T-2毒素對(duì)凡納濱對(duì)蝦DNA黏度損傷效應(yīng)

寧守強(qiáng)，王雅玲,*，王小博，邱 妹，孫力軍，郭俊豪，潘曉梅，勵(lì)建榮*

（1.廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東省水產(chǎn)品加工與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東普通高等學(xué)校水產(chǎn)品深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524088；2.渤海大學(xué) 遼寧省食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 錦州 121013）

T-2毒素是單端孢霉烯族毒素之一。該毒素毒性強(qiáng)烈，在自然界中廣泛存在，嚴(yán)重危害人畜健康[1]。T-2毒素的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，有研究報(bào)道T-2毒素常溫放置6～7 年或高溫至200 ℃，毒力仍無減弱[2]。T-2毒素可通過污染動(dòng)植物性食品而進(jìn)入食物鏈，主要危害動(dòng)物的造血組織和免疫器官，引起出血性綜合征，出現(xiàn)白細(xì)胞減少、貧血，使胃腸道功能受損等[3-4]。

目前研究發(fā)現(xiàn)T-2毒素可以通過誘導(dǎo)DNA鏈的斷裂，破壞其完整性，抑制蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而抑制DNA合成[5]。DNA作為大多數(shù)有毒有害小分子的作用靶分子，其分子結(jié)構(gòu)及空間結(jié)構(gòu)能否保持穩(wěn)定和完整，對(duì)機(jī)體細(xì)胞活性和生理功能的正常發(fā)揮具有重要意義[6]。有研究表明多數(shù)小分子毒物可通過與DNA高度結(jié)合影響其空間結(jié)構(gòu)[7]。李瑜等[8]發(fā)現(xiàn)農(nóng)藥西瑪津可以使小牛胸腺DNA紫外光譜發(fā)生減色作用，并且還使得DNA的熔點(diǎn)和黏度增大。但是有關(guān)T-2毒素對(duì)DNA的互作信息鮮有報(bào)道。特別是本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)T-2毒素染毒的對(duì)蝦飼料可以抑制對(duì)蝦生長[9]，導(dǎo)致品質(zhì)劣化[10]，但是有關(guān)T-2毒素對(duì)凡納濱對(duì)蝦DNA黏度損傷效應(yīng)鮮見報(bào)道。

T-2毒素的暴露劑量和DNA質(zhì)量濃度及其二者互作的時(shí)間是揭示T-2對(duì)DNA黏度損傷效應(yīng)的重要參數(shù)?？茖W(xué)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是揭示其作用規(guī)律的前提。響應(yīng)面分析是一種應(yīng)用較為廣泛的試驗(yàn)優(yōu)化方法，通過合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用多元二次回歸方程擬合，能以最為簡單有效的方式對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行全面研究，是解決多因子問題的一種統(tǒng)計(jì)手段，從而確定最佳條件[11]。因此，本研究首先通過響應(yīng)面法分析T-2毒素對(duì)小牛胸腺DNA的最適作用條件，再通過體外T-2毒素與對(duì)蝦DNA作用驗(yàn)證，最后通過喂食對(duì)蝦T-2毒素進(jìn)行蓄積染毒后，進(jìn)而揭示T-2毒素對(duì)對(duì)蝦DNA黏度的影響。為闡明T-2毒素對(duì)對(duì)蝦DNA的危害提供理論參考，并且對(duì)探討T-2毒素的毒理作用具有一定的研究意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鮮活凡納濱對(duì)蝦購自湛江東風(fēng)市場。

海洋動(dòng)物組織基因組DNA提取試劑盒 北京康為世紀(jì)生物科技有限公司；Tris 北京鼎國生物技術(shù)有限責(zé)任公司；氫氧化鈉 西隴化工股份有限公司；T-2毒素（純度≥99%） 美國Enzo公司；所有分離用有機(jī)溶劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

Centrifuge 5417R冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf公司；TU-1901雙光束紫外-可見分光光度計(jì)、烏氏黏度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；GelDoc 2000凝膠成像系統(tǒng)美國Bio-Rad公司；LS-B50L立式壓力蒸汽滅菌器 上海華線醫(yī)用核子儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 單因素試驗(yàn)

取1.3 ng/mL T-2毒素4 μL和60 μg/mL小牛胸腺DNA 30 μL混合，用TE緩沖液定容至3 mL，反應(yīng)時(shí)間為：1、5、10、20、30、40、50 min和60 min，考察反應(yīng)時(shí)間對(duì)DNA黏度的影響；反應(yīng)時(shí)間設(shè)為40 min，小牛胸腺DNA質(zhì)量濃度60 μg/mL，T-2毒素質(zhì)量濃度分別為0.15、0.70、1.30、2.70、3.50 ng/mL，考察T-2毒素質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的影響；反應(yīng)時(shí)間40 min，T-2毒素質(zhì)量濃度為2.70 ng/mL，小牛胸腺DNA質(zhì)量濃度分別為30、40、50、60、70、80 μg/mL，考察DNA質(zhì)量濃度對(duì)黏度的影響。

1.3.2 響應(yīng)曲面試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，選取T-2毒素質(zhì)量濃度（A）、DNA質(zhì)量濃度（B）、反應(yīng)時(shí)間（C）共3 個(gè)因子，以DNA的A260nm為響應(yīng)值，采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法，得到二次回歸方程，并找出最佳的試驗(yàn)條件。

1.3.3 T-2毒素經(jīng)口染毒對(duì)蝦實(shí)驗(yàn)

采用微膠囊毒餌料制備技術(shù)[12]分別配制T-2毒素的含量為12.2、4.8、2.4、1.2 mg/kg和0.5 mg/kg的對(duì)蝦毒餌料；設(shè)置未染毒對(duì)蝦為空白對(duì)照組，對(duì)凡納濱對(duì)蝦進(jìn)行飼喂，周期為20 d。

1.3.4 對(duì)蝦肌肉和肝胰腺DNA提取和檢測

海洋動(dòng)物組織基因組DNA提取試劑盒法提取對(duì)蝦肌肉和肝胰腺的DNA：其中要求無水乙醇在-20 ℃中預(yù)冷后使用，提取后的DNA于-20 ℃中保存。

凝膠電泳法檢測提取的DNA質(zhì)量濃度，采用1%瓊脂糖，凝膠厚度3～5 mm，80 V電泳40 min。

吸光度法測定對(duì)蝦肌肉和肝胰腺的DNA質(zhì)量濃度：取30 μL DNA提取物，用TE緩沖液稀釋10 倍，分別測定其在260 nm和280 nm波長處的吸光度。A260nm/A280nm在1.8～2.0之間說明基本不含蛋白質(zhì)，其純度滿足實(shí)驗(yàn)要求。按下式計(jì)算DNA質(zhì)量濃度。

DNA質(zhì)量濃度/（ng/μL）＝50×A260nm×稀釋倍數(shù)

1.3.5 DNA黏度的測定

根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化的條件，將50 μg/mL對(duì)蝦肝胰腺DNA以及稀釋10 倍的肝胰腺和肌肉原DNA提取液，體外分別與3.50、2.70、1.30、0.70、0.15 ng/mL T-2毒素反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為43 min，烏氏黏度計(jì)法檢測DNA黏度。

第21天分別提取染毒對(duì)蝦肝胰腺的DNA，調(diào)整DNA質(zhì)量濃度50 μg/mL，烏氏黏度計(jì)法檢測DNA黏度。分析對(duì)蝦DNA黏度變化與T-2毒素暴露劑量之間的相關(guān)性。

將烏氏黏度計(jì)置于25 ℃恒溫水浴鍋中，分別測定TE緩沖液、DNA溶液和T-2毒素-DNA混合液流經(jīng)毛細(xì)管達(dá)到熱平衡點(diǎn)所用時(shí)間。以（η/η0）1/3分別對(duì)反應(yīng)時(shí)間、T-2毒素質(zhì)量濃度、DNA質(zhì)量濃度作圖，得到DNA黏度變化趨勢（η為T-2毒素-DNA混合液黏度；η0為溶劑黏度）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05時(shí)認(rèn)為組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 反應(yīng)時(shí)間對(duì)DNA黏度的影響

圖1 反應(yīng)時(shí)間對(duì)DNA黏度的影響Fig.1 Effect of incubation time on the viscosity of DNA

由圖1可以看出，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長DNA黏度增加，反應(yīng)40 min時(shí)，DNA黏度趨于最大值，此后隨時(shí)間延長DNA黏度幾乎無變化。DNA黏度與反應(yīng)時(shí)間成正比，在一定時(shí)間范圍內(nèi)，反應(yīng)時(shí)間越長DNA黏度升高越明顯，最終隨著反應(yīng)的完成，DNA黏度幾乎不再發(fā)生變化，并且隨著反應(yīng)時(shí)間的延長還可能引起DNA分解，因此本實(shí)驗(yàn)選擇反應(yīng)時(shí)間為40 min。

2.1.2 T-2毒素質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的影響

圖2 T-2毒素質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的影響Fig.2 Effect of T-2 toxin concentration on the viscosity of DNA

由圖2可知，當(dāng)DNA質(zhì)量濃度為60 μg/mL時(shí)，DNA黏度隨著T-2質(zhì)量濃度升高明顯增加，在1.30 ng/mL時(shí)，DNA黏度趨近于最大值，此后，隨著T-2毒素質(zhì)量濃度的升高DNA黏度下降。在此反應(yīng)中，當(dāng)T-2毒素為1.30 ng/mL時(shí)，其與DNA反應(yīng)完全，DNA黏度達(dá)到最大值，因此本實(shí)驗(yàn)選擇的T-2毒素質(zhì)量濃度為1.30 ng/mL。

2.1.3 DNA質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的影響

由圖3可知，在0～50 μg/mL范圍內(nèi)隨著DNA質(zhì)量濃度增加黏度升高，在50 μg/mL時(shí)DNA黏度達(dá)到最大值，此后隨著質(zhì)量濃度增加黏度降低。這可能是由于在50 μg/mL時(shí)T-2毒素對(duì)DNA的損傷作用最大，反應(yīng)最完全，而隨著DNA質(zhì)量濃度的增大，T-2毒素完全反應(yīng)，而未受損傷的DNA比例增加，故而造成黏度的下降；因此本實(shí)驗(yàn)選擇的DNA質(zhì)量濃度為50 μg/mL。

圖3 DNA質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的影響Fig.3 Effect of DNA concentration on the viscosity of DNA

2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 二次響應(yīng)面回歸方程的建立與分析

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table1 Experimental design with results for response surface analysis

由表1可知，應(yīng)用Design-Expert軟件進(jìn)行回歸擬合分析，可得到T-2毒素質(zhì)量濃度（A）、DNA質(zhì)量濃度（B）、反應(yīng)時(shí)間（C）與DNA黏度（Y）之間的二次多項(xiàng)式模型為：Y＝1.96+0.069A-0.044B+0.030C+0.038AB+0.045AC+0.040BC-0.12A2-0.15B2-0.14C2。

由表2可知，回歸模型具有高度顯著性（P＜0.000 1），失擬項(xiàng)不顯著（P＝0.654 3＞0.05），R2＝0.981 6，＝0.957 9。說明方程對(duì)實(shí)驗(yàn)擬合較好[13-14]。變異系數(shù)（CV）反映模型的置信度，CV值越低，模型的置信度越高。本實(shí)驗(yàn)CV值為1.71%，說明其置信度較高，模型方程可以較好地反映真實(shí)的實(shí)驗(yàn)值，可用此模型分析相應(yīng)值的變化?；貧w方程各項(xiàng)方差分析表明，因素A、B、A2、B2、C2對(duì)DNA黏度有極顯著影響（P＜0.01），因素C、AB、AC、BC對(duì)DNA黏度有顯著影響（P＜0.05）。

表2 回歸方程系數(shù)顯著性檢驗(yàn)Table2 Significance test of regression equation coefficients

2.2.2 兩因子交互作用分析

通過Design-Expert軟件對(duì)各因素之間的交互作用進(jìn)行響應(yīng)面分析，繪制響應(yīng)面曲線，顯示了T-2毒素質(zhì)量濃度、DNA質(zhì)量濃度、反應(yīng)時(shí)間中任意一個(gè)變量取零水平時(shí)，其余兩個(gè)變量對(duì)DNA黏度的影響。其中等高線為橢圓形表示兩因素交互作用顯著[15]。由圖4可知，T-2毒素質(zhì)量濃度與DNA質(zhì)量濃度、T-2毒素質(zhì)量濃度與反應(yīng)時(shí)間、DNA質(zhì)量濃度與反應(yīng)時(shí)間的交互作用對(duì)DNA黏度均有顯著影響。

圖4A為反應(yīng)時(shí)間40 min時(shí)，T-2毒素質(zhì)量濃度與DNA質(zhì)量濃度對(duì)DNA黏度的交互作用。當(dāng)DNA質(zhì)量濃度一定時(shí)，在T-2毒素低質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨著質(zhì)量濃度增加DNA黏度先增加，當(dāng)T-2毒素質(zhì)量濃度超過一定值時(shí)，DNA黏度隨之開始降低。T-2毒素質(zhì)量濃度一定時(shí)，隨著DNA質(zhì)量濃度的增加，DNA黏度先增大，但當(dāng)DNA質(zhì)量濃度超過一定值時(shí)，DNA黏度呈下降趨勢。圖4B中當(dāng)反應(yīng)時(shí)間一定時(shí)，隨著T-2毒素質(zhì)量濃度增加，DNA黏度升高，當(dāng)T-2毒素質(zhì)量濃度超過一定值時(shí)，DNA黏度隨之降低。圖4C中，當(dāng)反應(yīng)時(shí)間一定時(shí)，隨DNA質(zhì)量濃度的增加，同樣DNA黏度先升高后下降。

圖4 任意兩變量對(duì)DNA黏度影響的響應(yīng)曲面圖Fig.4 Response surface plots showing the interactive effects of variables on DNA viscosity

2.2.3 最佳條件的預(yù)測與驗(yàn)證

通過回歸模型的預(yù)測，得到T-2毒素對(duì)DNA黏度影響最明顯的條件為：T-2毒素質(zhì)量濃度2.70 ng/mL、DNA質(zhì)量濃度50.15 μg/mL、反應(yīng)時(shí)間42.78 min。此時(shí)理論上最高的DNA黏度為1.924 9，結(jié)合實(shí)際調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件為T-2毒素質(zhì)量濃度2.70 ng/mL、DNA質(zhì)量濃度50 μg/mL、反應(yīng)時(shí)間43 min。在此條件下進(jìn)行3 次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，平均DNA黏度為1.850 0，實(shí)際值與預(yù)測值相差0.074 9，證實(shí)了模型的有效性。

2.3 T-2毒素體外作用對(duì)對(duì)蝦DNA黏度的影響

圖5 空白組DNA瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.5 Electrophoresis of DNA in the blank group

從圖5中可以看到條帶明亮，說明提取的肝胰腺DNA和肌肉DNA純度高，肝胰腺DNA的A260nm/A280nm為1.891，肌肉DNA的A260nm/A280nm為1.854，提取的對(duì)蝦肝胰腺DNA質(zhì)量濃度為872 μg/mL，肌肉DNA質(zhì)量濃度為393 μg/mL。對(duì)蝦肝胰腺內(nèi)DNA的提取質(zhì)量濃度遠(yuǎn)大于肌肉的，表明同質(zhì)量肝胰腺組織內(nèi)的DNA質(zhì)量濃度明顯高于肌肉組織。

圖6 體外加入不同質(zhì)量濃度T-2毒素對(duì)對(duì)蝦DNA黏度的影響Fig.6 Effect of T-2 toxin concentration in vitro on viscosity of shrimp DNA

由圖6可知，50 μg/mL肝胰腺DNA的黏度的變化趨勢隨著T-2質(zhì)量濃度的增加而增大，當(dāng)T-2毒素質(zhì)量濃度為2.70 ng/mL時(shí)，DNA黏度達(dá)到最大值，T-2毒素小分子中具有強(qiáng)電負(fù)性的羥基與羰基，會(huì)被DNA兩側(cè)的帶電磷酸基團(tuán)吸附，緊密包圍在核酸表面，這種包裹作用可能增加了T-2毒素上O—H與嘧啶和嘌呤的N原子和O原子的接觸，增加了形成氫鍵的可能[16-17]。堿基對(duì)之間的氫鍵對(duì)維持DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定起主要作用。同時(shí)T-2毒素作為一種脂溶性分子，具有一定的疏水作用[18]，所有氫鍵的形成和疏水作用都對(duì)DNA雙鏈產(chǎn)生拉伸作用，從而使DNA雙鏈的間距增大，引起DNA黏度的增加[19]。同時(shí)外源化合物以嵌插結(jié)合的方式與DNA作用，可以引起DNA相鄰堿基對(duì)之間的距離增大，使雙螺旋延長，從而致使DNA黏度增大[20-22]。這也說明T-2毒素與DNA通過嵌插的方式結(jié)合。此后隨T-2毒素質(zhì)量濃度的增加呈下降趨勢。這可能是因?yàn)殡S著T-2毒素的增加，兩者的作用更加充分，DNA骨架磷酸負(fù)電荷被中和，此時(shí)DNA會(huì)彎曲凝聚而沉淀出來，隨著DNA的凝聚不斷分離，引起DNA黏度的下降[16,23-24]。還可能是由于隨著DNA質(zhì)量濃度的增加，T-2毒素完全反應(yīng)，相對(duì)未反應(yīng)的DNA比例增加，因此造成黏度的下降。汪學(xué)德等[25]發(fā)現(xiàn)小分子化合物芝麻素及其衍生物能夠促使DNA黏度的升高，當(dāng)達(dá)到一定之后，DNA黏度變化趨于穩(wěn)定。這與本研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似，在一定量的小分子化合物T-2毒素范圍內(nèi)，T-2毒素能夠促使DNA黏度的升高，而超過一定值后，DNA黏度呈下降趨勢，可能因?yàn)檫^量芝麻素及其衍生物與DNA不再發(fā)生反應(yīng)，而過量的T-2毒素因含有電荷可繼續(xù)與DNA反應(yīng)造成的。T-2毒素質(zhì)量濃度的變化對(duì)稀釋10 倍的原肝胰腺DNA提取液的黏度的影響較稀釋10 倍的原肌肉DNA提取液的明顯。因肝胰腺內(nèi)DNA的含量更高，并且肝胰腺是對(duì)蝦對(duì)外源化合物的主要解毒器官和儲(chǔ)藏器官，因此推測對(duì)蝦的肝胰腺為T-2毒素進(jìn)攻的靶器官。

2.4 T-2毒素經(jīng)口對(duì)對(duì)蝦DNA黏度的影響

由圖7可知，空白組的條帶亮度明顯高于劑量組，同時(shí)測定空白組和劑量組對(duì)蝦提取的肝胰腺DNA的A260nm/A280nm，分別為1.947、1.506、1.259、1.249、1.363、1.379。DNA質(zhì)量濃度分別為858、651、662、638、597、684 μg/mL，劑量組DNA的A260nm/A280nm均小于1.6，而空白組DNA的A260nm/A280nm為1.947，并且提取的劑量組DNA質(zhì)量濃度也明顯低于空白組的，因相同的提取條件故可以排除提取過程中DNA的污染，可以推測是樣品本身中存在對(duì)DNA有作用的物質(zhì)。有研究表明T-2毒素引起機(jī)體氧化應(yīng)激而產(chǎn)生醛類物質(zhì)，由于醛類物質(zhì)的吸收峰覆蓋了DNA的吸收峰[26-27]。覆蓋DNA原本的吸光度，從而引起A260nm和A280nm的變化，造成A260nm/A280nm降低。

圖7 各T-2毒素劑量組DNA瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.7 Electrophoresis of DNA from shrimps exposed to different doses of T-2 toxin

圖8 各T-2毒素劑量組對(duì)蝦肝胰腺DNA黏度的變化Fig.8 Changes in DNA viscosity in liver and pancrea tissues from all dose groups

由圖8可知，不同劑量組對(duì)蝦體內(nèi)DNA黏度有著明顯的差異，劑量組對(duì)蝦DNA黏度整體較空白組高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與小牛胸腺DNA實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)具有大致相似的影響，T-2毒素不管在體內(nèi)或者體外幾乎都會(huì)引起對(duì)蝦DNA黏度整體上升。但是DNA黏度的變化趨勢存在差異，比如0.5 mg/kg劑量組的DNA黏度較1.2 mg/kg劑量組的高，在2.4 mg/kg劑量組對(duì)蝦DNA黏度低于空白組。推測可能為：劑量組利用T-2毒素喂養(yǎng)對(duì)蝦20 d，對(duì)蝦機(jī)體內(nèi)含有DNA修復(fù)酶會(huì)對(duì)損傷的DNA進(jìn)行一定自我修復(fù)[28]；另外有研究表明，當(dāng)T-2毒素進(jìn)入體內(nèi)后，在肝臟等一些解毒器官內(nèi)發(fā)生代謝轉(zhuǎn)化，如脫乙酰作用、羥基化作用、脫環(huán)氧化作用等，變成其他形式的T-2毒素，如mT-2s（隱蔽態(tài)T-2毒素）、HT-2、T-2醇等[29-30]。所以當(dāng)T-2毒素進(jìn)入對(duì)蝦體內(nèi)后，可能一部分被各種轉(zhuǎn)化反應(yīng)代謝成其他物質(zhì)，其中某些物質(zhì)以更多樣的方式與DNA作用，從而對(duì)劑量組對(duì)蝦體內(nèi)DNA黏度的變化造成干擾。

3 結(jié) 論

采用Design-Expert軟件的中心組合設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，建立二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型，優(yōu)化出對(duì)DNA黏度影響最明顯的反應(yīng)條件：T-2毒素質(zhì)量濃度為2.70 ng/mL、DNA質(zhì)量濃度為50 μg/mL、反應(yīng)時(shí)間為43 min。

因?yàn)門-2毒素小分子中具有強(qiáng)電負(fù)性的羥基與羰基可能會(huì)被DNA兩側(cè)的帶電磷酸基團(tuán)吸附；T-2毒素上O—H可能與嘧啶和嘌呤的N原子和O原子接觸形成氫鍵；同時(shí)T-2毒素還可能通過嵌插的方式與DNA結(jié)合。

體外實(shí)驗(yàn)中，體外T-2毒素與對(duì)蝦DNA作用，隨著T-2毒素質(zhì)量濃度的增加，DNA黏度隨之增大，在T-2毒素質(zhì)量濃度為2.70 ng/mL時(shí)達(dá)到最大值，此后降低；在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，喂食對(duì)蝦T-2毒素進(jìn)行蓄積染毒對(duì)對(duì)蝦DNA黏度的影響無明確規(guī)律，與體外對(duì)蝦DNA實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不相似。可能是由于T-2毒素經(jīng)過體內(nèi)復(fù)雜的反應(yīng)，與其他物質(zhì)加合后作用于DNA引起的，這還需要進(jìn)一步研究。

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