蔡愛華 李啟平 李偉華 陳麗娟 吉林省醫(yī)療器械檢驗(yàn)所 （吉林 長春 130062）

內(nèi)容提要： 目的：開展髓過氧化酶試劑（MPO）檢測(cè)前對(duì)MPO試劑盒在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法：終點(diǎn)法（向上），主波長600nm，反應(yīng)溫度37?C，比色杯光經(jīng)1cm，R1180μL，R260μL，樣本量8μL，反應(yīng)時(shí)間10min，進(jìn)行精密度、正確度、線性范圍和抗干擾能力的驗(yàn)證。結(jié)果：MPO的高值濃度樣本和低值濃度樣本的批內(nèi)精密度分別為CV高=0.8%，CV低=3.0%，高值濃度樣本的批間精密度為R=0.9%；MPO正確度偏倚為3.05%；在MPO范圍為25～1300ng/mL，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9999；抗干擾能力試驗(yàn)偏差小于10%。結(jié)論：MPO檢測(cè)試劑盒在日立7180型全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能符合要求。

全自動(dòng)生化分析儀具有檢驗(yàn)迅速、靈敏度高、試劑用量少等優(yōu)點(diǎn)，使得臨床檢驗(yàn)效率得到較大提升，現(xiàn)已成為醫(yī)院和檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)不可或缺的生化檢驗(yàn)設(shè)備，因此全自動(dòng)生化分析儀檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性尤為重要。為保證其檢驗(yàn)質(zhì)量，根據(jù)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》的要求，本文對(duì)免疫比濁法MPO試劑在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能進(jìn)行驗(yàn)證[1-3]。采用髓過氧化酶試劑盒和日立7180全自動(dòng)生化分析儀組成檢測(cè)系統(tǒng)用于臨床檢驗(yàn)，對(duì)其準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、抗干擾能力等進(jìn)行研究驗(yàn)證。

1.儀器與試劑

1.1 儀器

日立7180全自動(dòng)生化分析儀，Milli-Q超純水機(jī)。

1.2 試劑

實(shí)驗(yàn)所需試劑材料由廠家A提供。

髓過氧化酶測(cè)定試劑盒（膠乳免疫比濁法）（Lot：20171020），高、低值質(zhì)控品（Lot：20171020）；準(zhǔn)確度比對(duì)試劑盒由廠家B提供：髓過氧化物（MPO）測(cè)定試劑盒（膠乳免疫比濁法）（Lot：71103B12）。

2.方法與結(jié)果

2.1 檢驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)條件：終點(diǎn)法（向上），主波長600nm，反應(yīng)溫度37?C，比色杯光經(jīng)1cm，R1180μL，R260μL，樣本量8μL，反應(yīng)時(shí)間10min。

校準(zhǔn)程序采用廠家A試劑盒配套校準(zhǔn)品多點(diǎn)校準(zhǔn)，采用非線性法校準(zhǔn)處理。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所有數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel 2007進(jìn)行處理。

2.2 精密度試驗(yàn)

在所內(nèi)質(zhì)控的前提，保證重復(fù)性條件下，以廠家提供的高值和低值質(zhì)控品為樣本，重復(fù)測(cè)試試劑盒20次，由此計(jì)算出試劑盒的批內(nèi)精密度，以高值質(zhì)控品為樣本，分別測(cè)定3個(gè)不同批號(hào)試劑盒，每個(gè)批號(hào)測(cè)試3次，分別計(jì)算3批試劑之間的批間相對(duì)極差，即為批間精密度。批內(nèi)精密度的標(biāo)準(zhǔn)要求為CV≤10.0%。批間精密度標(biāo)準(zhǔn)要求：相對(duì)極差R≤10.0%。結(jié)果為CV高=0.8%，CV低=3.0%，R=0.9%，小于廠商規(guī)定的要求，符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 正確度試驗(yàn)

以試劑盒配套的質(zhì)控品為試驗(yàn)樣本，連續(xù)測(cè)量20次，計(jì)算測(cè)量值的平均值，由此計(jì)算得均值與質(zhì)控靶值的偏倚。正確度要求：偏倚≤20%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均值為432.8ng/mL，質(zhì)控靶值為420ng/mL，偏倚為3.05%，小于允許偏倚范圍20%，符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.4 線性范圍試驗(yàn)

用純化水將廠家提供的線性樣本按照不同比例稀釋成合適的濃度，范圍為25～1300ng/mL，將結(jié)果平均值采用線性回歸與相關(guān)分析，得出相關(guān)線性方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r。廠家線性范圍標(biāo)準(zhǔn)要求為線性相關(guān)系數(shù)r≥0.990。在MPO范圍為25～1300ng/mL，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9999，符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.5 抗干擾能力試驗(yàn)

參考NCCLS EP-72A文件要求進(jìn)行抗干擾驗(yàn)證試驗(yàn)，將血清要求與干擾物充分混勻，分別測(cè)量3次，計(jì)算平均值，并與預(yù)期值進(jìn)行比對(duì)。比對(duì)結(jié)果顯示加入干擾物（抗壞血酸：10mmol/L，TBil：40mg/dL，血紅素：200mg/dL，TG：200mg/dL，類風(fēng)濕因子:75IU/mL）的樣本與沒有加入干擾物的樣本結(jié)果偏差＜10%，符合標(biāo)準(zhǔn)要求，滿足臨床需求。

3.討論

醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和進(jìn)步，臨床檢驗(yàn)工作已進(jìn)入自動(dòng)化新時(shí)代。全自動(dòng)化生化分析儀具有高準(zhǔn)確性、高精密度、高效率和靈活性強(qiáng)等特點(diǎn)，在現(xiàn)代檢驗(yàn)工作中承擔(dān)大部分的生化分析工作，在各醫(yī)院和各檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的應(yīng)用已廣泛普及，大大提高了生化檢驗(yàn)的速度，成為實(shí)驗(yàn)室必備的檢驗(yàn)儀器[4,5]。再者，檢測(cè)試劑盒技術(shù)不斷提高，新品種層出不窮，顯著提高了檢驗(yàn)效率與檢驗(yàn)質(zhì)量。按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法和國家醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)的具體要求，新的儀器或方法在應(yīng)用前都需要進(jìn)行系統(tǒng)適用性驗(yàn)證，檢驗(yàn)試劑、方法和設(shè)備是否符合相關(guān)檢驗(yàn)要求[5,6]。因此本所對(duì)髓過氧化酶的檢驗(yàn)試劑盒采用本所日立7180全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。

綜上所述，本所采用日立7180全自動(dòng)生化分析儀對(duì)廠家A所生產(chǎn)的髓過氧化酶測(cè)定試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍和抗干擾試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證分析，所得結(jié)果均符合各項(xiàng)要求標(biāo)準(zhǔn)。該試劑盒檢測(cè)方法為免疫比濁法，與日立7180型全自動(dòng)生化分析儀組成的檢測(cè)系統(tǒng)，上述驗(yàn)證指標(biāo)均符合使用的要求。