李秀蘭，魏東旭，鄭瑩瑩，杜林娜

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林 長春 130118)

蟲生真菌因其富含天然生物活性化合物，早在遙遠的古代就作為止咳等藥物而得到大量應(yīng)用，被認為是一種重要的微生物類群[1-2]。細腳擬青霉[Paecilomycestenuipes(Peck) Samson]，亦稱高雄山蟲草，是以蠶幼蟲為宿主的重要蟲生藥用真菌[3-4]。在東北亞國家(中國、日本和韓國)該菌已作為保健食品原料和傳統(tǒng)藥物而得到了廣泛應(yīng)用。細腳擬青霉內(nèi)含蟲草素、腺苷、多糖、氨基酸及其他多種次級代謝產(chǎn)物，營養(yǎng)價值高。已有文獻報道表明，細腳擬青霉在哮喘、腫瘤、過敏性疾病、癌癥及結(jié)核病等病的治療中都具有較好的效果，已成為蟲生真菌的研究熱點[5-9]。近年來，國內(nèi)外對細腳擬青霉的藥理及毒理學(xué)進行了大量的實驗研究，現(xiàn)綜述如下。

1 細腳擬青霉的藥理作用

1.1 降血糖

糖尿病是威脅人類健康的第三大殺手，尋找高效降血糖物質(zhì)具有重要的意義[10]。近年的研究報道表明，細腳擬青霉具有降血糖及預(yù)防糖尿病并發(fā)癥的作用。細腳擬青霉子實體甲醇提取物中含有一種名為4-β-acetoxyscirpendiol的化合物，該化合物可起到降低血糖的作用[11]。LIU[12]等利用鏈脲佐菌素聯(lián)合高脂誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型研究細腳擬青霉N45水提物的降血糖活性。結(jié)果顯示，連續(xù)給藥4周可顯著降低大鼠血糖水平，改善口服糖耐量。此外，該提取物還可降低血清總膽固醇和三酰甘油含量，平衡低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平。通過檢測肌酸酐、尿素氮、白細胞介素2(Interleukin-2,IL-2)、IL-6和核因子κB的水平，證明該提取物可以防止糖尿病腎病發(fā)生。與此同時，DU等[13]也同樣證明了細腳擬青霉N45的水提物和醇提物的降血糖作用，其提取物可提高肝糖原和血清胰島素含量。同時，通過檢測血清和肝臟中丙二醛的水平和超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活性，證明細腳擬青霉N45可有效地緩解四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病小鼠的氧化狀態(tài)，說明有助于防止與氧化壓力相關(guān)的糖尿病并發(fā)癥。作者推測高產(chǎn)菌株N45降血糖活性的部分機制，是刺激胰島素分泌或者抑制胰島素降解，促進肝糖原的合成和防止胰島細胞的氧化損傷。

1.2 抗抑郁

隨著社會競爭的日趨加劇，生活壓力的逐步增加，抑郁癥已成為影響大約世界人口21%的一種復(fù)發(fā)率高、嚴重威脅人類身心健康的精神疾患[14-15]?？朔钟舭Y患者人數(shù)的增加與藥物治療帶來的負效應(yīng)之間存在極大的矛盾，對于醫(yī)藥行業(yè)來說仍然是一個巨大的挑戰(zhàn)。近年來，許多研究者正在積極地研究天然產(chǎn)物的抗抑郁作用。細腳擬青霉的抗抑郁樣活性及其可能的作用機制是該菌近年來的一個重點研究內(nèi)容。LIU[16]等采用慢性應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠抑郁模型考察細腳擬青霉N45水提物的抗抑郁作用，結(jié)果顯示，該提取物可顯著提高大鼠強迫游泳實驗和熱板實驗的不動時間，改善慢性應(yīng)激抑郁大鼠血清和下丘腦中神經(jīng)遞質(zhì)和性激素的水平，推測該提取物的抗抑郁作用可能是通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)而起作用。YIN[17]等對細腳擬青霉提取物進行了抗抑郁活性考察，同時，為了明確其作用機制，作者又分析了樣本對重要神經(jīng)內(nèi)分泌軸——下丘腦-垂體-腎上腺素軸的影響。結(jié)果顯示，其提取物在慢性不可預(yù)見應(yīng)激大鼠抑郁模型中展現(xiàn)了良好的抗抑郁樣活性，其可以提升抑郁大鼠的蔗糖消耗量，降低血清皮質(zhì)甾醇和促腎上腺皮質(zhì)激素的水平和腦垂體中精氨酸加壓素的含量。細腳擬青霉提取物還可降低血清促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素mRNA的表達，而提高海馬組織鹽皮質(zhì)激素受體和糖皮質(zhì)激素受體mRNA的表達，同時兩種激素之比也有所下降，因而推測細腳擬青霉提取物的抗抑郁活性可能與其調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺素軸有關(guān)。

1.3 抗腫瘤

有關(guān)細腳擬青霉的抗腫瘤活性物質(zhì)篩選及其作用機制是近年來的研究熱點。研究報道表明，細腳擬青霉菌絲體中的acetoxyscirpendiol化合物的抗腫瘤活性是臨床抗癌藥物順鉑的4.0～6.6倍[6]。體外實驗表明，該化合物可引起人類急性T淋巴細胞白血病細胞、人白血病單核細胞和人T淋巴細胞白血病細胞凋亡，而其對這些細胞系的抗增殖作用與其可以誘導(dǎo)細胞凋亡有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，該化合物可以阻止細胞周期中G1至S期的轉(zhuǎn)換[18]。此外，CHUNG等分別采用細腳擬青霉提取物和acetoxyscirpendiol化合物處理MCF-1、Hela、HepG2和Hek293細胞系，以分析細胞周期相關(guān)基因CyclinC和Mad-1及蛋白表達水平。結(jié)果顯示，細腳擬青霉甲醇提取物中抗腫瘤物質(zhì)是acetoxyscirpendiol,其可通過調(diào)控細胞周期相關(guān)基因(如CyclinC和Mad-1基因)的表達而發(fā)揮作用。除了該化合物外，細腳擬青霉多糖也具有抗腫瘤活性[19]。金麗琴等從細腳擬青霉中分離得到多糖細腳擬青霉多糖1，并在體外實驗證明該多糖可通過調(diào)節(jié)免疫活性而發(fā)揮抗腫瘤效果[20-21]。

1.4 抑菌功能

研究報道表明，細腳擬青霉除了具有上述藥理活性外還具有一定的抑菌功能，其可抑制金黃色葡萄球菌、結(jié)核分支桿菌和白色念珠菌的增殖。NILANONTA等從細腳擬青霉BCC1614中分離得到抗結(jié)核分枝桿菌的環(huán)縮肽[22]。桂琳等通過優(yōu)化細腳擬青霉培養(yǎng)條件，使得細腳擬青霉抑制金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑可達23.5 mm[23]。萬水霞等證明細腳擬青霉RCEF0969具有一定的抑制真菌白色念珠菌的活性[24]。

1.5 免疫調(diào)節(jié)功能

近年來，關(guān)于細腳擬青霉免疫調(diào)節(jié)活性的報道逐漸增多。金麗琴等采用環(huán)磷酰胺復(fù)制大、小鼠免疫抑制模型，考察細腳擬青霉對機體的免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，細腳擬青霉粗體物對正常大鼠和環(huán)磷酰胺處理的大鼠均具有提升白細胞數(shù)作用，并有緩解環(huán)磷酰胺所致免疫抑制大、小鼠的免疫器官萎縮的作用[25]。實驗表明，100和10 mg/L細腳擬青霉提取物可刺激經(jīng)5 mg/L的伴刀豆球蛋白刺激的peyer patch細胞產(chǎn)生Th1細胞因子、IL-2、IL-10和γ干擾素、粒細胞巨噬細胞刺激因子。此外，作者試圖對細腳擬青霉提取物中具有免疫調(diào)節(jié)作用的組分進行分離，結(jié)果發(fā)現(xiàn)富含蛋白聚糖的組分表現(xiàn)出強烈的增強免疫活性，而這一組分主要由多糖(約91%)和蛋白質(zhì)(約7%)組成。細腳擬青霉還能夠激活巨噬細胞、人血單核細胞，增強新陳代謝，促進人外周血單個核細胞的增殖和腫瘤壞死因子-α的表達，其免疫調(diào)節(jié)活性物質(zhì)可能為多糖[26-31]。

此外，細腳擬青霉還具有抗氧化、耐缺氧、防止肝細胞的損傷的作用[32-34]。

2 細腳擬青霉的毒性作用

有關(guān)細腳擬青霉的毒理學(xué)研究，相關(guān)的文獻報道較少。尹艷艷等采用小鼠最大耐受量法，觀察細腳擬青霉提取物的急性毒性，結(jié)果提示其小鼠的最大耐受量為9 g/kg[35]。DU等采用動物實驗考察了細腳擬青霉N45菌絲體醇提物和水提物的急性毒性和長期毒性。實驗結(jié)果表明，在兩實驗中均未見死亡現(xiàn)象。小鼠經(jīng)口急性毒性實驗證實，其最大給藥量為15 g/kg。在長期毒性實驗中，每天給予醇提物和水提物沒有顯著改變大鼠體重、臟器系數(shù)和血液學(xué)參數(shù)。生化分析表明10.5和1.05 g/kg的醇提物和水提物影響血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、血清鉀和尿素氮的水平，但肝臟和腎臟組織病理切片分析未見形態(tài)學(xué)改變。長期大劑量服用細腳擬青霉提取物可能輕微損害大鼠的肝臟和腎臟[36]。CHE等也研究了細腳擬青霉的急性毒性、遺傳毒性和長期毒性。細腳擬青霉菌絲體急性口服半數(shù)致死量超過2 g/kg。在亞慢性毒性實驗中。連續(xù)給予0.5、1或2 g/kg的細腳擬青霉提取物并沒有產(chǎn)生任何劑量相關(guān)的變化。相反，病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，該菌提取物可損傷腎臟。此外，在埃姆斯實驗結(jié)果提示，細腳擬青霉提取物具有致突變性。結(jié)果提示口服0.5 g/kg的細腳擬青霉提取物可能導(dǎo)致腎臟異常[5]?？梢?，長期給予細腳擬青霉提取物可損傷腎臟和肝臟。那么如何在有效劑量下分離其毒性物質(zhì)、降低毒性反應(yīng)仍需要大量的實驗研究，以為其臨床安全用藥提供實驗依據(jù)。

3 展 望

綜上所述，細腳擬青霉具有廣泛的藥理活性，具有較高的藥用價值。然而，對于細腳擬青霉的研究仍處于初級階段。如何運用現(xiàn)代先進技術(shù)和方法分離得到其活性組分，全面揭示其藥理活性的作用機制，降低其毒性反應(yīng)等仍尚待深入研究解決，以期為細腳擬青霉的深入開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

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