高效液相色譜測(cè)定甘草酸的研究進(jìn)展

田建軍 張彥波 夏立君 張明明

【摘 要】概述了近年來(lái)應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定甘草不同制劑類型甘草酸的研究進(jìn)展。重點(diǎn)介紹了膠囊劑、粉劑、注射劑、沖劑、片劑甘草酸的研究進(jìn)展。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；甘草；制劑；甘草酸

【中圖分類號(hào)】R917 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1005-0019（2018）22--01

1 前言

中藥甘草性甘，進(jìn)入肝臟，脾臟，肺經(jīng)脈，補(bǔ)脾益氣，清熱和解毒，祛痰和咳嗽，緩解疼痛，緩解壓力，調(diào)和各種藥物。有助于脾胃虛弱，疲勞，心悸，氣短，呼吸短促，咳嗽和痰，腹部和四肢癱瘓的疼痛，發(fā)紅，痛苦的中毒，減少藥物的毒性和強(qiáng)度[1]。甘草具有廣泛的功能，包括抗炎劑、抗過(guò)敏劑、抗驚厥劑、抗病毒、抗癌、鎮(zhèn)痛藥、利尿劑等。

現(xiàn)代研究表明甘草酸是甘草中最重要的活性成分之一。甘草酸廣泛用于治療急性、慢性肝炎、支氣管炎和艾滋病，因?yàn)槠渚哂刑瞧べ|(zhì)激素的藥理作用，并且沒(méi)有嚴(yán)重的副反應(yīng)。它有防癌、抗癌，干擾素誘生劑和細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能[2]。測(cè)定甘草酸的方法包括比色法、氣相色譜法、薄層色譜法和高效液相色譜法[3-6]。高效液相色譜法，由于其簡(jiǎn)單的操作，高靈敏度，快速的分析速度以及良好的可再生性而被廣泛使用。

2 膠囊劑

李冬梅等[7]人決定用hplc法測(cè)定甘草酸的含量，Shugan膠囊通過(guò)高效液相色譜法。色譜柱為Hypersil C18柱（250mm×4.6mm，5um），以甲醇-水-冰醋酸（63：37：1）為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，測(cè)波長(zhǎng)為254nm，色譜柱上的理論柱的數(shù)量不少于2000的甘草酸，而甘草提取物的成分在這種情況下是完全分開(kāi)的，甘草酸的分離度大于1.5，結(jié)果表明，甘草酸之間有良好的線性關(guān)系和峰面積積分，質(zhì)量濃度在10-100ug/ml的濃度范圍。甘草酸回收率為101.0%，RSD回收率為1.4%；王志平等[8]用采用HPLC法測(cè)定復(fù)方甘草酸膠囊中的甘草酸苷含量。采用Vercopak（ODS-3：4.6mm×150mm，5μm）色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-0.01mol/L-H3PO4水溶液（38：62），柱溫30℃，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)249nm。測(cè)定出甘草酸苷39.8～199μg/ml的范圍呈良好線性，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9996，平均加樣回收率為98.99%，RSD為0.98%；張軼華[9]采用高效液相色譜法測(cè)定甘草酸二銨膠囊。色譜柱為Agilent Extend-C18柱，流動(dòng)相為乙腈-0.01mol·L-1磷酸溶液（38∶62），檢測(cè)波長(zhǎng)為252nm，柱溫為35℃，流速為1.0mL·min-1，進(jìn)樣量為20μL結(jié)果：甘草酸二銨檢測(cè)濃度在12.5～1250?g·mL-1范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系；平均回收率為100.1%，RSD=0.3%。

3 粉劑

尹麗平[10]應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定甘草酸粉中甘草酸的含量。色譜柱：內(nèi)徑4～6mm，長(zhǎng)15～25cm的不銹鋼管。填充劑為液相色譜用硬脂酸硅膠5～10um，流動(dòng)相：稀乙醇（1～15）/乙腈混合液（3：2）；結(jié)果甘草酸在20.72～124.32μg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，r= 0.9999（n= 5），平均回收率為97.08%。

4 注射劑

劉海靜等[11]用HPLC法測(cè)定強(qiáng)力寧注射液中甘草酸單銨的含量。采用C18反相柱，檢測(cè)波長(zhǎng)258nm，流動(dòng)相為乙腈-0.01mol/L醋酸銨（3∶ 7）；平均回收率99.63%（RSD為1.07%）；甘草酸單銨在40～200μg/ml濃度范圍呈良好的線性關(guān)系。

5 沖劑

宋洪杰等[12]應(yīng)用HPLC法測(cè)定胃脘舒沖劑中甘草酸的含量。色譜柱為Shim-packCLC-ODS（6.0mm×150mm，5um），以甲醇-水–36%冰醋酸（65：28：7）為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，測(cè)波長(zhǎng)為254nm，甘草提取物各成分在此條件下得到很好地分離，結(jié)果是甘草酸在質(zhì)量濃度18-300ug/ml范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系，加樣回收率98.35±3.34%，RSD為3.39%。日內(nèi)變異1.63%，日間變異3.35%；許楊彪等[13]測(cè)定了健胃茶中甘草酸含量，色譜柱為Inertsil ODS-3柱，流動(dòng)相為甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸（67：33：1），測(cè)波長(zhǎng)為250nm，以流動(dòng)相超聲提取30min，流速為1.0ml/min，結(jié)果甘草酸進(jìn)樣量在0.784-4.70ug范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率為99.1%（RSD=1.26%）。

6 片劑

邰順章等[14]通過(guò)HPLC法測(cè)定復(fù)方桔梗止咳片中甘草酸及甘草苷的含量。采用Agilent C18（4.6mm×150mm，5μm）色譜柱；以乙腈-0.05%磷酸為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；流速1.0mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)237nm；進(jìn)樣量：10μL；柱溫30℃。結(jié)果：甘草苷、甘草酸分別在10.65～42.60mg·L-1、97.30～389.30mg·L-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r分別為1.0000、1.0000；平均回收率（n=6）分別為98.80%（RSD=0.73%）、99.84%（RSD=0.10%）。測(cè)得6批復(fù)方桔梗止咳片，每片分別含甘草苷135.28μg、123.16μg、113.21μg、136.08μg、160.84μg、156.32μg，甘草酸441.36μg、405.86μg、364.69μg、446.93μg、518.22μg、509.65μg。

7 結(jié)語(yǔ)

應(yīng)用HPLC法測(cè)定甘草制劑的類型多樣化，其測(cè)定方法雖有差異，但甘草酸含量的測(cè)定結(jié)果都具有一定研究?jī)r(jià)值，對(duì)于藥物質(zhì)檢或研制方面具有指導(dǎo)意義。另有實(shí)驗(yàn)表明，例如長(zhǎng)期服用大劑量的藥物，可能會(huì)導(dǎo)致類醛固酮樣的副作用，主要是由高血壓，低鉀血癥和水，鈉潴留和其他癥狀引起的。這種機(jī)制被認(rèn)為與這種藥物結(jié)構(gòu)中的皮質(zhì)類固醇的結(jié)構(gòu)有關(guān)。因此如何有效利用甘草酸來(lái)減少副作用的發(fā)生是一個(gè)值得探討和研究的課題。簡(jiǎn)而言之甘草酸的藥理學(xué)機(jī)制是多方面的，它的應(yīng)用已經(jīng)擴(kuò)展到諸如抗肝炎病毒，抗艾滋病，抗癌，防癌，以及免疫增強(qiáng)的領(lǐng)域。

參考文獻(xiàn)

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