PFOS致大鼠肝毒性及其作用機(jī)制研究

張宵月，肖靜，徐苗苗，彭美娟，朱曉凡，高尚，張?zhí)夷?/p>

南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 職業(yè)衛(wèi)生與環(huán)境毒理學(xué)教研室，南通 226019

全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate, PFOS)是全氟化合物的代表性化合物，具有良好的熱及化學(xué)穩(wěn)定性，自面世以來(lái)，被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)生活的諸多方面，如紡織、涂料、皮革、包裝等[1-2]。但同時(shí)以上穩(wěn)定的性質(zhì)也使PFOS進(jìn)入環(huán)境后難以降解，并且能隨環(huán)境介質(zhì)的變化產(chǎn)生遷移和蓄積[3]。人或其他生物體則可通過(guò)呼吸、飲食等因素間接或直接接觸到PFOS，研究發(fā)現(xiàn)PFOS在生物體中能長(zhǎng)期停留，并發(fā)揮毒性效應(yīng)[4]。目前已發(fā)現(xiàn)PFOS具有神經(jīng)、生殖發(fā)育、免疫等多重器官毒性，其中又以肝臟毒性最為常見(jiàn)[2,5-6]。作為主要的蓄積和效應(yīng)器官，PFOS可引起肝細(xì)胞空泡出現(xiàn)，誘發(fā)肝腫大和肝細(xì)胞凋亡，同時(shí)導(dǎo)致肝糖脂代謝紊亂。有研究者提出這種干擾效果與PFOS對(duì)組成型雄甾烷受體(constitutive androstane receptor, CAR)、孕烷X受體(pregnane X receptor, PXR)及肝X受體(liver X receptor, LXR)等核受體的過(guò)度激活有關(guān)[7-8]。但也有實(shí)驗(yàn)證實(shí)，部分基因敲除動(dòng)物和轉(zhuǎn)染細(xì)胞中以上PFOS的誘導(dǎo)損害作用并未消失，進(jìn)一步研究也表明PFOS對(duì)以上核受體的活化作用在不同種屬動(dòng)物及臟器間具有差異，因此有研究提出PFOS可能存在其他的調(diào)控方式[9-10]。

氧化應(yīng)激已被證實(shí)與化學(xué)性肝損傷、病毒性肝炎、肝纖維化及肝癌等多種肝臟病變有關(guān)。近年來(lái)，有研究表明PFOS可以通過(guò)氧化應(yīng)激影響肝的脂肪代謝[11]，有學(xué)者認(rèn)為這可能是由于PFOS激活了細(xì)胞的抗氧化機(jī)制，從而激活了調(diào)控脂肪生成的相關(guān)基因，最終導(dǎo)致肝脂肪累積[12]，但是具體的機(jī)制還不確定。核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2(Nuclear factor E 2 related factor 2, Nrf2)作為細(xì)胞內(nèi)一個(gè)重要的抗氧化信號(hào)分子，在保護(hù)細(xì)胞組織，對(duì)抗氧化損傷中有重要的作用。目前研究發(fā)現(xiàn)Nrf2在調(diào)節(jié)脂肪代謝過(guò)程中也扮演著重要的作用。Kitteringham等[13]研究發(fā)現(xiàn)Nrf2敲除的成年小鼠肝臟內(nèi)的脂質(zhì)含量相對(duì)于野生型小鼠會(huì)有所降低。最近，也有研究報(bào)道了PFOS與Nrf2的關(guān)系。Shi等[14]在研究中發(fā)現(xiàn)，斑馬魚(yú)胚胎可以通過(guò)激活Nrf2來(lái)對(duì)抗PFOS引起的氧化應(yīng)激。Xu等[15]發(fā)現(xiàn)PFOS可以通過(guò)Nrf2信號(hào)通路促進(jìn)脂肪前體細(xì)胞的增殖分化。鑒于以上原因，我們擬通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)考察PFOS對(duì)大鼠肝臟毒效應(yīng)表現(xiàn)及對(duì)氧化應(yīng)激相關(guān)分子的影響，借此探討PFOS肝毒性反應(yīng)的潛在機(jī)制與可能途徑，為PFOS生態(tài)毒理學(xué)研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法(Materials and methods)

1.1 試劑與儀器

試劑：全氟辛烷磺酸(Assay LC-MS 98%，Sigma-Aldrich公司，美國(guó))；RT-PCR試劑及引物(TaKaRa大連寶生物公司，中國(guó))；丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑盒、堿性磷酸酶試劑盒(Applied Biosystems公司，美國(guó))；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)試劑盒(碧云天生物研究所，中國(guó))；甘油三酯(triglyceride, TG)、總膽固醇(total cholesterol, TC) (南京建成生物工程研究所)；二喹呆甲酸(BCA)蛋白定量試劑盒(北京博邁德科技發(fā)展有限公司)；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

儀器：5332型PCR儀(Eppendorf公司，德國(guó))、MODEL550酶標(biāo)儀(Bio-Rad公司，美國(guó))、RM2126切片機(jī)(Leica公司，德國(guó))、CK40顯微鏡(Olympus公司，日本)、CFI60數(shù)碼相機(jī)(Nikon，日本)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及染毒

考慮到文獻(xiàn)報(bào)道中PFOS對(duì)雄性大鼠具有較為明顯的毒性效應(yīng)[17]，本次實(shí)驗(yàn)選用成年SD雄性大鼠30只，體重220～250 g，上海西普爾必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供(SCXK滬2008-0016)，實(shí)驗(yàn)室馴養(yǎng)1周后隨機(jī)分為0 mg·kg-1PFOS(對(duì)照組)、5 mg·kg-1PFOS(低劑量組)和10 mg·kg-1PFOS(高劑量組) (n=10)，灌胃染毒28 d。期間每周稱重并于實(shí)驗(yàn)結(jié)束頸椎脫臼處死動(dòng)物，采集血清及肝臟樣本進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。動(dòng)物飼養(yǎng)室溫18～23 ℃，相對(duì)濕度45%～55%。實(shí)驗(yàn)期間自由飲水?dāng)z食。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)1.3.1 臟器系數(shù)

大鼠處死前稱重，處死后用預(yù)冷生理鹽水漂洗肝臟，濾紙吸干稱取肝重計(jì)算臟器系數(shù)：臟器系數(shù)(%)=臟器重量(g)/大鼠體重(g)×100%。

1.3.2 肝臟病理觀察

暴露結(jié)束后處死大鼠并取肝臟組織，制作冰凍切片進(jìn)行油紅染色，同時(shí)取肝組織用10%中性福爾馬林溶液固定，常規(guī)脫水后石蠟包埋制備4 μm切片，HE染色后顯微鏡觀察其病理學(xué)變化。

1.3.3 肝功能指標(biāo)測(cè)定

大鼠下腔靜脈取血后室溫3 000 r·min-1離心分離血清，ELISA試劑盒檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)水平。

1.3.4 脂代謝和氧化還原水平的測(cè)定

處死大鼠后立即分離肝臟，精確稱取100 mg肝組織，加入無(wú)水乙醇1 mL，制成10%勻漿。BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定上清液蛋白濃度，化學(xué)比色法測(cè)定肝勻漿甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)水平，硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)定丙二醛(MDA)含量，黃嘌呤氧化酶法測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)含量，谷胱甘肽氧化酶活力的測(cè)定方法(DTNB直接法)測(cè)定谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)含量。

1.3.5 基因表達(dá)水平檢測(cè)

大鼠處死后迅速剖腹摘取肝臟，稱取100 mg肝組織，Trizol抽提總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定OD260/OD280比值以檢驗(yàn)純度，兩步法進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)PCR。反應(yīng)體系為10 μg·μL-1cDNA模板2 μL、10 μmol·L-1引物各0.4 μL、2×SYBR 10 μL、ddH2O補(bǔ)充總體積為20 μL。反應(yīng)條件為95 ℃、5 s，退火溫度65 ℃、30 s，72 ℃ 、30 s，反應(yīng)40個(gè)循環(huán)計(jì)算相對(duì)表達(dá)量?；蛞镌O(shè)計(jì)如表1所示。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

表1 基因引物設(shè)計(jì)Table 1 Primer sequences of different gene detected by PCR

表2 全氟辛烷磺酸(PFOS)暴露對(duì)大鼠體重的影響Table 2 Effect of perfluorooctane sulfonate (PFOS) exposure on body weight of male rats n=10)

注：*表示與0 mg·kg-1組相比P<0.05，#表示與5 mg·kg-1組相比P<0.05。

Note: * indicatesP<0.05 compared with 0 mg·kg-1group;#indicatesP<0.05 compared with 5 mg·kg-1group.

圖1 PFOS對(duì)大鼠肝臟組織病理的影響注：A～C為HE染色；D～F為油紅染色。A和D為0 mg·kg-1；B和E為5 mg·kg-1；C和F為10 mg·kg-1。標(biāo)尺=10 μm。Fig. 1 Effect of PFOS on liver tissue morphology of male ratsNote: A-C, HE staining; D-F, Oil red staining; A and D, 0 mg·kg-1; B and E, 5 mg·kg-1; C and F, 10 mg·kg-1. Bar=10 μm.

表3 PFOS暴露對(duì)大鼠肝重和臟器系數(shù)的影響Table 3 Effect of PFOS exposure on liver weight and organ index of male rats n=10)

注：*表示與0 mg·kg-1組相比P<0.05。

Note: * indicatesP<0.05 compared with 0 mg·kg-1group.

表4 PFOS暴露對(duì)大鼠血清肝代謝酶的影響Table 4 Effect of PFOS on liver metabolic enzyme activity in serum of male rats n=6)

注：AST、ALT和ALP分別表示血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶水平。*表示與0 mg·kg-1組相比P<0.05，#表示與5 mg·kg-1組相比P<0.05。

Note: AST stands for serum aspartate transaminase; ALT stands for serum alanine aminotransferase; ALP stands for serum alkaline phosphatase. * indicatesP<0.05 compared with 0 mg·kg-1group;#indicatesP<0.05 compared with 5 mg·kg-1group.

2 結(jié)果(Results)

2.1 PFOS暴露對(duì)大鼠一般狀況的影響

染毒初期，大鼠活動(dòng)在三組間無(wú)明顯異常，但隨染毒時(shí)間延長(zhǎng)，PFOS組大鼠出現(xiàn)不同程度活動(dòng)減緩、消瘦和毛發(fā)暗淡豎直，2周后個(gè)別大鼠出現(xiàn)腹瀉、脫毛和易怒現(xiàn)象，尤以10 mg·kg-1組大鼠更為典型。

如表2、3所示，實(shí)驗(yàn)第2周時(shí)，5 mg·kg-1暴露組大鼠體重與0 mg·kg-1組相比即出現(xiàn)降低，但差異并不顯著(P>0.05)。從第18天開(kāi)始，10 mg·kg-1暴露組大鼠體重顯著降低，并呈現(xiàn)劑量反應(yīng)關(guān)系(P<0.05)。肝臟系數(shù)在整個(gè)試驗(yàn)期間，差異顯著(P<0.05)。

2.2 PFOS暴露對(duì)大鼠肝組織形態(tài)學(xué)的影響

如圖1所示，大鼠大體解剖可見(jiàn)0 mg·kg-1組大鼠肝臟色澤正常，表面光滑無(wú)結(jié)節(jié)，質(zhì)地柔軟，HE染色顯示肝索排列規(guī)整，細(xì)胞核分布正常，胞質(zhì)均勻。油紅染色少見(jiàn)脂滴沉著。但PFOS暴露組大鼠肝臟質(zhì)地較脆，顏色暗沉，邊緣鈍化且肝表面分布大小不同的黃色斑點(diǎn)。HE染色和油紅染色結(jié)果顯示PFOS組肝細(xì)胞出現(xiàn)不同程度腫脹和核的偏移，鏡下可見(jiàn)細(xì)胞空泡和大小不等的脂滴出現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)紅色深染脂肪滴，10 mg·kg-1組改變最明顯。

2.3 PFOS暴露對(duì)大鼠血清中肝臟代謝酶水平影響

如表4所示，PFOS暴露造成ALT、AST、ALP水平顯著上升(P<0.05)，其中ALT和ALP水平均隨暴露濃度增高顯著上升(P<0.05)，AST水平在PFOS各暴露組中均顯著高于0 mg·kg-1組(P<0.05)，但不同劑量組間差異并不顯著(P>0.05)。

2.4 PFOS暴露對(duì)大鼠勻漿氧化還原能力和脂代謝水平的影響

如表5所示，對(duì)各組大鼠肝細(xì)胞勻漿中氧化還原酶水平的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，5 mg·kg-1PFOS暴露組大鼠肝臟SOD活性相比對(duì)照組顯著增高，但隨著染毒劑量的增高又出現(xiàn)了顯著降低(P<0.05)。與SOD改變不同的是，GSH-Px活性雖然隨著PFOS劑量的增加而出現(xiàn)上升，但僅在10 mg·kg-1有顯著差異，MDA水平改變與GSH-Px趨勢(shì)類似，在暴露組中隨PFOS濃度增加MDA水平也隨之顯著升高(P<0.05)。另外對(duì)肝臟勻漿中脂肪水平的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與0 mg·kg-1組相比，10 mg·kg-1組無(wú)論是TC還是TG水平都出現(xiàn)了顯著增高(P<0.05)，同樣的情況也出現(xiàn)在5 mg·kg-1組，但差異并不顯著(P>0.05)。

圖2 PFOS暴露對(duì)基因表達(dá)水平影響注：*表示與0 mg·kg-1組相比P<0.05，#表示與5 mg·kg-1組相比P<0.05。Fig. 2 Effect of PFOS on expression of related gene n=6)Note: * indicates P<0.05 compared with 0 mg·kg-1 group; # indicates P<0.05 compared with 5 mg·kg-1 group.

2.5 PFOS暴露對(duì)大鼠肝臟相關(guān)基因表達(dá)影響

如圖2所示，對(duì)肝臟中氧化應(yīng)激相關(guān)的調(diào)控相關(guān)因子Nrf2表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PFOS暴露后大鼠肝臟Nrf2水平與0 mg·kg-1組相比分別上調(diào)了約1.8和2.4倍，且隨著暴露劑量增加差異更為顯著，同時(shí)Nrf2信號(hào)相關(guān)基因醌氧化還原酶抗體(Quinone oxidoreductase 1, NQO 1)和血紅素氧合酶1(Hemeoxygenase 1, HO-1)的表達(dá)也在暴露后上調(diào)2倍左右，但不同劑量組未見(jiàn)顯著差異。同時(shí)，脂代謝調(diào)控基因脂肪酸轉(zhuǎn)移酶(Cluster of differentiation 36, CD36)和SREBP1c的表達(dá)也在10 mg·kg-1出現(xiàn)了顯著增高，尤其SREBP1c受PFOS影響更為顯著，表現(xiàn)出明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系。

3 討論(Discussion)

PFOS作為全氟化合物(perfluorocarbons, PFCs)的代表化合物，對(duì)生殖發(fā)育、免疫神經(jīng)等多器官間接或直接的損傷近年來(lái)備受關(guān)注，尤其肝臟作為PFOS的蓄積器官，關(guān)于PFOS所誘導(dǎo)的肝臟損傷常有報(bào)道，但具體機(jī)制尚未完全清楚。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)PFOS暴露后大鼠AST等肝功能酶發(fā)生顯著改變，提示肝細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的損傷，HE和油紅染色病理結(jié)果也顯示PFOS暴露組具有明顯的肝臟形態(tài)異常，這和其他嚙齒類及魚(yú)類等動(dòng)物模型中得到的結(jié)論一致[16-18]。同時(shí)我們還發(fā)現(xiàn)，肝臟中TC和TG的水平出現(xiàn)了顯著的增高，在高劑量組中較為顯著，這和Cui等[16]研究結(jié)果一致，以上現(xiàn)象可能與PFOS對(duì)脂肪代謝途徑中調(diào)控因子的影響有關(guān)。

表5 PFOS暴露對(duì)大鼠肝組織中氧化還原酶和脂代謝的影響Table 5 Effect of PFOS on oxidoreductase and lipid metabolism in rat liver tissue n=6)

注：*表示與0 mg·kg-1組相比P<0.05，#表示與5 mg·kg-1組相比P<0.05。SOD、GSH-Px、MDA、TC、TG表示超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、丙二醛、總膽固醇、甘油三酯。

Note: SOD, GSH-Px, MDA, TC and TG stand for superoxide dismutase, glutathione peroxidase, malondialdehyde, total cholesterol and triglyceride. * indicatesP<0.05 compared with 0 mg·g-1group; # indicatesP<0.05 compared with 5 mg·kg-1group.

本次實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)PFOS暴露能顯著上調(diào)SREBP1cmRNA表達(dá)。這與Lv等[17]在宮內(nèi)暴露子鼠肝臟中發(fā)現(xiàn)的結(jié)果一致。SREBP是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)質(zhì)膜上一種膜連接蛋白，具有3種亞型，其中SREBP 1c證明在脂肪合成調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，能影響下游乙酰輔酶A羧化酶1(Acetyl-CoA carboxylase1, ACC1)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase, FAS)、硬脂酰輔酶A去飽和酶1(Stearyl-CoA desaturase 1, SCD1)等重要脂代謝酶的表達(dá)，改變細(xì)胞炎癥趨化因子配體2(Inflammatory chemokine 2, CCL2)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(Fibrolast growth factor-21, FGF21)水平，誘導(dǎo)肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶(Carnitine palmitoyltransferase 1 A, CPT1A)的表達(dá)改變，并能通過(guò)與膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白(Sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein, SCAP)的作用調(diào)控低密度脂蛋白受體(Low-density lipoprotein receptor, LDLR)及載脂蛋白E(Apolipoprotein E, ApoE)等脂轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因的表達(dá)，打破脂蛋白受體(Lipoprotein receptor)和HMGCoA還原酶(HMG-CoA reductase)的反饋平衡[19-23]。這可能是造成PFOS組動(dòng)物肝中TG和TC指標(biāo)上升的原因之一。同時(shí)實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)PFOS組抗氧化指標(biāo)和機(jī)體抗氧化基因Nrf2的改變，也可能與這種脂代謝紊亂后機(jī)體被迫加速脂肪β氧化后產(chǎn)生大量活性氧(reactive oxygen species, ROS)有關(guān)。

Nrf2是抗氧化酶表達(dá)過(guò)程中的關(guān)鍵調(diào)控因子，對(duì)平衡體內(nèi)氧化-抗氧化系統(tǒng)，抵抗ROS導(dǎo)致的損害起到關(guān)鍵作用。當(dāng)出現(xiàn)氧化應(yīng)激、親電子物質(zhì)或者化學(xué)物質(zhì)刺激時(shí)，Nrf2可借助胞質(zhì)接頭蛋白(Kelch like ECH associated protein 1, Keapl)的構(gòu)象改變來(lái)完成活化轉(zhuǎn)核，與細(xì)胞核內(nèi)小Maf蛋白結(jié)合形成二聚體，借此啟動(dòng)由抗氧化作用元件(Antioxidant response element, ARE)介導(dǎo)的HO1和NQO1等抗氧化反應(yīng)，參與氧化應(yīng)激狀態(tài)下的細(xì)胞保護(hù)及修復(fù)過(guò)程[24]。有研究表明，Nrf2的表達(dá)可以引起肝臟脂質(zhì)積聚[25]。More等[26]在長(zhǎng)期高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，Keap1敲除小鼠的肝臟中出現(xiàn)較野生型小鼠更加嚴(yán)重的脂質(zhì)沉積。Pi等[27]在嚙齒類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)Nrf2可以轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPAR-γ)和CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(CEBP)以增強(qiáng)脂肪前體細(xì)胞分化，從而導(dǎo)致脂質(zhì)的合成增加。最近也有研究發(fā)現(xiàn)，在雙酚A(BPA)暴露的小鼠肝臟中，Nrf2和SREBP1c共同參與了肝臟脂質(zhì)的沉積，同時(shí)在Nrf2轉(zhuǎn)染和蘿卜硫素(Nrf2激動(dòng)劑)處理肝細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，SREBP1c的表達(dá)會(huì)顯著增加[28]。以往研究中發(fā)現(xiàn)PFOS能夠誘導(dǎo)細(xì)胞氧化應(yīng)激出現(xiàn)，同時(shí)上調(diào)Nrf2及下游基因的表達(dá)。因此，我們推測(cè)PFOS導(dǎo)致的大鼠肝臟脂質(zhì)沉積可能與Nrf2的激活有關(guān)。

同時(shí)也有研究表明，Nrf2入核后通過(guò)與下游反應(yīng)原件的結(jié)合，能夠以不依賴過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR)的方式上調(diào)CD36表達(dá)[29]。本次結(jié)果中也發(fā)現(xiàn)PFOS暴露組CD36受到顯著影響。CD36屬于B類清道夫受體家族，能識(shí)別包括氧化低密度脂蛋白(Low density lipoprotein, LDL)、長(zhǎng)鏈脂肪酸(Long chain fatty acid, LCFA)、非修飾脂蛋白和淀粉樣蛋白等在內(nèi)的內(nèi)源性配體，可由ROS激活其3個(gè)外顯子的轉(zhuǎn)錄活性，參與由代謝過(guò)剩所觸發(fā)的多器官慢性低豐度性炎癥反應(yīng)[30]。CD36可通過(guò)過(guò)氧化物酶MPO-H2O2-NO2系統(tǒng)，與Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR)TLR4和TLR6結(jié)合成異三聚體，進(jìn)入細(xì)胞膜和脂閥后募集形成CD36/Lyn/TLRs多聚體，影響脂質(zhì)的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)[31]。小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CD36表達(dá)改變能影響心肌、骨骼肌、脂肪等多個(gè)組織部位的脂肪儲(chǔ)留，而不同藥物或RNA干擾動(dòng)物中上調(diào)或降低肝臟CD36表達(dá)可造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)脂毒性及脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)能力的改變[32]。同時(shí)CD36能調(diào)控前炎癥相關(guān)信號(hào)通路如核轉(zhuǎn)錄因子-κB(Nuclear factor kappa B, NF-κB)、核轉(zhuǎn)錄抑制因子(Inhibitory factor kappa B, iκB)和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(Extracellular regulated protein kinases 1/2, ERK1/2)的活化，調(diào)節(jié)粘附分子、趨化因子、炎癥因子、一氧化氮合成酶(NOS)等分子表達(dá)改變，激活肝星狀細(xì)胞誘發(fā)自身免疫，導(dǎo)致線粒體解偶聯(lián)蛋白(Uncoupling protein, UCP)及脂肪酸合成酶Fas配體誘導(dǎo)活化，形成“二次打擊”使肝臟損害呈現(xiàn)惡性循環(huán)[33]。

綜上所述，PFOS具有明顯的肝毒性作用，可導(dǎo)致肝臟形態(tài)異常并影響肝脂代謝水平，這可能與PFOS引起的氧化應(yīng)激所導(dǎo)致的損傷有關(guān)。