注射用左卡尼汀含量測(cè)定方法學(xué)建立

于梅

摘 要： 目的：本文通過建立高相液相色譜法對(duì)注射用左卡尼汀含量的測(cè)定，并對(duì)建立的方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。方法：Agela XBP-C18色譜柱，檢測(cè)波長(zhǎng)：225nm；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：20μl；柱溫：室溫。結(jié)果：濃度在1.19～8.00mg/ml范圍內(nèi)，Y=144.43X+7.2867，r為0.9997，線性關(guān)系良好，中間精密度平均含量為100.9%，RSD為0.22%，重復(fù)性RSD為0.43%；平均回收率為100.10%，RSD為0.24%。結(jié)論 高效液相色譜法檢測(cè)注射用左卡尼汀的含量具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性強(qiáng)等特點(diǎn)，值得推廣應(yīng)用使用此方法檢測(cè)注射用左卡尼汀含量。

關(guān)鍵詞： 高相液相色譜法；注射用左卡尼?。缓繙y(cè)定

左卡尼汀是哺乳動(dòng)物能量代謝的必需的體內(nèi)天然物質(zhì)，其主要功能是促進(jìn)脂類代謝。它既能將長(zhǎng)鏈脂肪酸帶進(jìn)線粒體基質(zhì)，并促進(jìn)脂類氧化分解，為人體內(nèi)的細(xì)胞提供足夠的能量，又能將其線粒體內(nèi)產(chǎn)生的短鏈脂?；敵觥１酒返难a(bǔ)充可緩解其因體內(nèi)缺乏引起的骨骼肌和心肌脂肪代謝紊亂等組織的功能障礙，且注射用左卡尼汀也未見不良反應(yīng)，療效較好，臨床應(yīng)用本品的患者較多[1]。因此為了臨床用藥安全，本文建立了注射用左卡尼汀的含量測(cè)定方法，能夠準(zhǔn)確的檢測(cè)。

1.儀器與試藥

1.1儀器

Agilent-1200型高效液相色譜儀. 紫外檢測(cè)器； XS105DU電子天平：梅特勒公司

1.2試藥

試劑：磷酸（分析純）：哈爾濱化工化學(xué)試劑廠；甲醇（色譜純）：SK Chemicals Ulsan

庚烷磺酸鈉（色譜純）：山東禹王實(shí)業(yè)有限公司化工分公司；水：注射用水。

對(duì)照品：來源：中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：101041-201503，純度99.9%。

2.方法與結(jié)果

2.1色譜條件系統(tǒng)適用性

色譜柱：1、Agela XBP-C18，5μm， 4.6×250mm。流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸鹽緩沖液（取磷酸11.5ml，加1mol/L氫氧化鈉溶液100ml，加水稀釋至2000ml，用磷酸或1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2.4）-甲醇-庚烷磺酸鈉（82ml：18ml：0.4g）。檢測(cè)波長(zhǎng)：225nm；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：20μl；柱溫：室溫

2.2測(cè)定法

精密稱取本品適量，加水稀釋制成加水溶解并制成每1ml中含左卡尼汀4mg的溶液，搖勻。精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取左卡尼汀對(duì)照品適量，加水溶解并制成每1ml中含左卡尼汀4mg的溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中左卡尼汀的含量[2]。

3.方法學(xué)驗(yàn)證

3.1 方法專屬性試驗(yàn)

精密稱取空白輔料和量取空白溶劑20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。在左卡尼汀主峰位置沒有色譜峰出現(xiàn)，說明溶劑和空白輔料對(duì)含量測(cè)定無干擾。專屬性較好。

3.2線性關(guān)系試驗(yàn)

精密稱取左卡尼汀對(duì)照品（含量：99.9%）603.21mg，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1.0 ml、1.7 ml、3.0 ml、3.3 ml、5.0 ml、6.7ml，分別置10ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成系列線性溶液。分別吸取上述系列對(duì)照品溶液各20μl注入色譜儀，記錄色譜圖。

結(jié)果表明：左卡尼汀溶液濃度在1.19～8.00mg/ml范圍內(nèi)，Y=144.43X+7.2867，r為0.9997，線性關(guān)系良好，可滿足含量測(cè)定的要求[3]。

3.3進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

對(duì)照溶液配制：取對(duì)照品40.05mg，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋至刻度，配成每1ml約含4mg的溶液。取上述對(duì)照品溶液，照上述色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果RSD為0.66%：本品含量測(cè)定方法精密度好。

3.4中間精密度試驗(yàn)

考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，在同一實(shí)驗(yàn)室，不同日期、由不同分析人員、用不同實(shí)驗(yàn)設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度。

取本品（批號(hào)：170629），照上述色譜條件，進(jìn)行試驗(yàn)。計(jì)算中間精密度平均值及RSD 結(jié)果表明：有不同分析人員，在不同日期不同設(shè)備測(cè)得的左卡尼汀注射液平均含量為100.9%，RSD為0.22%，該試驗(yàn)符合測(cè)定要求。

3.5重復(fù)性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：170629）6份，分別用流動(dòng)相稀釋制成每1ml約含左卡尼汀4mg的溶液，分別搖勻，作為供試溶液，分別精密吸取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果：RSD為0.43%，本品含量測(cè)定的重復(fù)性良好。

3.6回收率試驗(yàn)

分別精密稱取左卡尼汀原料藥（含量：98.96%）32.33mg、40.42mg、48.50mg，置于10ml量瓶中，制成含左卡尼汀分別為標(biāo)示量的80%、100%、120%的供試品溶液，每個(gè)濃度各3份。另精密稱取對(duì)照品約40mg，置于10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。分別精密量取供試品溶液、對(duì)照品溶液各20μl，照上述色譜條件試驗(yàn)，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。由測(cè)得量與加入量的比值，即得回收率[4]。

結(jié)果表明：平均回收率為100.10%，RSD為0.24%，符合準(zhǔn)確度試驗(yàn)要求。

3.7溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：170629），照上述色譜條件，室溫放置，分別于0、1、2、4、6、8小時(shí)進(jìn)樣，試驗(yàn)結(jié)果：供試品溶液在8個(gè)小時(shí)內(nèi)測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.28%，結(jié)果表明供試品溶液在室溫放置8小時(shí)較穩(wěn)定。

3.8樣品含量測(cè)定

精密稱取適量，用流動(dòng)相稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液，作為供試品溶液；另精密稱取左卡尼汀對(duì)照品適量，用流動(dòng)相稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。左尼汀注射液樣品3批及被仿制藥，依法測(cè)定，三批供供試品及被仿制藥的含量測(cè)定結(jié)果分別是：供試品：99.85%、100.22%、99.46%；被仿制藥：98.77%。%結(jié)果表明：三批供試品及被仿制藥含量均不少于90.0% [5]。

4.結(jié)論

通過對(duì)注射用左卡尼汀的含量測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果：線性1.19～8.00mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，且重復(fù)性、準(zhǔn)確度、中間精密度較高，溶液在8小時(shí)能穩(wěn)定。結(jié)果表明此方法能準(zhǔn)確的測(cè)定注射用左卡尼汀的含量，因此該方法可行性較高。建議使用此方法測(cè)定注射用左卡尼汀的含量。

參考文獻(xiàn)

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[2]高立軍 王濤 全東琴高效液相色譜法測(cè)定左卡尼汀注射液的含量 科學(xué)技術(shù)與工程2011， 11（30）.

[3]李峰 高效液相色譜法用于左卡尼汀注射液的含量檢測(cè) 中國基層醫(yī)藥 2010， 17（16）.

[4]袁彩君 朱天新高效液相色譜法測(cè)定左卡尼汀注射液的含量及雜質(zhì)A 中國當(dāng)代醫(yī)藥 2015， （19）.

[5] 耿銀銀 許麗曉 方會(huì)超 王莉 劉萬卉 親水作用色譜法測(cè)定左卡尼汀注射液含量及雜質(zhì)A 煙臺(tái)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)與工程版） 2017， 30（3）.