Dominiek Maes

2018年6月13日下午，第25屆國際豬病大會(huì)禮來動(dòng)?！柏i呼吸道和腸道疾病管控”衛(wèi)星會(huì)在重慶悅來國際會(huì)議中心H2廳如期舉行（圖1），禮來動(dòng)保邀請(qǐng)了Dominiek Cabriel Daniel Maes獸醫(yī)學(xué)博士、NathanLen Winkelmanul獸醫(yī)學(xué)博士、譚濤預(yù)防獸醫(yī)學(xué)博士和Ulrich Klein獸醫(yī)學(xué)博士4位豬腸道和呼吸道疾病防控領(lǐng)域的知名專家，分別就支原體肺炎、豬回腸炎和豬痢疾、豬呼吸道疾病綜合征以及枝原凈TM的產(chǎn)品特點(diǎn)及其在豬腸道和呼吸道疾病中的應(yīng)用進(jìn)行了演講。

本文是根據(jù)Dominiek獸醫(yī)學(xué)博士的演講整理而成的聽課筆記。

Dominiek Maes獸醫(yī)學(xué)博士（圖1）是比利時(shí)根特大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院豬健康管理研究室教授，本次演講的題目是 “全球養(yǎng)豬業(yè)支原體感染現(xiàn)狀及支原體病有效防控”。Dominiek博士說，他本人主要從事豬病研究，今天的演講內(nèi)容側(cè)重于如何在生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)來防控豬呼吸道綜合征，更多的是田間的一些試驗(yàn)性指導(dǎo)。隨后，他圍繞“引起豬呼吸道疾病綜合征的重要病原，肺炎支原體的傳播、感染的嚴(yán)重性，菌株多樣性，致病機(jī)理，地方流行性肺炎發(fā)病學(xué)，肺炎支原體毒力因子，肺炎支原體與其他病原體的相互作用，肺炎支原體的診斷、治療、控制方法和凈化”等方面進(jìn)行了展開。

1 呼吸道疾病綜合征的重要病原

Dominiek博士說，肺炎支原體是豬呼吸道疾病綜合征的一個(gè)重要病原。豬群感染支原體后，肺臟組織病變?cè)诟鞲腥矩i場(chǎng)中會(huì)較為頻繁地出現(xiàn);雖然感染豬經(jīng)過治療后可以痊愈，但有些支原體可以使豬終生帶菌，在屠宰時(shí)可以見到肺部有病變一一胸膜炎和肺炎。支原體的屠宰檢測(cè)也是在最近20～30年才開始使用的，然而檢測(cè)結(jié)果表明盡管支原體疫苗被大量使用，但肺臟病變并沒有明顯的改善。Dominiek博士補(bǔ)充說，在針對(duì)美國豬群中流行（嚴(yán)重程度）的病原體和養(yǎng)豬生產(chǎn)者心中認(rèn)為重要的病原體的一項(xiàng)調(diào)查中，肺炎支原體、豬流感病毒和豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒分別位居前三甲。

2 肺炎支原體的傳播

Dominiek博士指出，肺炎支原體與其他很多病原體有許多不同之處，它在豬群間的傳播主要是通過引種，將帶毒的亞臨床感染豬引入豬群，很多時(shí)候豬群感染后并不引起臨床癥狀。帶菌豬進(jìn)入豬群后，整個(gè)豬群很快就會(huì)轉(zhuǎn)陽。因此，Dominiek博士建議中國的養(yǎng)豬生產(chǎn)者在從國外引進(jìn)種豬時(shí)要注意對(duì)支原體的隔離監(jiān)測(cè)。Dominiek博士接著說，如果要建立一個(gè)無肺炎支原體的豬場(chǎng)，那么你必須足夠小心，因?yàn)橹гw也可以通過空氣進(jìn)行傳播。根據(jù)英國和丹麥的流行病學(xué)研究，最遠(yuǎn)傳播距離可達(dá)到3.2 km，故陰性豬場(chǎng)要保證周圍幾公里以內(nèi)無陽性豬場(chǎng);另外有試驗(yàn)證明，在試驗(yàn)條件下，肺炎支原體傳播距離甚至可達(dá)到9.2 km （Otake等，2010），這是一個(gè)非常遠(yuǎn)的距離。

Dominiek博士繼續(xù)說，肺炎支原體的傳播有幾種方式，包括水平傳播和垂直傳播。一個(gè)豬群內(nèi)的傳播主要是垂直傳播，一般不會(huì)通過奶水傳播，而是通過鼻對(duì)鼻的接觸，母豬將病原傳播給仔豬。不同豬場(chǎng)的仔豬在斷奶時(shí)的感染率可達(dá)到4%～30%。另外，一次性購買大量的后備母豬、每個(gè)產(chǎn)房的產(chǎn)床數(shù)量大于16個(gè)、產(chǎn)房無明顯的批次分娩、母豬感染、寄養(yǎng)、延長(zhǎng)哺乳時(shí)間、不同生產(chǎn)體系和不同日齡的豬混群飼養(yǎng)等均是加大支原體感染的風(fēng)險(xiǎn)因素。

3 感染的嚴(yán)重性

Dominiek博士說，有資料表明支原體感染可以發(fā)生在豬一生的很早時(shí)期，如斷奶前。如果發(fā)生早期感染，則會(huì)加重豬的肺部病變;早期感染的時(shí)間越早，屠宰檢查時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)更多的肺部病變，或育肥階段呼吸道疾病高發(fā)。但也有一些研究得出相反的結(jié)果，即早期感染無法預(yù)測(cè)后期屠宰檢查時(shí)肺炎支原體感染的嚴(yán)重度。如果感染發(fā)生很早，人們可以通過接種肺炎支原體疫苗的方法刺激豬的黏膜免疫，減少支原體在豬群中的流行。有一點(diǎn)是可以明確的，即豬群感染支原體后，豬的免疫系統(tǒng)不足以排除細(xì)菌，感染豬會(huì)持續(xù)排菌幾個(gè)月（直到240 d）。

4菌株多樣性

Dominiek博士說，在有些豬場(chǎng)中，支原體的菌株比較單一，可能只有一種菌株存在;然而，有些豬場(chǎng)支原體流行菌株則比較復(fù)雜，可能會(huì)存在多種支原體菌株，且不斷地循環(huán)。感染菌株越單一的豬場(chǎng)，其豬肺炎癥狀越輕微;而感染菌株越多樣化的豬場(chǎng)，豬肺炎病變則越嚴(yán)重，臨床癥狀也越明顯。

Dominiek博士補(bǔ)充說，我們用套式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase ChainReaction，PCR）方法測(cè)序發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)有多個(gè)支原體菌株存在。同時(shí)對(duì)屠宰場(chǎng)中的豬肺臟病變進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)豬的陽性率非常高，達(dá)到83%;同時(shí)發(fā)現(xiàn)了135個(gè)不同的菌株，在106個(gè)肺臟中發(fā)現(xiàn)有兩種不同的菌株，在36個(gè)肺臟中發(fā)現(xiàn)3個(gè)不同的菌株。Dominiek博士說：通過多變量模型檢測(cè)可以得出結(jié)論，在一批次豬群中有多種不同的肺炎支原體菌株，可以預(yù)測(cè)豬群會(huì)有更加嚴(yán)重的肺部病變，病變得分會(huì)更高。

Dominiek博士強(qiáng)調(diào)說，在同一個(gè)豬場(chǎng)，不同批次豬群的支原體感染率也不一樣，菌株的多樣性也不同，同時(shí)菌株在每一批之間也會(huì)有差異。所以，豬場(chǎng)的生物安全非常重要，豬場(chǎng)要盡量提高生物安全以減少菌株的多樣性，進(jìn)而可以減少肺部的病變。

5 致病機(jī)理

Dominiek博士說，肺炎支原體主要感染肺部的纖毛細(xì)胞（主要是氣管和支氣管的纖毛），引起纖毛的脫落和凝聚。感染主要集中在上呼吸道的氣管和支氣管部位。肺炎支原體吸附在纖毛細(xì)胞上（圖2），并在此進(jìn)行復(fù)制，導(dǎo)致纖毛生長(zhǎng)停止，并脫落，引起淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞大量聚集。這一個(gè)過程還包括其他因素（如黏附素、蛋白水解過程等）的參與。

6 地方流行性肺炎發(fā)病學(xué)

Dominiek博士說，豬感染支原體后，病變的發(fā)展速度較慢，直到4周后才有清晰的支原體病變（圖3）。之后病變會(huì)慢慢地恢復(fù)，有時(shí)會(huì)再次感染，在肺部造成明顯的病變。

7 肺炎支原體毒力因子

Dominiek博士說，肺炎支原體的毒力因子有很多，且大部分不是很清楚?；蛟S黏附因子是其中一個(gè)很重要的毒力因子，目前也沒有特別深入的研究。如果有條件，可以做一項(xiàng)免疫系統(tǒng)功能分析研究，它可以損害淋巴細(xì)胞的有絲分裂，減少中性粒細(xì)胞和肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞的毒性因子可能是一個(gè)很重要的毒力因子，54-kDa膜蛋白在人的支原體感染上被證明具有毒性作用，在豬上的作用還不清楚。

Dominiek博士補(bǔ)充說，有研究表明，一些品種的豬較其他品種的豬對(duì)支原體的感染有更強(qiáng)的抵抗力，它們同樣能感染支原體，但表現(xiàn)出的臨床癥狀更輕微。

8 肺炎支原體與其他病原體的相互作用

Dominiek博士說，肺炎支原體感染后會(huì)增強(qiáng)豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬流感病毒、豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、移行的豬蛔蟲幼蟲的致病性。支原體與其他病原體的混合感染，會(huì)使豬呼吸道疾病的癥狀更加嚴(yán)重。

9 肺炎支原體的診斷

Dominiek博士說，在歐洲，豬感染最多的病原以及影響最大的病原是肺炎支原體。豬感染支原體后如何進(jìn)行診斷，首先是觀察臨床癥狀。病豬表現(xiàn)為精神不振、采食量下降、體況變差等。剖檢可發(fā)現(xiàn)前腹側(cè)肺融合。之后可進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。確診需要進(jìn)行病原的分離和鑒定。血清學(xué)檢測(cè)存在明顯的不足，因?yàn)橛行┴i感染后并無明顯的血清學(xué)反應(yīng)?？捎檬米訉?duì)鼻、喉、氣管進(jìn)行采樣，有時(shí)可以采集支氣管肺泡灌洗保留液。樣本可用套式PCR和定量PCR方法進(jìn)行檢測(cè)。Dominiek博士補(bǔ)充說，有研究表明用口腔液檢測(cè)支原體敏感性低，.穩(wěn)定性差，因此在利用口腔液檢測(cè)支原體時(shí)應(yīng)千萬小心。

Dominiek博士補(bǔ)充說，臨床獸醫(yī)應(yīng)該進(jìn)行一個(gè)綜合的診斷：即根據(jù)臨床癥狀、畜群的健康狀況、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果、剖檢結(jié)果等綜合分析后得出結(jié)論。

10 肺炎支原體的治療

Dominiek博士說，由于支原體沒有細(xì)胞壁，所以作用于細(xì)胞壁的這一類抗生素對(duì)支原體是沒有效果的，如β-內(nèi)酰胺類、青霉素類、頭孢菌素和糖肽類抗生素。Dominiek博士補(bǔ)充說，另外有些報(bào)道已經(jīng)證明，支原體通過突變易對(duì)氟喹諾酮、大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類抗生素產(chǎn)生抗藥性。隨后，Dominiek博士列出了在歐洲進(jìn)行的9種抗生素對(duì)于50株肺炎支原體的最小抑菌濃度試驗(yàn)結(jié)果（圖4），并隨后得出結(jié)論，即支原體對(duì)泰妙菌素比較敏感。

11 肺炎支原體感染的控制方法

Dominiek博士說，對(duì)肺炎支原體感染的控制分以下幾個(gè)方面。一是管理，包括養(yǎng)豬生產(chǎn)流程、飼養(yǎng)密度、生產(chǎn)體系、病弱豬的管理、引種、分胎次飼養(yǎng)、生物安全和其他呼吸道疾病的控制;二是豬舍管理，包括豬舍內(nèi)溫度的設(shè)置、風(fēng)扇管理、出風(fēng)口設(shè)置、窗簾設(shè)置、暖氣容量和豬舍維修等;三是治療：支原體對(duì)截短側(cè)耳素類（如泰妙菌素和沃尼妙林）抗生素高度敏感，因此可以使用此類抗生素進(jìn)行預(yù)防和治療，而其他抗生素需要做藥敏試驗(yàn)。

在談到疫苗控制支原體感染的效果時(shí)，Dominiek博士說生物疫苗不足以凈化感染的豬群，但可以有效地減少臨床癥狀，減輕肺部病變，降低肺部支原體含量（圖5），提高豬的生產(chǎn)性能，減少養(yǎng)豬場(chǎng)生產(chǎn)損失，但不能徹底地切斷支原體的傳播。

12 凈化

在談到豬場(chǎng)對(duì)支原體感染的凈化時(shí)，Dominiek博士指出，豬場(chǎng)是可以實(shí)現(xiàn)支原體感染凈化的，這不單是對(duì)支原體這一種病原體感染實(shí)現(xiàn)凈化，還可以對(duì)其他一些重要病原體實(shí)現(xiàn)凈化。Dominiek博士補(bǔ)充說，需要凈化的豬群必須是高度健康、生產(chǎn)管理較好和抗生素使用本身也不多的豬群。Dominiek博士強(qiáng)調(diào)說，在實(shí)施凈化前，診斷工作非常重要，需要進(jìn)行正確的診斷以確定豬群的感染狀態(tài)，同時(shí)要確保凈化的豬群不能再次轉(zhuǎn)陽;再通過評(píng)估確保豬群有凈化的條件，隨后再實(shí)施凈化。如果豬場(chǎng)在一個(gè)養(yǎng)豬密度非常高的地方，那么凈化后再次轉(zhuǎn)陽的可能性非常高，因此實(shí)施凈化的難度非常大。

13 豬群中的其他支原體

Dominiek博士說，豬群可能還存在絮狀支原體、滑液支原體、豬鼻支原體和豬嗜血支原體（原名“豬附紅細(xì)胞體”），其中絮狀支原體對(duì)豬沒有致病性。

13.1滑液支原體

Dominiek博士說，在8%～9%的屠宰豬群中可以見到非化膿性關(guān)節(jié)炎，其病原體為滑液支原體。此支原體與肺炎支原體一樣定植于上呼吸道，由母豬傳播給仔豬，隨后感染關(guān)節(jié)，3～5月齡時(shí)豬會(huì)出現(xiàn)典型的臨床跛行癥狀，發(fā)生較突然，對(duì)抗生素治療較敏感。

13.2豬鼻支原體

Dominiek博士說，豬鼻支原體一般由母豬傳給仔豬，經(jīng)常在鼻腔中分離到，大多數(shù)表現(xiàn)為亞臨床型，引起的病變?yōu)槎喟l(fā)性漿膜炎，有些菌株可引發(fā)肺炎。研究表明，豬鼻支原體感染豬后，60%的豬會(huì)出現(xiàn)肺炎癥狀，而35%的豬表現(xiàn)健康（Hansen等，2010）。豬鼻支原體與其他病原體混合感染會(huì)引發(fā)臨床癥狀。豬鼻支原體感染可以用抗生素進(jìn)行治療，對(duì)截短側(cè)耳素類（如泰妙菌素）抗生素敏感。然而，日本的研究發(fā)現(xiàn)它對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有耐藥性，且有逐漸增強(qiáng)的趨勢(shì)：1991年- 1995年約10%的菌株耐藥，2002年- 2004年約40%的菌株耐藥;美國和歐洲沒有這方面的報(bào)道。

14 總結(jié)

Dominiek博士在報(bào)告的最后總結(jié)：豬呼吸道疾病綜合征的主要病原體是豬肺炎支原體，它已經(jīng)引起全球范圍內(nèi)養(yǎng)豬生產(chǎn)的巨大經(jīng)濟(jì)損失。肺炎支原體在臨床上與動(dòng)物間存在非常復(fù)雜的相互作用。一個(gè)批次中會(huì)出現(xiàn)多種菌株，菌株越多，引起的肺部病變?cè)絿?yán)重肺炎支原體會(huì)提升其他疾病感染的嚴(yán)重性，與其他病原體混合感染會(huì)引起嚴(yán)重的呼吸道疾病綜合征。治療前最好進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，找到最敏感的抗生素;同時(shí)要加強(qiáng)生產(chǎn)管理和生物安全;可以通過使用商業(yè)化疫苗來減少疾病帶來的經(jīng)濟(jì)損失，減輕臨床癥狀。