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      HPLC法測定蒙藥材胡枝子不同部位中槲皮素的含量

      2018-07-02 01:39:48陳廣榮張栓珍
      中國民族醫(yī)藥雜志 2018年4期
      關鍵詞:胡枝子內蒙古自治區(qū)槲皮素

      鄭 敏 陳廣榮 張栓珍 劉 靜

      (1.內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院,內蒙古 呼和浩特 010020; 2.內蒙古自治區(qū)醫(yī)科大學附屬人民醫(yī)院,內蒙古 呼和浩特 010020; 3.內蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院,內蒙古 呼和浩特 010020)

      本品系蒙醫(yī)習用藥材(蒙名胡吉斯)為豆科植物胡枝子Lespedeza bicolor Turcz.,別名二色胡枝子、隨軍茶、橫條。全區(qū)都有分布,生于丘陵坡地、灌木叢中。胡枝子全株能入藥。具有潤肺解熱、利尿止血,用于感冒發(fā)熱,眩暈頭痛,咳嗦,尿路感染[1]。胡枝子化學成分包括黃酮、生物堿、萜類、有機酸及甾醇類等,以上成分具有抗炎抑菌、降血糖、抗氧化、抗輻射、抗癌、抗腫瘤以及增強免疫能力等藥理活性[2]。槲皮素可作為藥材質量控制成分。

      1 儀器與試劑

      1.1 儀器 1100型高效液相色譜儀 (美國安捷倫公司),TJ-912型色譜分析平臺(太極計算機公司), 色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm,5μm,蘭州化物所)。

      1.2 試藥 槲皮素(0081-9304)對照品由中國藥品生物制品檢定所提供,甲醇為色譜純,其他試劑均為分析純,水為純化水;胡枝子采自內蒙古大青山壩口子。

      2 實驗方法與結果

      2.1 色譜條件 色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm,5μm),流動相:甲醇-水-磷酸(300∶250∶1),波長:360nm,進樣量:10μL。在此條件下樣品中槲皮素與其它組分有較好的分離,見圖1。

      2.2 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒質量的槲皮素對照品適量,置棕色量瓶中,甲醇溶解,配制成1mL含0.058 mg 槲皮素溶液,作為對照品溶液。

      2.3 供試品溶液的制備 取本品花、葉、莖、根,粉碎,過100目篩,精密稱定0.5g,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇10mL,稱定質量,超聲處理30min ,放冷,稱重,用甲醇補足減失的質量,搖勻, 濾過,取續(xù)濾液備用,即得。

      2.4 線性關系考察 分別精密量取槲皮素對照品溶液0.5,1,2,4,8μL,按上述色譜條件進行測定。結果,在0.029 ~0.464mg·mL-1濃度范圍內以峰面積(A)與對照品質量濃度(C)進行回歸,其線性關系良好。回歸方程:A=25177834C -295090, r=0.999。

      2.5 穩(wěn)定性考察 取同1份供試品溶液(葉),分別在0,1,2,4,8h進樣測定,以槲皮素峰面積值計算RSD=0.71%。結果表明,供試品溶液在8h內穩(wěn)定。

      2.6 精密度實驗及重復性考察 吸取同一批供試品溶液(葉),在上述色譜條件下重復進樣6次,測得槲皮素峰面積RSD=0.68%,結果,精密度考察符合要求。取同批藥材(葉)按2.3項下平行制備6份樣品溶液,并按2.1項下測定,槲皮素的平均含量=0.27%, RSD=0.78%,重復性考察符合要求。

      2.7 加樣回收率測定 取同批藥材地上部位已知含量的樣品6份,每份取約200mg,精密稱定,依次分別加入1mL(每mL含槲皮素0.058 mg)對照品溶液,按供試品溶液的制備操作,測定含量,計算回收率。槲皮素平均回收率為98.6%,RSD=1.88%。準確度測定符合要求。

      3 樣品測定

      取胡枝子藥材不同部位,按2.3 項下方法制備供試品溶液,按擬定的色譜條件測定槲皮素含量,花0.20%,葉0.27%,莖0.10% ,根0.01%,槲皮素平均含量為0.145%。

      4 結論

      本文對胡枝子中槲皮素含量進行測定研究,研究結果表明,槲皮素含量,花0.20%,葉0.27%,莖0.10% ,根0.01%,槲皮素平均含量為0.145%。采用HPLC法測定胡枝子槲皮素含量,方法簡便、快速、準確,可作為胡枝子質量控制方法之一。

      [1]內蒙古自治區(qū)衛(wèi)生局.內蒙古中草藥[M].內蒙古自治區(qū)人民出版社,1972,297.

      [2] 張帆,齊小花,鄒明強,等.胡枝子中化學成分及黃酮類物質提取與分析的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(12):2885.

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