張小磊 齊慶超 梁少民 李春發(fā)

摘要 [目的]探討水溫變化對(duì)泥鰍人工孵化產(chǎn)生的影響。[方法]用藥物催產(chǎn)的方法獲得泥鰍受精卵的基礎(chǔ)上，分別于18、20、22、24、26、28、30℃ 7個(gè)水溫梯度及自然水溫下開展泥鰍人工孵化試驗(yàn)，并依試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析了不同水溫條件下泥鰍受精卵孵化時(shí)間、孵化率以及幼魚畸形率、成活率的變化特征。[結(jié)果]泥鰍受精卵在18～30 ℃均能孵化，但水溫變化對(duì)其影響明顯。隨著水溫的升高，受精卵的發(fā)育速度在明顯加快，孵化時(shí)間呈現(xiàn)出冪函數(shù)型縮短趨勢(shì)（Y=104 342X-2.508，R2=0.992）。受精卵的孵化率以及幼魚的成活率在18～30 ℃時(shí)與水溫呈正相關(guān)關(guān)系，而在水溫高于28 ℃時(shí)卻均出現(xiàn)出急劇降低的趨勢(shì)。低溫（18 ℃）和高溫（30 ℃）條件下泥鰍幼魚的畸形率均明顯偏高，尤其是在高溫條件下，致畸作用更為強(qiáng)烈，畸形率達(dá)到86.3%。綜合考慮受精卵孵化時(shí)間、孵化率以及幼魚畸形率、成活率等指標(biāo)后認(rèn)為，在泥鰍人工孵化日常作業(yè)中，孵化水溫不應(yīng)低于18 ℃，最高不宜超過28 ℃，并建議孵化最佳控制水溫在24～26 ℃。

關(guān)鍵詞 水溫；泥鰍；人工孵化；規(guī)?；?/p>

中圖分類號(hào) S966.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2018）31-0071-03

Abstract [Objective] To discuss effects of water temperature on artificial hatching of Misgurnus anguillicaudatus. [Method] On the basis of obtaining fertilized eggs of M. anguillicaudatus by drug stimulation， the artificial incubation of M. anguillicaudatus was carried out under 7 water temperature gradient（18， 20， 2 24， 26， 28， 30 ℃） and natural water temperature. The characteristics of hatching time， hatching rate， malformation rate and survival rate of fertilized eggs of M. anguillicaudatus under different water temperature were analyzed according to the experimental data. [Result] The fertilized eggs of M. anguillicaudatus can hatch at 18-30 ℃， but the change of water temperature has a significant effect on it. With the increase of water temperature， the development rate of fertilized eggs was obviously accelerated， and the hatching time showed a power function shortening trend （Y=104 342X-2.508， R2=0.992）. The hatching rate of fertilized eggs and the survival rate of juvenile fish were positively correlated with the water temperature at 18-30 ℃， but decreased sharply when the water temperature was higher than 28 ℃. The deformity rate of juvenile fish was obviously higher under low temperature （18 ℃） and high temperature （30 ℃）， especially in high temperature， the teratogenicity was stronger， the malformation rate reached 86.3%. [Conclusion] After considering the hatching time， hatching rate， malformation rate and survival rate of juvenile fish， it was concluded that the incubation water temperature should not be lower than 18 ℃ and the highest temperature should not exceed 28 ℃ in the artificial incubation of M. anguillicaudatus. It is suggested that the best water temperature should be 24-26 ℃.

Key words Water temperature；Misgurnus anguillicaudatus；Artificial hatching；Large scale

泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus），又稱“鰍魚”，是一種常見的小型淡水魚類。屬鯉形目、鰍科、泥鰍屬，因其對(duì)生存環(huán)境要求不高、適應(yīng)能力強(qiáng)，而廣泛分布于河川、溝渠、水田、池塘等淡水水域中，且全年均可捕捉采收。泥鰍不但肉質(zhì)鮮嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富，而且還具有多種藥用價(jià)值，素有“水中人參”之稱，深受消費(fèi)者喜愛，市場(chǎng)前景看好[1]。

近年來，隨著氣候變暖、水資源短缺、農(nóng)藥的大規(guī)模使用以及過度捕撈，野生泥鰍資源越來越少，為滿足市場(chǎng)需求，各地紛紛開展了泥鰍的人工養(yǎng)殖，取得了不錯(cuò)的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益[2-5]。但由于目前泥鰍仍以自然孵化為主，因而泥鰍苗種的供應(yīng)無法得到有效保障，這嚴(yán)重制約了泥鰍產(chǎn)業(yè)的規(guī)?；l(fā)展[6-9]。為此，很多技術(shù)人員開始探索泥鰍的人工孵化技術(shù)，并取得了一系列研究成果[10-17]，為實(shí)現(xiàn)了泥鰍的人工孵化提供了諸多經(jīng)驗(yàn)積累和方法借鑒。然而，這些技術(shù)成果多數(shù)是對(duì)生產(chǎn)或試驗(yàn)結(jié)果的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，在運(yùn)用于泥鰍的規(guī)?；a(chǎn)時(shí)候，往往收效甚微。究其原因是由于泥鰍孵化的影響因素眾多并缺少對(duì)它們的深入分析，從而導(dǎo)致研究成果往往顯得粗糙，可操作性較差，在生產(chǎn)實(shí)踐環(huán)節(jié)無法達(dá)到預(yù)期結(jié)果。為此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)泥鰍孵化影響因素的深入分析，開展定量研究，并探討其閾值范圍，以降低孵化風(fēng)險(xiǎn)，提高泥鰍規(guī)模化人工繁育的效率。在影響泥鰍孵化的眾多因素中，水溫是至關(guān)重要的一環(huán)?；诖?，本研究從水溫入手，嘗試探討水溫變化對(duì)泥鰍受精卵的孵化時(shí)間與孵化率以及幼魚的畸形率與成活率的影響，以期豐富人們對(duì)泥鰍人工孵化的認(rèn)識(shí)，并為相關(guān)研究提供實(shí)證參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)場(chǎng)地概況

試驗(yàn)于2017年4—6月進(jìn)行，試驗(yàn)場(chǎng)地位于滎陽(yáng)市王村河南省黃河生態(tài)試驗(yàn)基地。該地屬北溫帶大陸性季風(fēng)氣候，年平均降雨量542.2 mm，年平均氣溫15.6 ℃。場(chǎng)地內(nèi)設(shè)有孵化環(huán)道、蓄水池、供水池等孵化設(shè)施以及水井、水泵、充氧泵等孵化配套設(shè)備。整個(gè)試驗(yàn)場(chǎng)地外架有鋼筋結(jié)構(gòu)塑料大棚，并置有保溫層，用于調(diào)節(jié)光照及溫度。

1.2 試驗(yàn)前期處理

1.2.1 泥鰍親本的選擇。試驗(yàn)的親本來自基地自培，并有少量夠買自周邊村民。選用體型勻稱、無病無傷、體色正常的健壯泥鰍，其中雌鰍腹部要膨大、柔軟而有彈性，看起來顏色微紅，并有透明感；雄鰍要個(gè)體較大、胸鰭追星明顯。

1.2.2 泥鰍親本的培育。將雌雄親本分離，分別置于消毒過的專用培育池中進(jìn)行強(qiáng)化培育。培育池面積以50～100 m2為宜，保持水深在40～120 cm，池底留有約10 cm厚的淤泥層，并設(shè)有進(jìn)、排水口和防逃網(wǎng)。每日早晚各投喂一次，投餌量約占泥鰍總重量的5%，繁殖前增加到7%。保持水質(zhì)“肥”“活”“嫩”“爽”，每周換水1～2次，每次換水量為池水的1/3。

1.2.3 泥鰍親本的催產(chǎn)。采用人工注射的方法進(jìn)行催產(chǎn)。注射藥劑為魚類常用激素，主要有絨毛促性腺激素（HCG）、促黃體素釋放激素類似物（LHRH-A2）、地歐酮（DOM）等，混合配施，每尾親本注射量控制在0.5 mL（可視鰍體大小適當(dāng)調(diào)整）。注射方法為背部肌肉注射法。

1.3 樣品的采集與處理

將親本泥鰍按雌雄1∶1.5的比例配組，放入泥鰍孵化環(huán)道內(nèi)，環(huán)道內(nèi)置有環(huán)形網(wǎng)槽。微流水刺激，待雌鰍上游、雄鰍追逐，纏繞并相互摩擦，進(jìn)入發(fā)情高潮期并在產(chǎn)卵、受精過程結(jié)束后，將親本撈出，受精卵經(jīng)環(huán)形網(wǎng)槽留在孵化環(huán)道內(nèi)。取受精卵置于恒溫水族箱內(nèi)的培養(yǎng)皿中（φ=120 mm，每皿放200～300粒），培養(yǎng)皿需剛好沒入水族箱水面，此時(shí)受精卵因重力沉于皿底，應(yīng)使其分布均勻。受精卵發(fā)育過程中全程觀察，并記錄。

設(shè)置18、20、22、24、26、28和30 ℃ 7個(gè)水溫梯度，微充氣，每個(gè)水溫梯度設(shè)置3個(gè)重復(fù)，同時(shí)設(shè)置自然水溫組（NC），試驗(yàn)期內(nèi)水溫變化范圍為16～28 ℃，平均水溫為24.8 ℃。每日上午更換同水溫梯度試驗(yàn)用水，更換量約為水族箱水位的1/5，并及時(shí)清理死亡的受精卵，保持水質(zhì)，使溶解氧處于6～7 mg/L、pH在 7.2～8.0之間。所有試驗(yàn)用水來自同一水源。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel2007和SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理與統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 水溫對(duì)泥鰍受精卵孵化時(shí)間的影響

不同水溫梯度下泥鰍受精卵的孵化時(shí)間如表1所示?？梢钥闯觯疁貙?duì)泥鰍受精卵的孵化時(shí)間影響明顯，總體來說隨著水溫的變化，泥鰍受精卵的孵化時(shí)間存在顯著的差異。但在24、26 ℃與NC（24.8 ℃）組的水溫梯度下，泥鰍受精卵的孵化時(shí)間卻表現(xiàn)得較為相近，差異并不十分明顯，這可能是由于在這3個(gè)梯度下，水溫較為接近，且均處于泥鰍受精卵孵化的適宜水溫范圍內(nèi)，從而導(dǎo)致了該水溫范圍內(nèi)受精卵孵化時(shí)間的差異與其他水溫區(qū)間相比明顯偏弱。

為了進(jìn)一步探討水溫與泥鰍受精卵孵化時(shí)間之間的關(guān)系，將不同水溫梯度下泥鰍受精卵的孵化時(shí)間置于散點(diǎn)圖上（圖1），可知，受精卵的孵化時(shí)間與水溫之間表現(xiàn)出明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，分析可知它們之間的負(fù)相關(guān)關(guān)系可以用冪函數(shù)來表達(dá)，即：Y=104 342X-2.508（R2=0.992），式中Y為孵化時(shí)間，X為水溫。這表明在試驗(yàn)水溫梯度區(qū)間內(nèi)，隨著水溫的升高，泥鰍受精卵的孵化時(shí)間在縮短，孵化速度在加快。

2.2 水溫對(duì)泥鰍受精卵孵化率的影響

孵化率即受精卵的孵化比率，易受溫度等環(huán)境條件的影響。在本研究中，泥鰍受精卵在各個(gè)溫度梯度下均能正常孵化，但孵化率卻存在顯著差異（表2）。由表2知，受精卵孵化率在30℃時(shí)最低，僅為44.7%，在26 ℃時(shí)最高，達(dá)到91.9%；并且在低溫區(qū)間（16～24 ℃）內(nèi)，隨著水溫的升高，受精卵孵化率在迅速呈直線線性上升（R2=0.991）；在適溫區(qū)間（24～26 ℃）內(nèi)，受精卵孵化率維持在較高水平（90.4%～91.9%），隨水溫變化差異不大；在高溫區(qū)間（26～30 ℃）內(nèi)，隨著水溫的升高，受精卵孵化率先是有所下降，之后急劇降低，這是由于在較高的水溫條件下，受精卵對(duì)溫度更為敏感，受到高溫刺激，受精卵發(fā)育受到抑制，可能未經(jīng)過卵裂就解體了。由此可見，研究樣區(qū)內(nèi)泥鰍受精卵在20～28 ℃水溫區(qū)間內(nèi)均能達(dá)到較高的孵化預(yù)期，且在24～26 ℃水溫區(qū)間內(nèi)能得到更好的孵化結(jié)果。

2.3 水溫對(duì)泥鰍幼魚畸形率的影響

受精卵孵化為泥鰍幼魚后，畸形能大大降低幼魚的品相，并對(duì)成活率構(gòu)成極大的影響。因此，降低畸形率是泥鰍孵化工作的一項(xiàng)重要內(nèi)容。本研究中，不同水溫對(duì)泥鰍幼魚畸形率的影響各不相同（圖2），具體來說，隨著水溫的升高，幼魚畸形率在顯著下降；當(dāng)水溫處于適溫區(qū)間（24～26 ℃）時(shí)，幼魚畸形率便會(huì)趨于平緩，平均為8.4%，并在26 ℃時(shí)達(dá)到最低，為7.0%；但是隨著水溫的繼續(xù)升高，幼魚畸形率卻在急劇上升，當(dāng)水溫上升到30 ℃時(shí)，幼魚畸形率達(dá)到最高，為86.3%。這表明，低溫和高溫條件均能對(duì)泥鰍的幼魚產(chǎn)生致畸作用，尤其是在高溫條件下，致畸作用更為明顯，此時(shí)受精卵孵出的幼魚大部分尾部極短，身體呈“C”形，且心跳微弱，活動(dòng)能力差。因此，應(yīng)在適溫條件下進(jìn)行泥鰍受精卵的孵化，避免長(zhǎng)時(shí)間極端水溫刺激，從而避免幼魚高畸形率的出現(xiàn)。

2.4 水溫對(duì)泥鰍幼魚成活率的影響

幼魚成活率是衡量泥鰍人工孵化成敗的一項(xiàng)關(guān)鍵指標(biāo)。本研究中不同水溫梯度下泥鰍幼魚的成活率（指幼魚孵出3 d后的成活率，下同）具有明顯的差異（圖3），隨著水溫的升高，呈現(xiàn)出先上升再下降的變化趨勢(shì)。其中成活率最大值為79.4%，對(duì)應(yīng)水溫26 ℃；最小值為29.9%，對(duì)應(yīng)水溫30 ℃；并且在適溫區(qū)間（24～26 ℃）內(nèi)，幼魚的平均成活率為78.1%，與同類研究相比處于較高水平[18]。

上述分析表明，適當(dāng)?shù)乃疁兀?4～26 ℃）刺激能夠提高泥鰍幼魚的成活率，并且在一定的水溫范圍內(nèi)，泥鰍幼魚的成活率與水溫呈正相關(guān)關(guān)系。但水溫越低，泥鰍受精卵的孵化時(shí)間變得越長(zhǎng)（表1），孵出幼魚的畸形率也越高（圖2），這不利于提高泥鰍人工孵化的生產(chǎn)效率。然而在水溫達(dá)到30 ℃以上時(shí)，大部分泥鰍受精卵不能得到正常發(fā)育（表2），其余的受精卵雖然能夠孵出幼魚，但畸形率卻高達(dá)86.3%，致使大量剛孵出的幼魚在孵化結(jié)束后2 d內(nèi)相繼死亡，并導(dǎo)致幼魚成活率僅有29.9%（圖2），從而使此水溫條件下的泥鰍人工孵化喪失了實(shí)踐意義。

3 討論與結(jié)論

（1）泥鰍受精卵在18～30 ℃均能孵化出幼魚，但孵化時(shí)間受水溫影響明顯，隨著水溫的升高，兩者之間呈現(xiàn)出冪函 數(shù)型負(fù)相關(guān)關(guān)系（Y=104 342X-2.508，R2=0.992）。

（2）在一定的水溫范圍內(nèi)（18～26 ℃），泥鰍受精卵的孵化率以及幼魚的成活率與水溫呈正相關(guān)關(guān)系，但隨著水溫持續(xù)升高（高于28 ℃），它們均表現(xiàn)出急劇降低的趨勢(shì)。

（3）水溫對(duì)泥鰍幼魚的畸形率也能產(chǎn)生明顯影響，在低溫（18 ℃）和高溫（30 ℃）條件下致畸作用更為明顯，尤其是在高溫條件下，致畸作用極為強(qiáng)烈。

（4）在泥鰍人工孵化日常作業(yè)中，孵化水溫不應(yīng)低于18℃，最高不宜超過28℃，綜合考慮受精卵孵化時(shí)間、孵化率以及幼魚畸形率、成活率等指標(biāo)，建議孵化最佳控制水溫在24～26 ℃。

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