穩(wěn)定性，試驗(yàn)最終選擇P 214．914 n m和S 182．034 n m 為分析譜線。

2．5 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

將磷、硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用體積比為1∶1的0．5 mol·L－1Na HCO3溶液和1．0 mol·L－1鹽酸溶液 稀 釋，配 制 為 0．500，1．00，2．00，5．00，10．0 mg·L－1的磷、硫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定，以磷、硫的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明：磷和硫的質(zhì)量濃度均在10．0 mg·L－1以內(nèi)與發(fā)射強(qiáng)度呈線性關(guān)系，其線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表5。依次對(duì)12份空白溶液進(jìn)行測(cè)定，以其測(cè)定值標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍對(duì)應(yīng)樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)算方法的檢出限，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 線性參數(shù)與檢出限Tab．5 Linearity para meters and detection li mits

2．6 精密度及回收試驗(yàn)

按試驗(yàn)方法測(cè)定樣品 GBW 07413a、GBW 07414a和GBW 07459中的有效磷和有效硫，并在3個(gè)樣品中分別加入20．0 mg·kg－1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法進(jìn)行前處理后測(cè)定，每個(gè)加標(biāo)樣品平行測(cè)定12次，計(jì)算回收率和測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 精密度和回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝12）Tab．6 Results of tests for precision and recovery（n＝12）

由表6可知：有效磷和有效硫的加標(biāo)回收率在 95．2%～107%之間，RSD在2．0%～3．6%之間，滿足技術(shù)規(guī)范 DD2005-03［18］要求。

2．7 樣品分析

應(yīng)用本方法對(duì)實(shí)際石灰性土壤樣品中有效磷和有效硫進(jìn)行測(cè)定，與林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 兩種方法測(cè)定結(jié)果的比較Tab．7 Co mparison of deter mination results by t wo methods mg·kg－1

由表7可知：對(duì)于有效磷，兩種方法測(cè)定值相差不大；對(duì)于有效硫，本法比標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定值高，進(jìn)一步說(shuō)明BaSO4比濁法測(cè)定結(jié)果比ICP-AES的低。

本工作采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法同時(shí)測(cè)定石灰性土壤中的有效磷和有效硫，對(duì)試驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化，最終確定了水土比為10∶1，振蕩時(shí)間為30 min，浸提溫度為20～25℃，濾液用1．0 mol·L－1HCl溶液稀釋，用ICP-AES直接測(cè)定樣品溶液中有效磷和有效硫，具有簡(jiǎn)便高效、檢出限低、準(zhǔn)確度高和精密度高等優(yōu)點(diǎn)，解決了以往方法中操作過(guò)程復(fù)雜、顏色干擾和結(jié)果不穩(wěn)定等問(wèn)題，提高了分析質(zhì)量和效率，為農(nóng)業(yè)施肥和環(huán)境保護(hù)提供重要依據(jù)，適用于大批量樣品的分析。

［1］ 蔣柏藩．石灰性土壤無(wú)機(jī)磷有效性的研究［J］．土壤，1992，24（2）：61-64．

［2］ 徐成凱，胡正義，章鋼婭，等．石灰性土壤中硫形態(tài)組分及其影響因素［J］．植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2001，7（4）：416-423．

［3］ LY／T 1233－1999 森林土壤有效磷的測(cè)定［S］．

［4］ NY／T 1121．7－2014 土壤檢測(cè) 第7部分：土壤有效磷測(cè)定［S］．

［5］ LY／T 1265－1999 森林土壤有效硫的測(cè)定［S］．

［6］ HJ 704－2014 土壤 有效磷的測(cè)定 碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法［S］．

［7］ NY／T 1121．14－2006 土壤檢測(cè) 第14部分：土壤有效硫測(cè)定［S］．

［8］ 蔣俊平，韓張雄，雒虹，等．氯化鈣浸提-電感耦合等離子體發(fā)射光譜法快速測(cè)定石灰性土壤中的有效硫［J］．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016（6）：500-502．

［9］ 宋春雨，韓俊杰，高崇升．土壤有效磷及其化學(xué)測(cè)試方法研究進(jìn)展［J］．農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學(xué)與綜合研究，2010，26（3）：283-287．

［10］ 龔蘭新，康新平，王海娟．六道灣煤礦塌陷區(qū)土壤中總磷及有效磷的測(cè)定［J］．新疆師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2007，26（2）：89-92．

［11］ 尉慶豐，王益權(quán)，劉俊良，等．陜西省土壤中硫素的含量與分布［J］．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），1989（4）：57-63．

［12］ 李小娜，王金云，程麗婭，等．石灰性土壤中有效磷的電感耦合等離子體發(fā)射光譜法測(cè)定［J］．安徽地質(zhì)，2014（4）：296-299．

［13］ 王萍，王雪蓮，譚小寧，等．電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法測(cè)定土壤中有效硫［J］．四川地質(zhì)學(xué)報(bào)，2009（4）：494-496．

［14］ 張?chǎng)?，陳智文，李筱琳．測(cè)定石灰性土壤有效磷的影響因素分析［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（9）：4717-4719．

［15］ 崔巖山，王慶仁，董藝婷，等．幾種浸提劑對(duì)土壤有效硫測(cè)定的相關(guān)性探討［J］．土壤，2003，35（2）：136-139．

［16］ 馬新民，馬淑英．對(duì)Olsen法測(cè)定磷時(shí)溫度校正的改正［J］．土壤通報(bào)，1981，12（6）：34-37．

［17］ 劉婷琳，馬名揚(yáng)，張浩原，等．弱堿性土有效硫測(cè)定方法的改進(jìn)［J］．理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè)，2010，46（7）：841-842．

［18］ DD 2005-03 生態(tài)地球化學(xué)評(píng)價(jià)樣品分析技術(shù)要求（試行）［S］．