吳偉東，羅磊，丁鋒

(暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬廣州市紅十字會醫(yī)院，廣州 510220)

肺癌是全世界男性和女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因[1]。從生物和臨床角度來看，肺癌是一種具有多種組織學(xué)亞型的異質(zhì)性疾病，其中非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)最常見。傳統(tǒng)上，NSCLC已經(jīng)被用來表示具有不同于小細(xì)胞癌(SCLC)的組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)特征的腫瘤。大多數(shù)NSCLC可以分為三大類：大細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌及腺癌。然而，還有其他較少診斷的組織學(xué)類型。50%以上的典型NSCLC病例被診斷時已是晚期[2]，對于大多數(shù)NSCLC患者，化療為其主要治療方法但預(yù)后仍然很差[2]?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在肺癌發(fā)病機(jī)制中的作用及進(jìn)一步鑒定相關(guān)新型治療靶標(biāo)可能有助于肺癌患者的早期檢測和生存改善。

1 MMPs的生物學(xué)功能

1.1 結(jié)構(gòu)與分類 截至目前，已經(jīng)鑒定出人類MMP家族成員中23種不同的金屬蛋白酶成分[3]。與MMP-1序列同源性一樣，大多數(shù)proMMPs結(jié)構(gòu)中含有半胱氨酸轉(zhuǎn)化基序PRCGXPD來維持其酶原形式。每種MMPs催化結(jié)構(gòu)域中的鋅結(jié)合基序HEXGHXXGXXH決定其結(jié)合相關(guān)蛋白酶的種類。對于底物與某些MMPs的特異性結(jié)合，MMPs具有幾個S亞位，Zn2+的右側(cè)激發(fā)的S1′、S2′和S3′和Zn2+的左側(cè)未激發(fā)的S1、S2、S3，以及其催化位點(diǎn)的Zn2+本身。其中，S1′口袋是最關(guān)鍵的識別位點(diǎn)，在不同的MMP中S1′口袋所含氨基酸序列和深度不一。對于所有MMP，P1′-S1′相互作用是決定底物切割位置的關(guān)鍵因素(P1′是底物與酶的S1′口袋結(jié)合的基團(tuán))；然而MMP-23除外，因其缺乏半胱氨酸轉(zhuǎn)換基序，但其催化結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與MMP-1有關(guān)。MMP通常由前結(jié)構(gòu)域、催化結(jié)構(gòu)域、鉸鏈區(qū)和血紅蛋白結(jié)合域四大塊組成。它們從細(xì)胞分泌或錨定到質(zhì)膜?；贛MPs序列相似性、結(jié)構(gòu)域組織差異性和底物特異性，MMPs可分為膠原酶：MMP-1、-8、-13、-18；明膠酶：MMP-2、-9；基質(zhì)降解酶：MMP-3、-10、-11；膜型MMP：MMP-14、-15、-16、-24、-17、-25；Matrilysins:MMP-7、-26；其他MMPs：MMP-12、-19、-20、-21、-23、-27、-28。

1.2 MMPs活性的調(diào)控機(jī)制及功能 MMPs的活性調(diào)節(jié)機(jī)制于多個水平嚴(yán)格調(diào)控，包括基因表達(dá)、酶原激活、區(qū)室化和活性酶的抑制[4]。大多數(shù)MMP的表達(dá)在轉(zhuǎn)錄水平上受各種生理誘發(fā)因子包括激素、生長因子、細(xì)胞因子、細(xì)胞-細(xì)胞相互作用、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)相互作用及部分相關(guān)腫瘤啟動子等調(diào)節(jié)[5]。proMMPs細(xì)胞內(nèi)激活時需要破壞前結(jié)構(gòu)域中保守的半胱氨酸殘基的硫醇與催化位點(diǎn)中的鋅離子之間的共價鍵，阻斷底物結(jié)合裂口。在細(xì)胞外活化期間，半胱氨酸轉(zhuǎn)換可以通過自溶或其他蛋白酶如纖溶酶、胰蛋白酶、弗林蛋白酶和其他MMPs來激活。此外，半胱氨酸轉(zhuǎn)換可以通過活性氧氧化半胱氨酸或被含汞化合物人為地破壞，導(dǎo)致前結(jié)構(gòu)域的變構(gòu)重新定位及自溶裂解[6]。另外，MMPs特異性和活性可以通過某些胞內(nèi)或胞外局部空間位置差異分隔來控制，可能與糖胺聚糖的相互作用有關(guān)[7]。激活后的MMPs可分解成一種或多種細(xì)胞外基質(zhì)成分，且不同MMPs之間亦能相互激活?；罨蟮腗MPs，通過蛋白酶抑制劑如α2-巨球蛋白及其特異性抑制劑即金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)直接抑制。MMPs的活性主要受到內(nèi)源性抑制劑TIMPs直接抑制，該家族由四種作為糖基化或非糖基化形式存在的蛋白酶抑制劑TIMP 1～4組成。TIMP是21～29 kDa的蛋白質(zhì)，其具有由125個氨基酸組成的N-末端結(jié)構(gòu)域和由65個氨基酸組成的C-末端結(jié)構(gòu)域，兩末端結(jié)構(gòu)域均含3個二硫鍵，其中N末端結(jié)構(gòu)域作為單獨(dú)單位折疊并與MMPs的催化結(jié)構(gòu)域之間存在緊密聯(lián)系。然而，在某些情況下，C末端結(jié)構(gòu)域可以進(jìn)一步增強(qiáng)MMP/TIMP相互作用。此外，TIMP可以與明膠酶酶原相互形成復(fù)合物，這表明其C-末端結(jié)構(gòu)域與血紅蛋白樣結(jié)構(gòu)域存在相互作用。分泌形成的TIMPs可以與多種膜錨定或分泌的MMP相互作用[8]。以1∶1結(jié)合MMP的活性位點(diǎn)形成抑制復(fù)合物，并且抑制所有MMP的活性。TIMPs在體內(nèi)不同組織差異分布反映其基因表達(dá)特異性，其被單獨(dú)調(diào)節(jié)。TIMPs中除了TIMP-3與細(xì)胞外基質(zhì)隔離外，其余均以可溶形式存在。在結(jié)構(gòu)上，TIMP由兩個并排的結(jié)構(gòu)域組成，每個域由3個內(nèi)部二硫鍵穩(wěn)定化[9]。其N末端為抑制性結(jié)構(gòu)域，有時被稱為“抑制結(jié)構(gòu)域”。然而，Batra等[9]研究發(fā)現(xiàn)，除了此兩個抑制結(jié)構(gòu)域單獨(dú)作用外，完整TIMP的MMP復(fù)合物中，相互抑制作用可增加一個數(shù)量級。四種人TIMPs具有廣泛的重疊特異性，且每一種TIMP可抑制大多數(shù)MMPs，但相互之間親和力譜跨越多個數(shù)量級。其中TIMP-2/MMP-2和TIMP-1/MMP-9的相互作用不僅涉及MMP催化結(jié)構(gòu)域，而且還涉及與類血紅素結(jié)構(gòu)域的相互作用。除了TIMP外，α2-巨球蛋白和受體介導(dǎo)的內(nèi)吞也可以防止活化的MMPs發(fā)揮其作用。體內(nèi)局部組織中proMMPs、活性MMPs及TIMPs之間的平衡決定了MMPs的整體活動?？刂葡鄳?yīng)部位生理、病理過程及信號事件，如細(xì)胞的生長和分化、細(xì)胞遷移與侵襲、細(xì)胞成活及凋亡、局部血管生成等。

膠原酶的特征為它們能夠在N端的四分之三的特定位點(diǎn)切割間質(zhì)膠原Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。膠原酶也可以消化許多其他細(xì)胞外基質(zhì)和非細(xì)胞外基質(zhì)分子。明膠酶的催化結(jié)構(gòu)域含有三個重復(fù)的Ⅱ型纖連蛋白結(jié)構(gòu)，其可結(jié)合膠原、明膠和層粘連蛋白，降解變性的膠原蛋白和明膠。其中僅MMP-2可降解Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型膠原?；|(zhì)降解酶可以消化各種基質(zhì)，如明膠、纖連蛋白、核酸、層粘連蛋白、腱生蛋白、玻連蛋白、核心蛋白聚糖以及蛋白聚糖?；|(zhì)降解酶中MMP-3、-10具有相似的底物特性，但MMP-3的蛋白水解效率更高。除了降解細(xì)胞外基質(zhì)組分外，MMP-3同時可激活多種proMMPs，其在部分加工的proMMP-1成為完全活性的MMP-1的生化過程中起著至關(guān)重要的作用。Matrilysins特征在于缺乏血紅蛋白結(jié)合域。MMP-7、MMP-26也被稱為endometase。其中MMP-26具有更多的底物特異性限制。Matrilysins除可降解細(xì)胞外基質(zhì)組分外，MMP-7還可以處理細(xì)胞表面分子，如前-防御素、As配體、前腫瘤壞死因子-α和E-鈣黏蛋白。在四種膜型MMP中，MMP-14和-15具有大量重疊的底物特異性，包括天然原纖維膠原、明膠、纖連蛋白和玻連蛋白。其中MMP-17和MMP-25是糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定蛋白，可通過GPI錨定點(diǎn)與細(xì)胞膜連接進(jìn)而切割Ⅳ型膠原、明膠、纖連蛋白和層粘連蛋白[10]。膜型基質(zhì)金屬蛋白酶1(MT1-MMP)在血管生成中起重要作用。MT5-MMP是腦特異性的，主要在小腦中表達(dá)。MT6-MMP(MMP-25)僅在外周血白細(xì)胞和間變性星形細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中表達(dá)，但不在腦膜瘤中表達(dá)。其他MMPs中金屬彈性蛋白酶(MMP-12)主要在巨噬細(xì)胞表達(dá)，是巨噬細(xì)胞遷移所必需的。消化朊蛋白酶的Elylysin(MMP-20)主要位于新形成的牙釉質(zhì)內(nèi)。缺陷性牙釉質(zhì)遺傳性疾病，是由于MMP-20切割位點(diǎn)的突變引起的。MMP-23也稱為半胱氨酸陣列MMP，主要在生殖組織中表達(dá)。MMP-28，主要在角質(zhì)形成細(xì)胞中表達(dá)。完整和損傷的皮膚中的表達(dá)模式表明MMP-28可能在組織止血和傷口修復(fù)中起作用。MMP-22首先從雞成纖維細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，這種酶的功能未知。Khokha等[11]發(fā)現(xiàn)，MMPs細(xì)胞表面受體的胞外域脫落影響細(xì)胞膜的表面組成和細(xì)胞對胞外信號的反應(yīng)性。鑒于MMPs的多重效應(yīng)，可以推測其在不同的生理和病理生理?xiàng)l件下發(fā)揮重要作用。

2 與肺癌相關(guān)MMPs

2.1 MMP14(MT1-MMP) 在各種膜型基質(zhì)金屬蛋白酶中，MMP14是惟一一種可以降解膠原Ⅰ的模型MMP,因此在通過細(xì)胞外基質(zhì)的細(xì)胞遷移中起著關(guān)鍵作用。研究證實(shí)，MMP14無效小鼠模型實(shí)驗(yàn)中，小鼠發(fā)生異常，于4周后死亡，表明MMP14不可或缺性及不可代替性。多種人類腫瘤中MMP14均存在上調(diào)。MMP14通過類血紅素結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)域識別水解底物，類血紅素結(jié)構(gòu)域的二聚化顯著增加MMP14的活性，其可切割并激活proMMP2和proMMP13，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白水解，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。Stawowczyk等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在原位Kras驅(qū)動的NSCLC小鼠模型(K-ras LSL-G12D/+ ; p53 flox/flox)中發(fā)現(xiàn)，MMP14在腫瘤內(nèi)骨髓細(xì)胞和EpCam+腫瘤細(xì)胞中均上調(diào)。定量RT-PCR分析和Western印跡證實(shí)在腫瘤內(nèi)髓系細(xì)胞和上皮間隔區(qū)MMP14表達(dá)增加。肺切片的免疫熒光染色顯示，在腫瘤中的上皮細(xì)胞和造血基質(zhì)細(xì)胞中都檢測到膜特異性MMP14表達(dá)。在NSCLC患者腫瘤組織中也觀察到MMP-14異常升高，與鄰近非腫瘤組織相比，MMP14在CD11b+、CD33+單核細(xì)胞，CD11b+、CD33-中性粒細(xì)胞及EpCAM+上皮細(xì)胞中特異性上調(diào)。用DN-MMP14阻斷MMP14的功能，可能由于其降解膠原蛋白Ⅰ功能受損，致使細(xì)胞外基質(zhì)降解能力減弱，阻斷腫瘤細(xì)胞的侵襲過程。小鼠模型中顯示MMP14表達(dá)陰性的HKP1肺腫瘤細(xì)胞生長受抑制，表明MMP14可能在NSCLC進(jìn)展中起關(guān)鍵作用。后期可以更加深入研究MMP-14在NSCLC中的作用及開發(fā)MMP-14抑制劑，改善NSCLC患者的治療效果。

2.2 MMP-10 MMP-10與其他兩種基質(zhì)降解酶(MMP-3、-11)存在較大差異。雖然MMP-10在結(jié)構(gòu)和底物特異性方面與MMP-3密切相關(guān)，但誘導(dǎo)能力、活性和細(xì)胞分布迥然不同。MMP-10具有相對寬的底物特異性，包括proMMP、細(xì)胞外基質(zhì)組分、蛋白聚糖、糖蛋白和膠原。與其他幾種MMPs主要位于腫瘤基質(zhì)不同，主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞。MMP-10的過表達(dá)已經(jīng)在上皮起源的幾種人類腫瘤中得到證實(shí)，包括頭頸部、食管和口腔鱗狀細(xì)胞癌以及皮膚鱗狀細(xì)胞癌和基底細(xì)胞癌。Gill等[13]通過對甲醛固定及石蠟包埋的NSCLC標(biāo)本、NSCLC新鮮切除標(biāo)本和組織學(xué)正常的早期肺癌癌旁組織分析發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)組織學(xué)正常肺組織切片中MMP-10低表達(dá)，NSCLC組織學(xué)類型中MMP-10呈高水平表達(dá)。但不同等級的NSCLC組織MMP-10表達(dá)無明顯差異性。在腺癌、大細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌中MMP-10表達(dá)異常升高，但相互之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性。早期在上皮性皮膚癌研究中發(fā)現(xiàn)，僅在層粘連蛋白-5(Ln-5)陽性腫瘤細(xì)胞中觀察到MMP-10的表達(dá)，且與之前傷口愈合研究一致。表明這兩種蛋白存在緊密聯(lián)系。Ln-5在肺腺癌中亦過表達(dá)，與血管侵襲、復(fù)發(fā)和預(yù)后不良相關(guān)，其過表達(dá)發(fā)生在肺腫瘤形成相對早期階段，與淋巴管侵襲或轉(zhuǎn)移無關(guān)。假設(shè)MMP-10為肺腫瘤形成早期事件，則涉及腫瘤生長而非侵襲，并與預(yù)后不良相關(guān)聯(lián)。一項(xiàng)小型研究(6例病例)證實(shí)人類NSCLC手術(shù)切除后復(fù)發(fā)中MMP-10 mRNA水平升高(5例)[14]，提示MMP-10在NSCLC發(fā)展中的存在潛在作用。基于MMP-10在人類腫瘤中的表達(dá)譜，加上廣泛底物特異性和致瘤過程不同階段的表達(dá)差異，表明MMP-10是潛在的腫瘤標(biāo)志物，或許可預(yù)測臨床行為，使特異性抑制劑或靶向治療劑靶向MMP-10治療NSCLC成為一種可能性。

2.3 MMP-2、MMP-9 在MMPs中，MMP-2(明膠酶A)和MMP-9(明膠酶B)在膠原蛋白降解中尤其重要，通過膠原酶裂解原纖維膠原三重螺旋結(jié)構(gòu)使膠原蛋白變性失活。MMP-2、-9對天然Ⅳ型和Ⅴ型膠原蛋白、蛋白聚糖、彈性蛋白和纖連蛋白也具有強(qiáng)活性。研究發(fā)現(xiàn)，其在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。后期研究發(fā)現(xiàn)，生長因子如血管內(nèi)皮生長因子被隔離在細(xì)胞外基質(zhì)中可以通過MMP-9介導(dǎo)的蛋白水解而激活。MMP-2、-9也可激活一些非矩陣相關(guān)底物，如生長因子7、9，細(xì)胞因子，趨化因子等。以往在MMP-9缺陷KO小鼠模型中表現(xiàn)出特征性的胚胎表型，其特征在于長骨中生長板的血管化和骨化的延遲。實(shí)驗(yàn)中MMP-9缺陷小鼠中腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力減弱。Masson等[15]將惡性角質(zhì)形成細(xì)胞移植到MMP-2-/-，MMP-9-/-和雙重MMP-2-/-MMP-9-/-小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，MMP-2和MMP-9的組合缺乏會損害腫瘤侵襲和血管形成。移植到MMP-2-/-，MMP-9-/-小鼠中的腫瘤細(xì)胞招募血管發(fā)生,并以野生型小鼠觀察到的相似程度滲入宿主組織。當(dāng)惡性細(xì)胞移植到雙重MMP-2-/-MMP-9-/-小鼠時，宿主衍生的血管不能向腫瘤細(xì)胞層遷移，受阻于膠原凝膠層下。Li等[16]研究發(fā)現(xiàn)，MMP-2、MMP-13在大細(xì)胞肺癌腫瘤血管生成模擬(VM)中具有重要作用。由MMP-2切割的Ln-5片段在三維培養(yǎng)物中通過大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系H460和H661促進(jìn)管狀結(jié)構(gòu)形成。用MMP-2切割的Ln-5片段處理的細(xì)胞高表達(dá)表皮生長因子受體(EGFR)和F-肌動蛋白，而MMP-13的瞬時上調(diào)或用重組MMP-13蛋白處理在3D培養(yǎng)中消除H460細(xì)胞的管狀結(jié)構(gòu)形成；同時由MMP-13切割的Ln-5片段降低EGFR/F-肌動蛋白表達(dá)并破壞VM形成。MMP-13與大細(xì)胞肺癌組織中的VM、Ln-5和EGFR呈負(fù)相關(guān)。總之，MMP-2或MMP-13可通過切割Ln-5來影響EGFR信號激活，進(jìn)而促進(jìn)或破壞大細(xì)胞肺癌中的VM形成。

2.4 MMP-13 膠原酶中的MMP-13可以降解細(xì)胞外基質(zhì)中的原纖維膠原蛋白，其在正常組織中表達(dá)極低。最早在乳腺癌中發(fā)現(xiàn),后來在關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化等許多病理狀況下觀察到異常表達(dá)。已有研究報(bào)道，MMP-13在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、食道癌、胃癌、結(jié)腸直腸癌及皮膚癌癥中過表達(dá)。在頸部鱗狀細(xì)胞癌、泌尿道或皮膚癌中觀察到，MMP-13不僅表達(dá)于腫瘤細(xì)胞本身，在其周圍基質(zhì)細(xì)胞中亦過表達(dá)，特別是侵襲前基質(zhì)中。提示MMP-13可能在介導(dǎo)細(xì)胞侵襲所需早期信號事件中發(fā)揮重要作用。Mathieu等[17]通過小鼠K-ras LSL-G12D肺癌模型研究MMP-13在整個肺腫瘤發(fā)生過程中(AAHs肺異種腺瘤性增生，腺瘤和腺癌)的表達(dá)情況。在K-ras LSL-G12D小鼠模型中使用MMP特異性熒光探針和雙重MRI-FMT成像系統(tǒng)檢測，結(jié)果顯示活體小鼠肺癌組織中MMPs高表達(dá)。同時通過人肺腫瘤分析證實(shí)，與非侵入性病變相比，人肺腺癌MMP-13的免疫組織化學(xué)染色顯示侵襲性和微創(chuàng)性腺癌中MMP-13表達(dá)顯著增加。表明MMP-13在肺腺癌發(fā)生中的重要性，提示MMP-13的表達(dá)可作為肺腺癌進(jìn)展的潛在標(biāo)志物，對后期用于早期診斷的特異熒光智能探針及肺腺癌的治療開辟了新徑。

3 MMPs的人工合成抑制劑

研究顯示,MMPs在各種疾病(特別是腫瘤激活，生長，侵襲過程中)病理生理過程中起關(guān)鍵作用。因此MMPs可成為特異治療靶點(diǎn)。TIMPs為MMPs的天然組織抑制劑，有助于維持細(xì)胞外基質(zhì)的動態(tài)平衡。然而，由于體內(nèi)半衰期短，TIMPs不適合藥理學(xué)直接應(yīng)用。迄今為止，大量人工合成MMP抑制劑在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭酗@示出一定效果。在有關(guān)肺癌小鼠模型中使用肽模擬/非肽模擬抑制劑后，腫瘤生長及侵襲明顯受抑制，但肌肉、骨骼等毒性作用明顯，且對肺癌晚期小鼠并無效果。但在人類的Ⅲ期臨床試驗(yàn)中測試的幾代合成的MMP抑制劑，包括肽模擬物(巴馬司他)、非肽模擬抑制劑(BAY12-9566，stationmaster，BMS-275291和CGS27023A)和四環(huán)素衍生物，并未取得很好的預(yù)期效果。部分原因可能是臨床試驗(yàn)(比如試驗(yàn)設(shè)計(jì)欠佳及臨床終點(diǎn)不足)和藥物本身(如代謝不穩(wěn)定，口服生物利用度低，抑制特異性差和副作用不良)的問題。在未來研究中或許可以通過使用基因譜及組織微陣列來區(qū)分每種MMP的具體作用及位點(diǎn)，通過熒光智能探針體內(nèi)成像技術(shù)評估MMP抑制劑在癌癥進(jìn)展的治療效果及其活性，使TIMPs成為可行高效的靶向治療途徑。

參考文獻(xiàn)：

[1] Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J]. Int J Cancer, 2015,136(5):359-386.

[2] Bordi P, Del Re M, Danesi R, et al. Circulating DNA in diagnosis and monitoring EGFR gene mutations in advanced non-small cell lung cancer[J]. Transl Lung Cancer Res, 2015,4(5):584-597.

[3] Khokha R, Murthy A, Weiss A. Metalloproteinases and their natural inhibitors in inflammation and immunity[J]. Nat Rev Immunol, 2013,13(9):649-665.

[4] Ra HJ, Parks WC. Control of matrix metalloproteinase catalytic activity[J]. Matrix Biol, 2007,26(8):587-596.

[5] Firestein GS, Budd RC, Harris ED Jr, et al. Kelly′s Texbook of Rheumatology[M]. 8th edn. Philadelphia: Saunders Elsevier, 2009:115-134.

[6] Klein T, Bischoff R. Physiology and pathophysiology of matrix metalloproteases[J]. Amino Acids, 2011,41(2):271-290.

[7] Tocchi A, Parks WC. Functional interactions between matrix metalloproteinases and glycosaminoglycans[J]. FEBS J, 2013,280(10):2332-2341.

[8] Jackson HW, Defamie V, Waterhouse P, et al. TIMPs: versatile extracellular regulators in cancer[J]. Nat Rev Cancer, 2017(1):38-53.

[9] Batra J, Soares AS, Mehner C, et al. Matrix metalloproteinase-10/TIMP-2 structure and analyses define conserved core interactions and diverse exosite interactions in MMP/TIMP complexes[J]. PLoS One, 2013,8(9):e75836.

[10] Nissinen L, Kahari VM. Matrix metalloproteinases in inflammation[J]. Biochim Biophys Acta, 2014,1840(8):2571-2580.

[11] Khokha R, Murthy A, Weiss A. Metalloproteinases and their natural inhibitors in inflammation and immunity[J]. Nat Rev Immunol, 2013,13(9):649-665.

[12] Stawowczyk M, Wellenstein MD, Lee SB， et al. Matrix Metalloproteinase 14 promotes lung cancer by cleavage of Heparin-Binding EGF-like Growth Factor[J]. Neoplasia, 2017,19(2):55-64.

[13] Gill JH, Kirwan IG, Seargent JM, et al.MMP-10 is overexpressed, proteolytically active, and a potential target for therapeutic intervention in human lung carcinomas[J]. Neoplasia, 2004,6(6):777-785.

[14] Cho NH, Hong KP, Hong SH, et al. MMP expression profiling in recurred stage ⅠB lung cancer[J]. Oncogene, 2003,23(3):845-851.

[15] Masson V, de la Ballina LR, Munaut C, et al. Contribution of host MMP-2 and MMP-9 to promote tumor vascularization and invasion of malignant keratinocytes[J]. FASEB J, 2005,19(2): 234-236.

[16] Li Y, Sun B, Zhao X, et al. MMP-2 and MMP-13 affect vasculogenic mimicry formation in large cell lung cancer[J]. J Cell Mol Med, 2017,21(12):3741-3751.

[17] Mathieu S, Jing P, Harvey H, et al. MMP-13 in-vivo molecular imaging reveals early expression in lung adenocarcinoma[J]. PLoS One, 2015,10(7):e0132960.