王帆 劉平
摘 要:動(dòng)物檢疫是保證動(dòng)物農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的有效手段,也是動(dòng)物防疫工作的重要組成部分,良好的動(dòng)物檢疫避免了畜禽類傳染病的發(fā)生。動(dòng)物檢疫工作具體包括使用各種診斷方法對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品,如畜禽類產(chǎn)品進(jìn)行疾病和疫情的檢測(cè),確定其是否帶病,一旦發(fā)現(xiàn)疫情必須立刻采取相應(yīng)措施防止疫病的進(jìn)一步擴(kuò)散和蔓延。因此做好動(dòng)物檢疫材料的采集和檢疫十分重要。
關(guān)鍵詞:動(dòng)物檢疫;檢疫材料;采集;檢疫
動(dòng)物檢疫是保證動(dòng)物農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的有效手段,也是動(dòng)物防疫工作的重要組成部分。本文就動(dòng)物檢疫材料的采集和檢疫方法展開(kāi)討論,介紹動(dòng)物材料的采集原則和目前比較常用的檢疫方法以及在工作中的心得體會(huì),現(xiàn)分享如下。
一、采集動(dòng)物檢疫材料應(yīng)遵循的標(biāo)準(zhǔn)
動(dòng)物檢疫材料的采集一般要遵循以下幾個(gè)原則標(biāo)準(zhǔn),分別為典型原則、合理原則、適實(shí)原則、無(wú)菌采樣和安全采樣。樣本的選擇要具有代表性,如果是活體采樣要挑選典型動(dòng)物,具體為具有典型癥狀并且沒(méi)有接受任何藥物治療的動(dòng)物。確定動(dòng)物個(gè)體后,對(duì)于材料的選擇也要求典型,如應(yīng)該選擇病原體含量比較高的部位進(jìn)行采樣。采樣還要選擇合理的個(gè)體數(shù)目,一般而言對(duì)于群體發(fā)病類的疾病,需要選取至少5個(gè)動(dòng)物個(gè)體作為原始樣本。同時(shí)一定要保證樣本的數(shù)量可以滿足實(shí)驗(yàn)需求,還要考慮到備樣的可能性。采集樣本時(shí)要根據(jù)具體情況進(jìn)行分析,比如應(yīng)該注意采樣的節(jié)令性,對(duì)于病死的動(dòng)物要求立刻進(jìn)行采樣,尤其在氣溫比較高的夏季,為了避免動(dòng)物尸體進(jìn)一步腐爛,采樣時(shí)間一般不能超過(guò)死亡時(shí)間后4小時(shí)。采樣過(guò)程應(yīng)該為無(wú)菌的過(guò)程,因?yàn)樵S多樣本需要進(jìn)一步進(jìn)行微生物學(xué)、血液學(xué)的相關(guān)檢測(cè),所以必須符合相關(guān)的實(shí)驗(yàn)要求。采樣過(guò)程中的采樣人員的安全性也十分重要,相關(guān)采樣人員要嚴(yán)格按照規(guī)范采樣流程進(jìn)行操作,避免可能的感染事故發(fā)生,一旦發(fā)現(xiàn)疫情也要及時(shí)匯報(bào)并隔離病源,防止進(jìn)一步的環(huán)境污染和疫情擴(kuò)散。
二、提高動(dòng)物檢疫質(zhì)量的方法和技巧
常見(jiàn)的動(dòng)物檢疫方法根據(jù)工作地點(diǎn)和內(nèi)容的不同可以分為臨場(chǎng)、隔離檢疫、抽樣檢疫和實(shí)驗(yàn)室檢疫。具體的檢疫技術(shù)又涉及到以下幾個(gè)方面。
1.個(gè)體檢測(cè)
個(gè)體檢查主要針對(duì)具有可疑病態(tài)的動(dòng)物,檢驗(yàn)的目的是初步判斷動(dòng)物個(gè)體是否有病,然后再進(jìn)一步進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的步驟。個(gè)體檢測(cè)的方法多樣,比較常見(jiàn)的包括體溫檢測(cè)、觀察動(dòng)物精神狀態(tài)、可視粘膜的檢查、觀察動(dòng)物排泄物、脈搏檢查、呼吸檢測(cè)等項(xiàng)目。通過(guò)個(gè)體檢查基本可以滿足臨床檢驗(yàn)的目的,并得出臨床檢驗(yàn)結(jié)論。一旦發(fā)現(xiàn)可疑的檢測(cè)對(duì)象,要全面扣押整個(gè)動(dòng)物群,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果對(duì)患病動(dòng)物做進(jìn)一步的調(diào)查分析。
2.病理組織學(xué)檢驗(yàn)
人體肉眼無(wú)法準(zhǔn)確觀測(cè)到樣品組織的許多病變過(guò)程,如腫瘤的發(fā)生、腦組織病變等。所以需要借助組織切片和染色技術(shù),如石蠟切片、蘇木素染色法等技術(shù)。
三、 病理解剖檢驗(yàn)技術(shù)
這種方法在對(duì)動(dòng)物尸體的檢驗(yàn)中十分常見(jiàn),對(duì)于樣本需要先檢查其體表特征以排除一些可能的惡性傳染病,如炭疽等疾病。同時(shí)仔細(xì)觀察動(dòng)物尸體的體表狀況,如皮膚、毛發(fā)、毛孔等細(xì)節(jié)。記錄體表特征后可以進(jìn)一步檢查動(dòng)物尸體的皮下、臟器、口腔、鼻腔、頸部等部位,一旦發(fā)現(xiàn)樣本可能攜帶惡性傳染病則禁止解剖。
1.細(xì)菌性傳染病和病毒性傳染病的檢驗(yàn)
常見(jiàn)的細(xì)菌性傳染病的檢測(cè)方法包括顯微鏡檢驗(yàn)法、細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)法、動(dòng)物試驗(yàn)和生化試驗(yàn)等方法。對(duì)于樣品要進(jìn)行病毒性傳染病的檢驗(yàn),這種檢驗(yàn)工作主要包括個(gè)體檢查、病毒培養(yǎng)性狀觀察、病毒形態(tài)學(xué)觀察和病毒核酸檢測(cè)等步驟。具體適用于狂犬病、雞痘病毒等病原體的檢測(cè),同時(shí)也應(yīng)用了電鏡檢測(cè)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等檢測(cè)技術(shù)。
2.寄生蟲(chóng)的病原檢查
寄生蟲(chóng)的病原檢驗(yàn)主要包括蟲(chóng)卵檢測(cè)法,比如用蟲(chóng)卵直接涂片鏡檢,蟲(chóng)體檢測(cè)法兩種。蟲(chóng)體檢測(cè)法常見(jiàn)的檢驗(yàn)又可以根據(jù)昆蟲(chóng)種類分為蠕蟲(chóng)、蜘蛛類、原蟲(chóng)類檢測(cè)法。
3.PCR 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
此法常用于個(gè)體微小、殘缺的病毒檢驗(yàn)。其工作原理是根據(jù)雙鏈DNA在酶和適當(dāng)?shù)臏囟认驴梢越怄湷蔀閱捂?,單鏈DNA在聚合酶和其他輔助蛋白的作用下,遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制為兩份相同的拷貝子。這個(gè)過(guò)程被不斷循環(huán),可以使得目的基因大量擴(kuò)增。將擴(kuò)增產(chǎn)物和參照物進(jìn)行對(duì)比就可以得知目的基因片段的一些信息。該技術(shù)用時(shí)短,彌補(bǔ)了常規(guī)檢測(cè)技術(shù)周期長(zhǎng)的缺陷。此外該技術(shù)不需要活體病毒,有效避免了工作人員和病毒的接觸,減少感染幾率,同時(shí)降低了對(duì)環(huán)境的污染。
4.免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)
此法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)較短,并且結(jié)果可靠性高。多種傳染性疾病的抗體、陽(yáng)性血清都廣泛地被開(kāi)發(fā)為診斷試劑等商品,所以大大簡(jiǎn)化了檢測(cè)過(guò)程,檢測(cè)時(shí)首先要獲取樣本組織、血清等作為實(shí)驗(yàn)材料,選取適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作就可以完成檢測(cè)工作。對(duì)于血清檢測(cè)技術(shù)而言,常見(jiàn)的反應(yīng)包括凝聚反應(yīng)(直接、間接凝聚反應(yīng)等)、沉淀反應(yīng)(瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)等)、標(biāo)記抗體技術(shù)(ELISA等)。
5.變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)
變態(tài)反應(yīng)是指接觸過(guò)抗原的機(jī)體再次接觸同一抗原時(shí),會(huì)產(chǎn)生免疫損傷反應(yīng),有可能引起疾病,屬于特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)。日常生活中的皮膚過(guò)敏、紅腫等就屬于這種反應(yīng)。變態(tài)反應(yīng)的特異性和敏感度較高,常被用于結(jié)核病、副結(jié)核、鼻疽疾病的檢驗(yàn)。
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