五種不同檢測(cè)方法檢測(cè)牛布魯氏菌病結(jié)果比較

（河北省圍場(chǎng)滿族蒙古族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河北圍場(chǎng) 068450）

布魯氏菌病是一種世界性的人畜共患病，對(duì)經(jīng)濟(jì)和公共健康都有重大影響。牛、羊和山羊感染光滑流產(chǎn)布魯氏菌和羊種布魯氏菌，是人類疾病的共同來(lái)源，該病主要危害人畜生殖系統(tǒng)，人與人之間幾乎不傳播，患病動(dòng)物是主要的傳染源，其中病羊感染人的比例較高[1]。目前疫苗免疫是布魯氏菌病防控的重要手段之一，尤其布魯氏菌病高發(fā)地區(qū)。

盡管近幾年人間布病的發(fā)病率呈逐年減少的態(tài)勢(shì)，但究其根本原因來(lái)自畜間的布魯氏菌病，若想從根本上解決此問(wèn)題，必須控制畜間重點(diǎn)是牛、羊間布魯氏菌病的傳播。

本實(shí)驗(yàn)從圍場(chǎng)縣境內(nèi)規(guī)模化羊場(chǎng)采集血清樣本855份，經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)（CFT）、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（iELISA）、競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（cELISA）、試管凝集試驗(yàn)（SAT）五種方法檢測(cè)比較結(jié)果后分析。建立敏感性強(qiáng)、特異性高、技術(shù)簡(jiǎn)單、成本低的診斷技術(shù)替代和補(bǔ)充現(xiàn)有的臨床診斷方法。

1 實(shí)驗(yàn)材料

在河北省某地境內(nèi)采集未實(shí)施布病免疫的奶牛血清855頭份，每份血清對(duì)應(yīng)標(biāo)記家畜耳標(biāo)號(hào)。

2 試驗(yàn)方法

采用RBT、SAT、iELISA、cELISA、CFT試驗(yàn)方法對(duì)每份血清進(jìn)行平行檢測(cè)。RBT、SAT、CFT具體試驗(yàn)方法見(jiàn)國(guó)標(biāo)，iELISA、cELISA按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

3 試驗(yàn)結(jié)果

以SAT為標(biāo)準(zhǔn)，其他檢測(cè)方式和其比較計(jì)算敏感性及特異性。急計(jì)算公式：敏感性=真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性），特異性=真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）。

通過(guò)5種方法檢測(cè)，全部為陽(yáng)性的是真陽(yáng)性178頭，全部為陰性的是真陰性496頭。iELISA敏感性（178/248）71.77%、特異性（496/607）81.71%；RBT的敏感性（178/296）60.14%、特異性（496/565）87.79%；SAT的敏感性（178/312）57.05%、特異性（496/543）91.34%；cELISA敏感性（178/313）56.87%、特異性（496/542）91.51%；CFT敏感性（178/337）52.82%、特異性（496/518）95.75%，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 五種方法檢測(cè)相關(guān)性比較

4 試驗(yàn)結(jié)論

在OIE參考手冊(cè)中，CFT為牛布病國(guó)際貿(mào)易指定試驗(yàn)和血清學(xué)的確診試驗(yàn)。與CFT相比，其余四種方法都有一定的假陽(yáng)性和假陰性。在我國(guó)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中，SAT仍作為確診試驗(yàn)，但由于其敏感性及特異性較低，實(shí)驗(yàn)過(guò)程比較復(fù)雜，不適合大批樣品初步檢測(cè)，對(duì)牛布病的檢測(cè)結(jié)果并不理想，OIE在國(guó)際貿(mào)易中已經(jīng)放棄使用該方法[2]。

本試驗(yàn)五種檢測(cè)方法敏感性比較由高到低是iELISA ＞ RBT ＞SAT ＞ cELISA ＞ CFT。iELISA是最敏感的檢測(cè)方法，僅需酶標(biāo)儀等簡(jiǎn)單儀器，適于基層普遍應(yīng)用；與敏感性其次的RBT方法相比，技術(shù)和操作要求簡(jiǎn)單，酶標(biāo)儀讀數(shù)，減少了主觀判斷和經(jīng)驗(yàn)等人為因素影響，適用于基層布病大規(guī)模篩查。

而不同方法特異性比較由高到低：CFT ＞ cELISA ＞ SAT ＞iELISA ＞ RBT。雖然CFT特異性最高，但操作過(guò)于復(fù)雜，技術(shù)要求高，基層難以應(yīng)用；cELISA特異性其次且與CFT相當(dāng)，同樣僅需酶標(biāo)儀，技術(shù)和操作要求簡(jiǎn)單，適用于基層對(duì)布病初篩陽(yáng)性樣品的確證。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出：對(duì)于經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的奶牛而言，實(shí)施布病防控凈化，我們既希望盡可能多地把陽(yáng)性牛檢出，減少假陰性率，因而需要敏感性高的iELISA方法，又希望莫把陰性牛誤判為陽(yáng)性牛，減少假陽(yáng)性率，因而需要特異性高cELISA方法。不同檢測(cè)方法的組合滿足此要求，大規(guī)模篩查采用iELISA方法，陽(yáng)性樣品確證采用cELISA方法，其組合既能降低陽(yáng)性漏檢率，又能降低陽(yáng)性誤判率，是適用基層奶牛布病檢測(cè)的最佳組合。