文芬,張淼,邵雪梅,龔倩,魏陳
(四川旅游學(xué)院食品學(xué)院,四川成都610100)
芝麻是中國(guó)主要油料作物之一,其種子含油量約為55%,具有廣泛良好的應(yīng)用前景,其壓榨產(chǎn)物芝麻油也具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。中國(guó)年產(chǎn)芝麻65萬(wàn)噸,居世界第一[1]。芝麻榨油后副產(chǎn)物芝麻餅粕是一種新型高營(yíng)養(yǎng)的植物蛋白資源,大多數(shù)用于動(dòng)物飼料和農(nóng)業(yè)肥料,因此導(dǎo)致了嚴(yán)重的資源浪費(fèi)。楊杰等[2]對(duì)芝麻餅粕中的蛋白質(zhì)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn),研究結(jié)果為L(zhǎng)D50>15 000 mg/kg,屬于無(wú)毒級(jí)。因此芝麻餅粕中的蛋白質(zhì)可以作為一種安全的優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來(lái)源。據(jù)有關(guān)報(bào)道,芝麻蛋白已部分用作飲料和面包生產(chǎn)的膳食補(bǔ)充劑[3]。
芝麻蛋白具有很好的互補(bǔ)性,其含有的甲硫氨酸、色氨酸等含硫氨基酸比一般植物蛋白高,更容易被機(jī)體吸收和利用。芝麻蛋白還含有人體必需的8種氨基酸,約占人體總蛋白的30%。另外兩種氨基酸含量接近,其他6種含量均高于一般植物蛋白,且無(wú)抗?fàn)I養(yǎng)因子。因此,與世界衛(wèi)生組織推薦的人類(lèi)蛋白標(biāo)準(zhǔn)相比,芝麻蛋白質(zhì)組分是一致的,屬于完整的蛋白質(zhì)組分。除此之外,芝麻蛋白具有良好的溶解性、吸水性、吸油性、乳化性、發(fā)泡性、粘度和熱凝極性等功能性質(zhì),可運(yùn)用于肉制品、谷類(lèi)食品、烘焙食品、植物蛋白飲品、小吃、副食中。
芝麻蛋白質(zhì)含量根據(jù)品種和來(lái)源而異,一般為20%~22%。但芝麻餅粕中蛋白質(zhì)含量最高為38%~50%[4]。芝麻餅粕中主要成分除了蛋白質(zhì)含量較高外,還有其他營(yíng)養(yǎng)成分如纖維素、維生素類(lèi)和木脂素類(lèi)等物質(zhì),但植物蛋白結(jié)構(gòu)復(fù)雜,較高的相對(duì)分子質(zhì)量,不容易被機(jī)體消化吸收。酶水解制備的蛋白質(zhì)肽不僅有利于人體吸收,而且具有抗氧化、抑制血糖、血脂、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生理功能。芝麻餅粕經(jīng)過(guò)脫脂處理后,脂肪含量由14.13%下降5.32%,水分含量由15.37%下降到9.11%,而碳水化合物含量由22.31%升高到(28.47±0.14)%,蛋白質(zhì)含量由42.76%升高53.82%。
芝麻餅粕制備方法不同,其營(yíng)養(yǎng)成分也不同。根據(jù)榨油方式及是否脫皮將制備常見(jiàn)的芝麻餅粕制備方法分為以下4種[5]。
1.2.1 冷榨法
將一定量的芝麻于螺旋榨油機(jī)中榨取2次,榨取溫度在40℃以下,轉(zhuǎn)速為30 r/min,將榨取后的芝麻餅粕用粉碎機(jī)粉碎過(guò)篩,再以丁烷為溶劑,溶劑體積比為1∶6,溫度為50℃的條件下每30分鐘萃取一次,一共萃取5次,此方法所得即為冷榨法芝麻餅粕。
1.2.2 熱榨法
芝麻在溫度180℃條件下烘焙2 h后于螺旋榨油機(jī)中榨取2次,將榨取后的芝麻餅粕粉碎,過(guò)篩后亞臨界萃取5次(條件同冷榨法),此法所得即為熱榨法芝麻餅粕。
1.2.3 干法脫皮
取一定量的芝麻,加入10%的蒸餾水充分潤(rùn)濕,在60℃條件下烘焙3 h,冷卻至室溫并控制水分在7.0%左右,將烘焙后的芝麻于碾米機(jī)中脫皮使其脫皮率約80%,粉碎過(guò)篩,再亞臨界萃取5次(條件同冷榨法),此法所得即為干法脫皮芝麻餅粕。
1.2.4 濕法脫皮
取一定量的芝麻,用0.4%的氫氧化鈉溶液浸泡2 min,浸泡后的芝麻于碾米機(jī)中脫皮,使其脫皮率達(dá)到98%,再在溫度為50℃條件下烘焙12 h,粉碎過(guò)篩再亞臨界萃取5次(條件同冷榨法),此法所得即為濕法脫皮芝麻餅粕。
不同制備方法下芝麻餅粕的基本組分見(jiàn)表1。
由表1可以看出脫皮后的芝麻餅粕中蛋白質(zhì)含量較高,粗纖維和灰分含量較低;冷榨法芝麻餅粕中粗蛋白、粗纖維和草酸的含量均高于熱榨法芝麻餅粕;濕法脫皮芝麻餅粕中蛋白質(zhì)的含量較干法脫皮芝麻餅粕高。
表1 不同制備方法芝麻餅粕的基本組分Table1 The basic components of sesame cake with different preparation methods%
近幾年對(duì)于芝麻蛋白的研究主要是在提取方法和優(yōu)化方法兩個(gè)方面。提取芝麻蛋白的方法不僅有堿溶酸沉法,還有水酶法、有機(jī)溶劑洗滌法和膜過(guò)濾法,但后幾種方法應(yīng)用相對(duì)較少。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)于堿溶酸沉法及其影響因素的研究以及應(yīng)用堿性蛋白酶和糖化酶等酶來(lái)優(yōu)化提取方法相對(duì)較多。
提取芝麻蛋白的生物提取法主要是通過(guò)酶類(lèi)物質(zhì)將芝麻餅粕中的蛋白質(zhì)溶出,目前主要有糖化酶酶解法和水酶法。
2.1.1 糖化酶酶解法[6]
將脫脂后的芝麻餅粕用粉碎機(jī)粉碎,按料液比為1∶10(g/mL)加入蒸餾水溶解,調(diào)節(jié) pH 值為 4.0,利用超聲波細(xì)胞提取儀堿提后在轉(zhuǎn)速為4 800 r/min條件下離心10 min,取上清液,用4%鹽酸使蛋白質(zhì)沉淀,再在4 800 r/min下離心10 min,取上清液后沉淀,再加水溶解,加入糖化酶(80 U/g)混勻,4 800 r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min,取上清液沉淀,取出沉淀,干燥后即為芝麻蛋白。
該方法提取芝麻蛋白的提取率為77.56%。
2.1.2 水酶法
水酶法是在機(jī)械破碎的基礎(chǔ)上,利用蛋白酶切斷芝麻蛋白的肽鏈,提高蛋白質(zhì)的溶出率,促進(jìn)芝麻蛋白的提取。該法提取能夠同時(shí)獲得芝麻油和蛋白質(zhì),再經(jīng)過(guò)水提取、復(fù)合酶水解芝麻細(xì)胞壁充分提取芝麻油和蛋白質(zhì),而且操作條件相對(duì)較溫和,蛋白質(zhì)的質(zhì)量較好。其工藝如下:
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,按料液比為1∶16(g/mL)加入蒸餾水使之溶解,調(diào)節(jié)pH值至11.0,加入酶量為125 U/g蛋白酶于50℃條件下酶解2 h,滅酶,離心取其上清液,再測(cè)蛋白質(zhì)溶出率。
該方法制備芝麻蛋白的溶出率為70.36%。
化學(xué)提取法是將芝麻餅粕中的蛋白質(zhì)用化學(xué)試劑溶解在溶液中,然后從溶液中沉淀蛋白質(zhì),化學(xué)提取法也是提取芝麻蛋白最常用的方法。目前主要有堿抽提和有機(jī)溶劑洗滌。
2.2.1 單純堿液提取法[7]
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,按料液比為1∶20(g/mL)加入蒸餾水使其溶解,調(diào)節(jié)溶液的pH值至10.0后于70℃水浴中攪拌1.2 h,離心過(guò)濾,取上清液,調(diào)節(jié)pH值至4.0使蛋白質(zhì)沉淀,干燥后即為芝麻蛋白。
該方法制備芝麻蛋白的提取率為45.12%~50.12%。
2.2.2 兩次堿液提取法
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,按料液比為1∶20(g/mL)加入蒸餾水使其溶解,超聲波一次堿提后通過(guò)離心機(jī)在4 800 r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min,過(guò)濾,分別取上清液和殘?jiān)?,將殘?jiān)M(jìn)行超聲波二次堿提,再在4 800 r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min,過(guò)濾,合并上清液,調(diào)節(jié)溶液pH值至4.0使蛋白質(zhì)沉淀,干燥后即為芝麻蛋白。
該方法制備芝麻蛋白的提取率為60.6%。
2.2.3 超聲波輔助堿液提取法[7]
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,按料液比為1∶20(g/mL)加入蒸餾水使其溶解,調(diào)節(jié)pH值至10.0,利用超聲波細(xì)胞破碎機(jī)提取1.2 h,提取溫度為70℃,功率為200 W,離心過(guò)濾,取上清液沉淀,干燥后即為芝麻蛋白。
該方法制備芝麻蛋白的提取率為60.12%。
2.2.4 有機(jī)溶劑洗滌法[8]
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,加入50%乙醇混合溶劑(正己烷液體積比1∶6),在溫度為55℃條件下采用水浴提取85 min,提取液自然冷卻后在4 000 r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min,取上清液,調(diào)節(jié)溶液pH值至4.0使蛋白質(zhì)沉淀,干燥后即為芝麻蛋白。
該方法制備芝麻蛋白的提取率為66.89%。
目前,提取芝麻蛋白常采用的物理方法是超濾法[9]。超濾是一項(xiàng)分子級(jí)的膜分離技術(shù),為近年來(lái)新興產(chǎn)物。它采用的分離介質(zhì)為特殊多孔超濾膜,利用膜兩側(cè)的壓力差作為推動(dòng)力,在常溫條件下對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離的技術(shù),具有操作簡(jiǎn)便、條件溫和、能耗低、無(wú)相變、效率高等優(yōu)點(diǎn)。目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于水處理、輕工業(yè)、食品、環(huán)境保護(hù)和生物制藥工程等眾多領(lǐng)域,因此也是富集蛋白質(zhì)最有效的方法之一。此方法制備的芝麻蛋白提取率為58.71%,其工藝如下。
將脫脂后的芝麻餅粕粉碎過(guò)篩,按料液比為1∶10(g/mL)加入蒸餾水使其溶解,調(diào)節(jié)溶液pH值至10.0后在室溫下攪拌2 h,離心后取出上清液,選用同樣的方法重復(fù)提取,合并兩次上清液,在壓力為0.25 MPa,pH值為10.0條件下超濾,超濾后干燥即為芝麻蛋白。
不同提取方法對(duì)芝麻蛋白的提取率影響較大,生物提取法提取出來(lái)的芝麻蛋白含量較另外兩種方法高,而且條件溫和,對(duì)芝麻蛋白的品質(zhì)影響較小,為將來(lái)芝麻蛋白的更進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。物理提取法提取的芝麻蛋白含量較低,但對(duì)芝麻蛋白的影響較小,如何優(yōu)化物理提取法以增加芝麻蛋白的提取率在未來(lái)也是一個(gè)研究方向。
噴霧干燥、冷凍干燥、真空干燥、熱風(fēng)干燥、微波干燥以及紅外線(xiàn)干燥都是食品干燥的方式。目前芝麻蛋白干燥常用方式是噴霧干燥和冷凍干燥,真空干燥法較前兩種少;后3種干燥方式所需溫度較高,可能使得發(fā)生芝麻蛋白變性,若要使用這3種方法應(yīng)注意控制好時(shí)間及溫度。不同的干燥方式對(duì)芝麻餅粕的營(yíng)養(yǎng)成分及功能特性有較大的差異。
噴霧干燥是制備芝麻蛋白最常見(jiàn)的方法之一。其原理是將溶液、懸浮液等干燥物料、噴霧器的霧滴直徑分散到小顆粒中,利用熱風(fēng)流將其干燥,可直接將物料干燥成粉末或顆粒狀產(chǎn)品,該法應(yīng)用廣泛,絕大多數(shù)水分可以在瞬間蒸發(fā),所以干燥速度極快,具有瞬間干燥的特點(diǎn)。除此之外,為了控制最終物料的某些質(zhì)量指標(biāo)(如粒度分布、含水率、生物活性、溶解性、色澤、香氣、風(fēng)味等),噴霧干燥還可以在一定范圍內(nèi)改變其操作條件[10]。但是動(dòng)力消耗大,造價(jià)較高。此技術(shù)在食物的味道、色澤和營(yíng)養(yǎng)方面具有較好的保留作用。提取出來(lái)的芝麻蛋白經(jīng)過(guò)噴霧干燥,干燥速度極快,蛋白質(zhì)也不易變性并能較好地保持原有的功能特性,對(duì)芝麻蛋白品質(zhì)影響較小,操作簡(jiǎn)便,價(jià)格適宜,但熱效率不高,熱消耗大。噴霧干燥是干燥蛋白質(zhì)最常見(jiàn)的方式之一。
除了噴霧干燥外,冷凍干燥也是制備芝麻蛋白常見(jiàn)的方法。許多研究者將提取出來(lái)的芝麻蛋白用冷凍干燥來(lái)制備。冷凍干燥是通過(guò)冷凍的方式將產(chǎn)品進(jìn)行干燥的一種方法,其原理是將已凍結(jié)的產(chǎn)品置于真空容器中進(jìn)行加熱,在低溫低壓條件下,產(chǎn)品中的冰晶升華成水蒸氣逸出,從而使產(chǎn)品脫水最終達(dá)到干燥的目的[11]。
冷凍干燥后所得產(chǎn)品具有多孔、疏松、易溶的特點(diǎn),此方法能夠較大程度地保留食物原有的形狀、色澤、結(jié)構(gòu)、營(yíng)養(yǎng)及芳香成分。干燥后的物料保留其原有的化學(xué)組成和多孔膠體結(jié)構(gòu)等物理特性;熱量消耗較其他干燥方法少。低溫條件下干燥,蛋白質(zhì)不會(huì)變質(zhì)。此種方法對(duì)于芝麻蛋白影響最小,缺點(diǎn)是費(fèi)用較高,因此結(jié)合成本此種方法應(yīng)用較少,未能廣泛采用。
除了上述噴霧干燥和冷凍干燥外,真空干燥也能應(yīng)用于芝麻蛋白的制備中,但該法運(yùn)用相對(duì)較少,主要適用于一些熱敏性的物料。真空干燥的原理是將食品物料放在密閉干燥室內(nèi),置于真空密閉系統(tǒng)中,對(duì)物料進(jìn)行適當(dāng)加熱,在壓力差或濃度差作用下,使物料內(nèi)部水分?jǐn)U散到表面,失去了分子間的作用力的束縛后,使得物料表面的水分子獲得了充分的動(dòng)能,并在真空系統(tǒng)中擴(kuò)散到低壓空氣中,從而被真空泵除去。該法雖然操作簡(jiǎn)單,費(fèi)用較低,但不斷加熱可能會(huì)使芝麻蛋白變性,所以在制備芝麻蛋白方面應(yīng)用較少。在實(shí)際操作工程中,應(yīng)嚴(yán)格控制加熱的溫度,防止蛋白質(zhì)因受熱過(guò)度而發(fā)生變性。
熱風(fēng)干燥的干燥介質(zhì)為熱空氣,與食品通過(guò)自然對(duì)流或強(qiáng)制對(duì)流循環(huán)的方式進(jìn)行濕熱交換,食品表面的水分通過(guò)表面的氣膜向氣流主體擴(kuò)散;同時(shí)物料表面氣化,使得物料表面和內(nèi)部之間產(chǎn)生水分梯度差,所以,物料內(nèi)部的水分向表面擴(kuò)散。熱風(fēng)干燥,其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,價(jià)格便宜,但加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或是熱風(fēng)溫度過(guò)高都會(huì)使芝麻蛋白變性和產(chǎn)生褐變,極大地影響了芝麻蛋白的品質(zhì)。所以,熱風(fēng)干燥在制備芝麻蛋白中運(yùn)用得較少。
芝麻蛋白的干燥方式目前主要是以上4種,尤其是噴霧干燥和冷凍干燥最為常見(jiàn)。目前,有關(guān)于其他植物蛋白質(zhì)的不同干燥方式對(duì)其功能特性的影響研究報(bào)道較多,但對(duì)于芝麻蛋白的其他干燥方式或者多種干燥方式結(jié)合以及不同干燥方式對(duì)芝麻蛋白功能特性的影響還未見(jiàn)報(bào)道,還需要進(jìn)一步研究。
蛋白質(zhì)在食品加工和貯藏中的特殊功能,如吸水性、吸油性、潤(rùn)濕性、保水性、熱聚集性、粘度等,都被稱(chēng)為蛋白質(zhì)的功能特性。蛋白質(zhì)組成、氨基酸序列、形態(tài)結(jié)構(gòu)等固有特性,屬于蛋白質(zhì)的功能特性。吸水性、潤(rùn)濕性、吸油性、熱聚集性和粘性等芝麻蛋白的一些功能性質(zhì),為芝麻的深加工和利用提供了理論依據(jù)[12]。根據(jù)芝麻蛋白不同功能特性,能夠廣泛的被運(yùn)用于不同種類(lèi)食品的生產(chǎn)中。
現(xiàn)如今以芝麻為輔料的產(chǎn)品種類(lèi)繁多,如芝麻酥糖、芝麻豆腐等,因其中含芝麻蛋白、鈣、磷鐵、和維生素E等多種有益成分,因而被人們廣泛接受[13]。芝麻蛋白含硫氨酸和蛋氨酸含量豐富,可將其與大豆蛋白混合,可提高芝麻蛋白的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;芝麻蛋白還可作為品質(zhì)改良劑,如添加到核桃花生制成混合型復(fù)合飲料和添加到牛乳中制作干酪,以及將芝麻餅粕、芝麻濃縮蛋白、芝麻分離蛋白加入紅小麥粉中,制成各種面粉制品[14]。
芝麻蛋白不僅具有特有風(fēng)味,還具有黏性、溶解性及乳化能力,尤其是其吸油性,因此肉糜制品可以適量添加,從而改善產(chǎn)品的風(fēng)味、口感及質(zhì)地,使產(chǎn)品組織結(jié)構(gòu)細(xì)膩,并促進(jìn)脂肪吸收,避免漏油、跑油等現(xiàn)象的發(fā)生。
利用芝麻蛋白的發(fā)泡性,可將芝麻蛋白應(yīng)用于西式面點(diǎn),如面包、蛋糕、餅干等多種烘焙制品中,由于芝麻蛋白是一種互補(bǔ)性良好蛋白,芝麻蛋白硫氨酸和蛋氨酸含量豐富,因此可以使谷物烘焙制品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提高,使得產(chǎn)品結(jié)構(gòu)更加富有彈性。除此之外,還可添加到饅頭、面條等中式面制品中,增加產(chǎn)品質(zhì)地,使面條有彈性,不易斷裂。
由于芝麻蛋白具有較好的乳化性,因此可以添加到冰淇淋中,改善產(chǎn)品品質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。利用芝麻蛋白良好吸水性和濕潤(rùn)性,脫脂后的芝麻蛋白粉可用于芝麻蛋白粉、芝麻糊、芝麻乳以及芝麻酸奶等流體食品的生產(chǎn)。
芝麻蛋白在休閑食品中的應(yīng)用主要是芝麻腐竹和芝麻蛋白肉。脫脂后的芝麻蛋白粉經(jīng)加熱煮沸、脫色,形成薄膜后成型,再經(jīng)過(guò)干燥等工序處理后制成芝麻腐竹;芝麻蛋白粉經(jīng)擠壓成型改性后即得到芝麻蛋白肉。另外,將淀粉與芝麻蛋白充分混合,經(jīng)過(guò)擠壓膨化等處理,制作成休閑食品。醬油生產(chǎn)的優(yōu)良原料需含有一定量的植物蛋白和淀粉質(zhì),而芝麻榨油后的芝麻餅粕中含有較高的芝麻蛋白,芝麻餅粕經(jīng)熟化冷卻后,接入相關(guān)菌種制成醬曲,進(jìn)行發(fā)酵成熟后,再通過(guò)浸出法提取醬油。
近年來(lái)研究表明,經(jīng)酶解后的動(dòng)植物蛋白,不僅理化性質(zhì)有很大改變,而且容易被機(jī)體消化吸收[15-16],并具有一定的生理活性,一些已被廣泛用作天然食品抗氧化劑和保健食品[17]。在中國(guó)芝麻蛋白水解的研究現(xiàn)狀,主要研究蛋白質(zhì)的性質(zhì)和水解技術(shù)[18-19],芝麻蛋白肽活性研究是評(píng)價(jià)芝麻蛋白酶解物氧自由基和氫氧自由基清除能力的常用方法[20],尚未報(bào)告其他功能活性。
芝麻蛋白作為一種性質(zhì)優(yōu)良的植物蛋白,可廣泛應(yīng)用于食品中,但大多未對(duì)產(chǎn)品特性進(jìn)行深入研究,更未實(shí)際用于大批量生產(chǎn)。對(duì)于芝麻餅粕真正利用主要是作動(dòng)物飼料或是農(nóng)作物肥料用,這樣造成了極大地芝麻蛋白資源浪費(fèi)。如何最大程度并有效地利用芝麻餅粕資源,對(duì)進(jìn)一步提高芝麻餅粕的附加值有著現(xiàn)實(shí)意義。
目前芝麻蛋白的研究大多還處于實(shí)驗(yàn)室階段,比如提取方法和功能特性等基礎(chǔ)研究,提取方法不同,芝麻蛋白功能特性也有所差異,對(duì)于不同提取方法對(duì)芝麻餅粕功能特性的影響機(jī)理研究較少。除此之外,由于生產(chǎn)技術(shù)、工藝設(shè)備等諸多因素的影響使得芝麻蛋白的實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用受到制約。因此現(xiàn)階段對(duì)于芝麻蛋白的實(shí)際應(yīng)用率不高,可以通過(guò)改進(jìn)提取方法,如多種方法相結(jié)合,使得提取工藝簡(jiǎn)便高效,并且降低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失,以及通過(guò)改進(jìn)開(kāi)發(fā)產(chǎn)品特性,增強(qiáng)其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。