王 俊,王 宇,呼格吉樂圖 ,蘇雅拉圖,圖娜拉
(1.內蒙古農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院,內蒙古 呼和浩特 010018;2.內蒙古鄂托克旗動物疫病預防控制中心,內蒙古 鄂托克旗016100)
阿爾巴斯白絨山羊是內蒙古自治區(qū)鄂爾多斯市的一種優(yōu)良的地方性品種,其主要分布在內蒙古自治區(qū)鄂爾多斯市的鄂托克旗、鄂托克前旗、杭錦旗等地區(qū)[1-2]。近些年來,由于長期無節(jié)制的放牧,草場的植被遭到了破壞,這對白絨山羊的生存環(huán)境產(chǎn)生的了一定的影響[3]。隨著禁牧政策的實行,每年4—7月期間為休牧期,在此期間,阿爾巴斯白絨山羊的生產(chǎn)方式從傳統(tǒng)放牧加舍飼模式轉變?yōu)槿犸暷J剑?-5]。隨著飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)模式的改變以及受到飼料過于單一、場地的限制、環(huán)境的惡化等因素的影響,鄂托克旗絨山羊的疾病預防和治療等問題也日漸嚴峻[6],其中阿爾巴斯白絨山羊寄生蟲病和腹瀉病的發(fā)病率較高,影響了其生產(chǎn)性能和牧民的經(jīng)濟收益。
為了解鄂托克旗阿爾巴斯白絨山羊的主要寄生蟲病,該試驗分別對鄂托克旗的新召、塞烏素、木凱淖、烏蘭鎮(zhèn)、蘇米圖、阿爾巴斯和棋盤井地區(qū)的牧戶家進行了羊只的糞便抽檢,每個地區(qū)抽檢糞樣20份。此外,還在鄂爾多斯市鄂托克旗蘇米圖蘇木察汗敖包嘎查的某牧戶家,選取了10只健康的阿爾巴斯白絨山羊作為對照組和10只發(fā)生腹瀉的阿爾巴斯白絨山羊作為試驗組,所選羊只體重均相近,年齡在70~80日齡,用于血清生化指標測定,旨在了解鄂托克旗阿爾巴斯白絨山羊的主要寄生蟲病以及腹瀉山羊和健康山羊的血清生化指標差異。
1.1.1 糞便采集:分別從鄂爾多斯市鄂托克旗的新召、塞烏素、木凱淖、烏蘭鎮(zhèn)、蘇米圖、阿爾巴斯和棋盤井地區(qū)牧戶的羊群中抽檢20只阿爾巴斯白絨山羊的新鮮糞便,每只采集5~10 g糞便(約10~20粒),所選羊只日齡相近(約70日齡)。
1.1.2 試驗材料:所采集的阿爾巴斯白絨山羊糞便、改良麥克馬斯特計數(shù)板 (10 mm×10 mm×1.5 mm)、顯微鏡、飽和食鹽水、蒸餾水、三角燒瓶、燒杯、量筒、便盒、玻棒、吸管、銅篩網(wǎng)(60目)。
1.1.3 操作步驟
1.1.3.1 沉淀法:稱取400 g氯化鈉放入三角燒瓶中,加入1 000 mL沸水,攪拌至充分溶解后靜置冷卻,待有少量鹽析出時,即為飽和食鹽水(比重約為1.18)。稱取2 g羊糞,放入燒杯中,先加入5 mL蒸餾水,攪拌混勻后,再加入55 mL飽和食鹽水,混勻后用銅篩網(wǎng)過濾,吸取適量糞液,注入麥克馬斯特計數(shù)板的計數(shù)室內,靜置5 min后,在顯微鏡下計數(shù)2個刻度室中的蟲卵(EPG)數(shù)。
1.1.3.2 漂浮法:利用蟲卵比重比水的比重大的特性,通過離心機離心使蟲卵加速沉淀在離心管管底。取5 g被檢羊糞,置于燒杯,加入25mL蒸餾水,攪勻后過濾;使用離心機以500 r/min離心3 min,去除上層液體,再加適量蒸餾水,攪勻后再離心,如此重復操作3次左右,直至上層液清亮為止;最后去除大部分上層液,混勻沉淀物,取適量糞液鏡檢,并通過麥克馬斯特計數(shù)板計數(shù)蟲卵(EPG)數(shù)。
1.1.4 結果計算 (公式):2個計數(shù)室的蟲卵數(shù)的平均值A乘以200,即為每克糞便中的蟲卵數(shù)。可按如下公式計算:EPG=(n1+n2)/2÷0.15×60÷2=A×200,其中(n1+n2)/2為平均每個計數(shù)室內蟲卵數(shù)A。
1.2.1 實驗動物:在鄂爾多斯市鄂托克旗蘇米圖蘇木察汗敖包嘎查某牧戶選取了體型相似的健康的和腹瀉的阿爾巴斯白絨山羊各10只,設為對照組和試驗組2組。所選羊只體重相近,年齡約在70~80d。
1.2.2 血液采集與血清分離:在早晨羊只空腹的狀態(tài)下,采用頸靜脈采血的方法,使用一次性的血樣采集針進行血液采集。將采血針的末端接在一次性5 mL的普通真空采血管,進行采血;采血后,將其靜置在室溫下約30 min左右后,使用離心機進行離心,以3 000 r/min離心5 min左右;然后將上層血清吸入離心管中,凍存,主要用于血清生化指標的測定。
1.2.3 生化指標測定:將血清樣品放入全自動生化儀中,檢測血清中谷氨酰轉移酶(GGT)、甘油三酯(TG)、尿素(UREA)、鈣(Ca)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸基轉移酶(AST)、堿性磷酸酶 (ALP)、 總蛋白 (TP)、 白蛋白 (ALB)、 肌酐(CREA-J)、血糖(GLU-God)、總膽固醇(TC)、肌酸激酶(CK)、磷(P)的濃度。
生化指標試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel記錄和簡單處理后,采用SPSS(22.0)軟件進行統(tǒng)計分析,結果以±S表示, 其中P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
在被檢測的糞便中只發(fā)現(xiàn)了球蟲蟲卵 (見圖1)和線蟲蟲卵(見圖2)。具體檢測結果見表1。
血清生化指標測定結果見表2。
由表2可以得出:患有腹瀉的阿爾巴斯白絨山羊和健康阿爾巴斯白絨山羊血清中TG、ALT、AST、ALP、TP、ALB、GLU-God 指標的差異顯著(P<0.05),其中TC和CK的差異極顯著(P<0.01)。
眾所周知,寄生蟲的危害主要有營養(yǎng)掠奪、機械性損傷、毒素作用、免疫損傷和繼發(fā)感染[7]。如消化道線蟲,寄生于山羊消化道內,可引起患病羊只消瘦、貧血、腹瀉、水腫等,嚴重感染時可引起死亡,且山羊消化道線蟲種類很多,混合型感染較多[8]。球蟲病是山羊常見的一種原蟲疾病,對羔羊危害較大,其中30~90日齡的羊羔發(fā)病率和死亡率均較高,患病羊只的特征主要表現(xiàn)為糞便不成形、拉稀、食欲較差、營養(yǎng)不良,嚴重時可引起高度貧血,甚至衰竭死亡[9]。
通過該次抽樣檢查,得出鄂托克旗地區(qū)阿爾巴斯白絨山羊感染的寄生蟲病主要是球蟲病和線蟲病,絳蟲和吸蟲暫未發(fā)現(xiàn)。
在臨床應用上ALT和AST是最廣泛的反映肝細胞損傷的生化指標,血清AST、ALT水平有利于肝功能異常的診斷和鑒別,有助于判斷肝病變程度,在診斷中具有一定的意義[10]。 AST、 ALT、TG和ALP是反映肝酶學變化的重要血清學指標,由于ALT主要存在于肝細胞漿內,因此是肝功能損害最敏感的血清檢測指標[11]。ALT是臨床檢測的常檢轉氨酶之一,ALT偏高是反映肝功能不正常的一個重要指標,且膽道疾病亦可引起肝功能異常[12]。ALB 的異常常見于脫水、腹瀉、肝臟疾病、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等情況[13]。TP即總蛋白,是由白蛋白和球蛋白組成,發(fā)生腹瀉、嘔吐等情況會出現(xiàn)TP值異常[14]。GLU-God對腦部功能很重要,其新陳代謝的干擾因素主要是沉郁、躁郁和厭食等[15]。CK通常存在于動物的心臟、肌肉以及腦等組織的細胞漿和線粒體中,是一種與細胞內能量運轉、ATP再生有直接關系的重要激酶,肌酸激酶的同功酶在臨床診斷中有十分重要的意義,在各種病變包括肌肉萎縮和心肌梗塞發(fā)生時,機體的血清中CK水平均會升高[16]。
由實驗組的TG和TC高于對照組可得出病羊血脂高于正常羊,結合剖檢心臟肥大、心包積液、膽較大、肝質地脆等可以得出患腹瀉的阿爾巴斯白絨山羊出現(xiàn)心臟和膽道方面的疾病,且肝臟有一定程度的損傷。
圖1 被檢糞便中的球蟲蟲卵
圖2 被檢糞便中的線蟲蟲卵
表1 鄂托克旗阿爾巴斯白絨山羊糞便中寄生蟲蟲卵檢測結果
表2 血清生化指標測定結果
①鄂托克旗地區(qū)的阿爾巴斯白絨山羊寄生蟲病主要是球蟲病和線蟲病。建議改善飼養(yǎng)管理方式和更換驅蟲藥物。
②該試驗中腹瀉的阿爾巴斯白絨山羊血清中TG、ALT、AST、ALP、TC 和 CK 指標高于健康的阿爾巴斯白絨山羊。 其中,TG、ALT、AST、ALP4 項指標差異顯著 (P<0.05),TC和CK指標2項指標差異極顯著(P<0.01)。 TP、ALB 和 GLU-God 的指標均低于健康的阿爾巴斯白絨山羊,差異顯著 (P<0.05)。
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