血小板參數(shù)在判斷慢性丙型肝炎RNA水平中的價(jià)值

張 夏，杜丹丹，翟志敏，郭進(jìn)京

持續(xù)的丙肝病毒(hepatitis C virus ，HCV)感染引起的丙型肝炎易導(dǎo)致肝臟纖維化，進(jìn)而發(fā)展成肝硬化，約20%患者轉(zhuǎn)化為肝癌(hepatocellular carcinoma ，HCC)[1]。肝炎患者有較高的血小板減少的發(fā)生率，由于肝炎病毒感染和血小板的減少密切相關(guān)，美國血液學(xué)會免疫性血小板減少性紫癜診療指南推薦長期血小板減少的的患者，應(yīng)常規(guī)檢測肝炎病毒[2]。該研究旨在分析丙型肝炎患者RNA的載量和血小板相關(guān)參數(shù)的關(guān)系，為臨床治療方案的選擇、病情療效監(jiān)測提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1病例資料回顧性分析2014年1月～2016年12月阜陽市人民醫(yī)院住院期間檢測出丙肝抗體陽性并做丙肝RNA檢測的患者78例。其中男32例，女46例，年齡21～82歲，中位年齡54歲，排除能引起三系減低的血液系統(tǒng)疾病及病例資料不完全的患者。按照參考文獻(xiàn)[3]HCV-RNA載量高低分為三組：<500 IU/ml定義為HCV-RNA陰性組，500～105IU/ml定義為低載量組，≥105IU/ml為高載量組，低載量組和高載量組定義為HCV-RNA陽性組。

表1 HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組各血小板參數(shù)的比較

表2 低載量HCV-RNA組和高載量HCV-RNA組各血小板參數(shù)的比較

1.2試劑和儀器血小板計(jì)數(shù)(platelet count，PLT)，血小板分布寬度(platelet distribution width，PDW)，平均血小板體積(mean platelet volume，MPV)及血小板壓積(platelet volume，PCT)由BC-6800血細(xì)胞分析儀測試，儀器及配套試劑均購自中國深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；HCV-RNA載量由LineGeneⅠ基因擴(kuò)增儀檢測，其配套檢測試劑盒購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。

1.3方法以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝用于血小板參數(shù)檢測，HCV-RNA載量采用RT-PCR法，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)規(guī)范操作完成各參數(shù)測試。

2 結(jié)果

2.1HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組血小板參數(shù)的比較HCV-RNA陰性組和HCV-RNA陽性組相比年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有可比性。與HCV-RNA陰性組比較，HCV-RNA陽性組PLT和PCT水平明顯減低，PDW和MPV水平明顯增高(P<0.01)，見表1。

2.2血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數(shù)判斷HCV-RNA陰性情況由于PDW、MPV和HCV-RNA陰性呈負(fù)相關(guān)性，故在做ROC曲線時，取其倒數(shù)。PLT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線下面積(area under curve，AUC)為0.903(95%CI：0.837～0.970，P<0.001)；PDW判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.847(95%CI：0.763～0.913，P<0.001)；MPV判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.888(95%CI：0.817～0.960，P<0.001)；PCT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線的AUC為0.821(95%CI：0.792～0.913，P<0.001)。見圖1。

圖1 PLT、PDW、MPV、PCT判斷HCV-RNA陰性的ROC曲線

圖2 PLT、PDW、MPV、PCT和HCV-RNA載量的線性分析

2.3HCV-RNA陽性組中HCV-RNA低載量組和HCV-RNA高載量組血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數(shù)的比較低HCV-RNA載量組和高HCV-RNA載量組相比年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有可比性。與高HCV-RNA載量比較，低HCV-RNA載量組有著更高的PLT和PCT水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.005)，同時低HCV-RNA載量組有著更低的PDW和MPV水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.028,P=0.047)，見表2。

2.4HCV-RNA載量和血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數(shù)相關(guān)性分析以HCV-RNA載量科學(xué)計(jì)數(shù)法數(shù)量級為自變量，血小板的PLT、PDW、MPV、PCT參數(shù)分別為因變量，在53例HCV-RNA陽性的患者中，與HCV-RNA載量呈正相關(guān)且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的參數(shù)為MPV(r=0.306,P=0.026)，呈負(fù)相關(guān)且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)有：PLT(r=0.493，P<0.001)、PCT(r=0.444，P=0.001)。PDW和HCV-RNA載量相關(guān)性分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.258,P=0.063)。見圖2。

3 討論

血小板是血細(xì)胞中最小的細(xì)胞，其大小數(shù)量及分布寬度與骨髓中巨核細(xì)胞的增生速度、代謝情況、促血小板生成素等因素有關(guān)[4]。血小板相關(guān)參數(shù)PLT、PDW、MPV、PCT可反應(yīng)血小板的生成及功能狀態(tài)。PDW反應(yīng)血小板體積大小的離散程度。MPV即血小板平均體積，MPV增大，提示血小板內(nèi)致密顆粒增多，是巨核細(xì)胞增生及血小板活化的標(biāo)志，可輔助鑒別血小板減低的原因及評估骨髓造血功能；其增高和骨髓受到抑制、血小板破壞過多、機(jī)體高代償狀態(tài)有關(guān)，與PLT呈負(fù)相關(guān)。PCT可間接反應(yīng)血小板活性物質(zhì)及所含顆粒的多寡，與PLT呈正相關(guān)性[5]。丙肝病毒感染除引起肝臟的損害，也能引起肝外組織的損傷[6]，肝炎患者有較高的血小板減低的發(fā)生率，研究[7]表明HCV比HBV更易發(fā)生血小板的減低。其引起血小板減低的機(jī)制可能如下：HCV感染可導(dǎo)致全身免疫系統(tǒng)的紊亂，產(chǎn)生自身抗體導(dǎo)致血小板的破壞[8]；慢性HCV感染患者往往伴有不同程度的脾功能亢進(jìn)，尤其是發(fā)生肝硬化時，脾功能亢進(jìn)時能分泌某些激素，影響骨髓的造血同時加速血細(xì)胞的破壞[9]；血小板生成素由主要由肝細(xì)胞合成，HCV感染所致的肝功能受損會導(dǎo)致血小板生成素水平的下降，進(jìn)一步加速血小板的減少和影響巨核細(xì)胞的分化[10]；此外，丙肝病毒對骨髓的抑制作用和血管內(nèi)皮功能障礙也可導(dǎo)致血小板減少[11]。

丙肝病毒感染主要依賴血清學(xué)抗體的檢測，但由于“窗口期”使得抗體檢測有一定的假陰性的可能，另一方面丙肝抗體陽性不代表病毒是否復(fù)制，而HCV-RNA的檢測是診斷丙肝是否復(fù)制的有力證據(jù)，其載量的高低和肝功能的損傷程度有一定的相關(guān)性。本研究證明PLT和PCT水平的減低、PDW和MPV的增高在判斷HCV-RNA是否陰性的ROC AUC均大于0.5，對HCV-RNA是否復(fù)制的判斷有著積極的意義，同時本研究也證實(shí)上述4個參數(shù)在判斷HCV-RNA載量的高低中也有一定的預(yù)測價(jià)值，與HCV-RNA載量的線性分析提示除PDW外，PLT、MPV、PCT水平均和HCV-RNA載量的高低相關(guān)。血小板參數(shù)是血常規(guī)中的常規(guī)檢測項(xiàng)目，經(jīng)濟(jì)、簡便、易得是其特點(diǎn)，在有些無分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的地方，血小板4個參數(shù)可作為輔助判斷丙肝病毒復(fù)制和病毒載量高低。臨床醫(yī)師在抗病毒治療的同時動態(tài)監(jiān)測丙肝患者血小板水平及其參數(shù)能更有效的判斷病毒復(fù)制的嚴(yán)重程度，及時為患者制定最佳的治療方案，同時和HCV-RNA載量監(jiān)測相互補(bǔ)充。