徐建強，張呂醉，唐慧驥，許道超，范一霖，李文亮

(1.河南科技大學林學院，河南 洛陽 471003； 2.洛陽出入境檢驗檢疫局，河南 洛陽 471003； 3.河南出入境檢驗檢疫局，河南 鄭州 450003)

牡丹PaeoniasuffruticosaAndr.在我國栽培歷史悠久，栽培規(guī)模巨大，形成了以中原、西北、江南、西南為主要分布區(qū)域的四大牡丹品種群[1]。在河南洛陽，牡丹種植面積700 hm2，分布于70多處種植基地(園區(qū))[2]。洛陽牡丹除滿足國內市場外，還出口到法國、日本、美國、意大利等國家，取得了良好的經濟效益[2]。

牡丹生長過程中會受到多種病原物的侵染，以葉部病害發(fā)生較為普遍，且病斑常常連片，病害種類不易區(qū)分[3]；而根莖部病害的發(fā)生則可直接導致牡丹整株枯死，對牡丹產業(yè)的發(fā)展危害更大[4]。牡丹病害輕則減少來年開花數量，降低開花質量，重則造成大量植株枯死，對旅游產業(yè)的發(fā)展和牡丹出口造成巨大阻礙[5]。

國內外關于牡丹病害的研究總體有限：國內主要集中在幾種病害上，缺乏系統(tǒng)的研究與總結[5]；國外僅限于對牡丹的抗病育種、生物學特性等方面，對牡丹病害的研究鮮有報道[6]。本文在調查洛陽市當前牡丹病害發(fā)生危害的基礎上，根據各病害的癥狀特點，編制了牡丹葉部及根莖部真菌病害的檢索表，為生產及植物檢疫部門快速、準確地診斷病害提供參考。

1 材料與方法

1.1 調查地點 洛陽市6處主要牡丹種植園，其中：西苑公園、王城公園、牡丹公園3處建園時間久遠，牡丹栽培歷史達60年之久，占地面積分別為1 hm2、1.33 hm2及0.57 hm2，分別有牡丹品種200、320、200個以上；國際牡丹園，面積25.33 hm2，栽植國內牡丹品種300多個，日本、法國、美國等牡丹品種100多個，以及中國芍藥品種300多個，該園多次進行航天牡丹育種且效果顯著；中國國花園建于2001年，占地103.2 hm2，1 000多個牡丹品種；隋唐城遺址植物園千姿牡丹園，始建于2005年，占地23.33 hm2，1258個品種。

1.2 調查方法 于2014、2015、2016每年的7月份，每周六到各牡丹園隨機調查牡丹病害；走訪各牡丹園生產技術人員，了解病害類型、發(fā)生危害程度、發(fā)病時間等。對于葉部，觀察葉片有無變色、壞死、畸形等病狀；對于根莖部病害，觀察病害對植株的影響，如萎蔫或畸形，檢查發(fā)病部位，記載病狀(如斑點、腐爛、枯枝)、病征(包括菌絲體、菌核、小黑點等)。將癥狀明顯的病害標本帶回實驗室鏡檢。

1.3 病害診斷方法 對于發(fā)病部位癥狀明顯的，直接鏡檢；癥狀不明顯的先保濕培養(yǎng)，待產生典型癥狀后，再行鏡檢。按照發(fā)病癥狀類型，如是否產生霉狀物、粉狀物、小黑點等，采用挑、刮或切等方法，在顯微鏡下觀察病菌的菌絲及分生孢子形態(tài)，根據孢子形態(tài)對病菌開展鑒定。

2 結果與分析

2.1 牡丹葉部病害

2.1.1 牡丹葉霉病Cladosporiumpaeoniae該病目前在洛陽市牡丹種植園發(fā)生最為普遍，危害也最為嚴重，發(fā)病率可達到90%以上，在單個葉片上的發(fā)病面積可達到60%。該病自5月份前后開始發(fā)生，8、9月份達到發(fā)病高峰；某些品種如海黃，染上此病，可導致葉片大面積枯死，遠望如同葉片枯焦一般。該病原菌也可危害芍藥，在芍藥上形成紅色的病斑，故稱為芍藥紅斑病[5]；而在牡丹上，病斑紅色并不明顯，稱為牡丹葉霉病。

病斑圓形或近圓形，多在葉片中間發(fā)病，紅褐色至黑褐色，病部葉片背面為淺褐色，空氣濕度較大時，病斑正面和背面均出現墨綠色霉狀物，為病原菌的分生孢子和分生孢子梗；嚴重時，多個病斑聯合引起葉片焦枯，提早落葉，常在發(fā)病后期穿孔。

芍藥和牡丹上的病原菌相同，均為牡丹枝孢菌(C.paeoniae)[3]：分生孢子梗褐色至深褐色，線性或彎曲狀，單生或簇生，其一側有節(jié)狀膨大物；分生孢子淡褐色，卵形或紡錘形，單胞或多胞，單生或鏈狀著生。

2.1.2 牡丹黑斑病Alternariaspp. 為害較為嚴重，初期在葉片上形成圓形小病斑，灰黑色或黑褐色，中央顏色稍淺，后逐漸擴大為圓形或不規(guī)則形病斑，黑褐色，上著生有墨黑色霉狀物，手摸病斑有粗糙感，病斑常脫落造成穿孔。8月份為發(fā)病盛期，重病植株在后期葉片全部枯死，脫落。

病原菌為鏈格孢屬Alternaria的菌種[3]：分生孢子梗淡褐色至褐色，由菌絲上生出，或生于子座上，分枝或不分枝，與菌絲區(qū)別不明顯；頂生分生孢子淡褐色至深褐色，卵圓形或倒棍棒狀，有縱橫隔膜，常鏈狀著生；表面光滑或有疣，頂端常具喙狀細胞，有長喙與短喙之分。

2.1.3 牡丹腔孢葉斑病Hainesialythri該病可危害枝條和葉片：在葉片上主要形成圓形或近圓形褐色病斑，稍凹陷，后期病斑上可產生輪狀排列的黑褐色的瘤狀小點；危害枝條時，在樹皮上出現灰褐色病斑，組織松軟，稍隆起，縱裂，在樹皮下可產生褐色的瘤狀小點，即病菌的分生孢子座。病原菌為牡丹絨邊膠盤孢Hainesialythri[12]。目前，該病在河南洛陽牡丹種植園中發(fā)生普遍，葉片發(fā)病率在20%～48%，危害日益加重。

2.1.4 牡丹葉部真菌病害檢索表 在對牡丹葉部各真菌病害的癥狀進行仔細分析的基礎上，參照相關文獻[3]，編制了牡丹葉部真菌病害的檢索表。

牡丹葉部真菌病害檢索表

其它牡丹葉部真菌病害還包括白粉病Erysiphepaeoniae、黃斑病Phyllostictacommonsii、褐斑病Cercosporapaeoniae、灰霉病Botrytispaeoniae、輪紋斑病Pestalotiopsispaeoniae以及葉斑病Seimatosporiumsp.[3]。由于這些病害在牡丹園發(fā)生不普遍，危害較輕，不做詳述。

2.1.5 牡丹病毒病 在調查過程中，偶爾能發(fā)現受病毒感染的牡丹植株，其癥狀主要表現為黃色花葉并伴有少量的花藥敗育。

2.2 牡丹根莖部病害 調查發(fā)現，洛陽市牡丹根部病害主要包括根腐病Fusariumsolani、白絹病Sclerotiumrolfsii、立枯病Rhizoctaoniasolani等3種，其中以牡丹根腐病發(fā)病最重[4]；牡丹莖部真菌病害6種，分別為葉霉病C.paeoniae、腔孢葉斑病H.lythri、灰霉病B.paeoniae、輪紋斑病P.paeoniae、潰瘍病Botryosphaeriasp.和牡丹枝枯病，其中以腔孢葉斑病和潰瘍病發(fā)病最重[4]。葉霉病、灰霉病、腔孢葉斑病、輪紋斑病除危害葉片外，還可危害莖桿。

2.2.1 牡丹根腐病F.solani該病是為害牡丹根部較嚴重的病害之一。植株染病后，地上部分長勢衰弱，葉片發(fā)黃，嚴重時葉片和枝條枯死，甚至整株枯死。根頸部、主根、支根和須根均可發(fā)病，其中老根發(fā)病最為嚴重。根部染病初期，在根皮上產生不規(guī)則形黑斑，后隨著病斑逐漸擴展，由木質部擴展至髓部，根部慢慢變黑腐爛，肉質根剝落，造成植株失水萎蔫枯死。發(fā)病較重的地塊能造成大面積植株死亡[4]。

2.2.2 牡丹潰瘍病Botryosphaeriasp. 該病發(fā)病嚴重，主要危害莖部，亦能侵染葉片。發(fā)病初期出現褐色小斑點，后逐漸擴展成橢圓形、梭形或不規(guī)則形，紫褐色或黑色病斑，中間灰白色，凹陷成潰瘍狀，濕度高時病斑邊緣形成不規(guī)則形水漬狀病斑，呈水泡狀，后期在病部皮層下往往形成許多針狀小黑點，埋生或半埋生，為病原菌的分生孢子器或子囊殼，嚴重者病斑表皮開裂甚至枝條枯死。輕度發(fā)病的植株抽枝較慢，花蕾較小，開花遲緩；重度發(fā)病的植株鱗芽萎縮，不能抽枝或抽枝后不能開花，萎蔫青枯，造成單株枝條稀疏、甚至植株枯死[4]。

2.2.3 牡丹根莖部真菌病害檢索表 其它根莖部病害發(fā)生較少，危害較輕，不再詳述。在對牡丹根莖部各真菌病害的癥狀進行仔細分析的基礎上，參照相關文獻[4]，編制了牡丹根莖部真菌病害的檢索表。

牡丹根莖部真菌病害檢索表

2.2.4 牡丹根結線蟲病 在調查過程中，發(fā)現有些牡丹植株地上部分枯死，拔出后可以明顯看到牡丹根部側根根系癭瘤累累、根結連結成串，后期癭瘤龜裂、腐爛。實驗室解剖根結，在體式顯微鏡下觀察，可以看到線蟲的雌蟲。由于線蟲病發(fā)生隱秘，僅通過觀察牡丹地上部分，不易分析牡丹根結線蟲病的發(fā)生危害程度。

3 結論與討論

本文依據病害癥狀鑒定出牡丹葉部真菌病害9種，偶爾能發(fā)現受病毒感染的牡丹葉片；根部真菌病害3種，線蟲病害1種；莖部真菌病害6種。目前，葉霉病、黑斑病、腔孢葉斑病為害葉片較重；根腐病危害根部較重；腔孢葉斑病和潰瘍病危害莖部較重。依據各病害的典型癥狀，編制了牡丹葉部、根莖部真菌病害的檢索表，為病害的診斷提供參考。

牡丹性較耐寒，不耐濕熱[1]。牡丹7月份后發(fā)生的葉片枯死是侵染性病害和非侵染性病害共同作用的結果：夏季7～8月份溫度高，葉片發(fā)生枯焦，導致牡丹生長勢衰弱，從而利于弱寄生真菌侵染，引起病害發(fā)生，如鏈格孢菌(可引起牡丹黑斑病)、斑點葉點霉(可引起牡丹黃斑病)；而侵染性病害的暴發(fā)流行則可使發(fā)病面積擴大，進一步降低牡丹生長勢，導致牡丹更易受到不良環(huán)境條件的影響(高溫)。許多牡丹種植園通過搭遮陽棚，不但能延長來年牡丹花期，且能降低7～8月牡丹葉片溫度，防止葉片枯焦，有利于牡丹生長勢的維持，降低病菌的侵染機率[13]。調查發(fā)現，生長在遮陽棚或大樹樹蔭下的牡丹，長勢普遍比裸露的牡丹長勢好。

牡丹葉部病害多發(fā)生在夏秋季，除了搭遮陽棚降低牡丹園溫度外，秋季清除牡丹園的病株殘體、做好田園衛(wèi)生，對病害防治也有非常好的效果；但在病害暴發(fā)流行時藥劑防治是必不可少的手段[14]；由于葉部病害常?；旌习l(fā)生，對牡丹葉部病害宜采用通過藥劑復配來達到綜合防控的目的。而對于牡丹根莖部病害，由于其易導致整株枯死，故病害發(fā)生前的早期診斷非常關鍵：一旦發(fā)現病害后，及早采用灌根或涂抹的方法，會對根莖部病害有一定的防控效果。

對牡丹病害的診斷是防治及出口檢疫時非常重要的一環(huán)。本文編制的檢索表可為牡丹病害診斷提供參考。但生產中，牡丹病害在發(fā)病前期、中期及后期的癥狀表現并不相同，且多數時候多種病害混合發(fā)生，病征往往又不太典型，這均給牡丹病害診斷帶來很大困難。癥狀診斷是病害識別的第一步，但為了獲得確切的病原菌信息，有必要借助于分子生物學、血清學等技術對病害做進一步確診。

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