劉瓊，張碧魚，張韋深，汪雪蘭，龍?zhí)斐?/p>

（中山大學(xué) 新華學(xué)院，廣東廣州 510520）

1 青蛙（蟾蜍）經(jīng)口腔一步法毀腦毀脊髓方法介紹

青蛙（蟾蜍）經(jīng)口腔一步法毀腦毀脊髓方法（一步法）是經(jīng)口腔顱骨底面中央部位的蝶篩骨下方進(jìn)針，腦脊髓穿刺法。此方法的具體做法如下：取青蛙（蟾蜍）一只，操作者左手拿青蛙（蟾蜍），使其身體平躺，腹部向上，頭向著操作者。右手拉開青蛙（蟾蜍）下頜，并用左手把打開的青蛙（蟾蜍）的下頜撐開。因?yàn)榍嗤埽蛤埽]有牙齒，打開口腔操作對(duì)操作者沒有傷害；將金屬探針（毀髓針）探入蛙的口腔上顎，于兩眼球前正中部位斜向前進(jìn)針，稍用力，穿破顱骨底面中央部位的蝶篩骨后，探針進(jìn)入顱腔，平持探針，上下左右輕輕擺動(dòng)，搗毀腦組織，再由前向后進(jìn)針，出枕骨大孔，順勢(shì)進(jìn)入椎管，破壞掉脊髓。由于蝶篩骨上布滿篩孔樣的細(xì)微孔隙，此骨容易捅穿；在保持蛙頭與身體正常解剖位置的情況下，探針容易進(jìn)入椎管。操作時(shí)探針從前向后，一個(gè)方向一次性進(jìn)針，同時(shí)完成腦與脊髓的損毀，方法簡(jiǎn)單、有效。同時(shí)，此方法還能使操作者避免蟾蜍的耳后腺分泌物噴射入眼睛的危險(xiǎn)。（見圖1）

圖1 進(jìn)針點(diǎn)

經(jīng)口腔一步法毀腦毀脊髓成功的標(biāo)志和經(jīng)體表背部腦脊髓穿刺法一樣，可以看到青蛙（蟾蜍）下肢蹬直，檢查四肢松軟、對(duì)稱，沒有呼吸，見圖2。

圖2 一步法

經(jīng)口腔一步法毀腦毀脊髓方法與現(xiàn)在常規(guī)教學(xué)所用經(jīng)體表背部毀腦毀脊髓穿刺法方法相比，此方法進(jìn)針部位不同，決定腦脊髓穿刺法操作方法不同，此方法體表定位標(biāo)志明顯，操作流程更簡(jiǎn)單，對(duì)初學(xué)者來說更易掌握，穿刺術(shù)所用時(shí)間短、成功率高。對(duì)各種規(guī)格大小的青蛙（蟾蜍）都好用，尤其對(duì)特別小或者特別大的青蛙（蟾蜍），采用常規(guī)方法較困難，就更顯示出其優(yōu)越性。大量教學(xué)案例顯示，對(duì)一些采用常規(guī)方法失敗的青蛙（蟾蜍），此方法仍然可以穿刺成功。

2 兩種方法比較

現(xiàn)在教科書和論文都采用青蛙（蟾蜍）損毀腦和脊髓（腦脊髓穿刺法）。傳統(tǒng)方法進(jìn)針采用經(jīng)過體表—背部在顱骨與椎體連接處的中點(diǎn)進(jìn)針，進(jìn)行腦脊髓穿刺，簡(jiǎn)稱經(jīng)體表背部腦脊髓穿刺法（體表法）。

具體做法如下：取青蛙（蟾蜍）一只，用自來水沖洗干凈；左手握住青蛙（蟾蜍），食指按壓吻端，拇指按壓背部，使其頭部盡量前俯；右手持探針，從相當(dāng)于機(jī)枕骨大孔處（用探針從兩眼中間開始沿著脊柱方向下滑，針尖觸到凹陷處即是枕骨大孔處，它位于蛙的顱骨與脊柱中間）垂直刺入，然后通過枕骨大也向前刺入顱腔，左右攪動(dòng)，充分搗毀腦組織；接著將探針抽回至進(jìn)針處（即枕骨大孔處，注意勿全部拔出探針），再向后刺入椎管，反復(fù)提插搗毀脊髓。此時(shí)，如青蛙（蟾蜍）四肢松軟、對(duì)稱、呼吸消失，表明腦和脊髓已被完全損毀[1-3]。

2.1 體表法缺點(diǎn)

（1）初學(xué)者不易掌握進(jìn)針部位，往往進(jìn)針部位選不準(zhǔn)確，影響后面的毀腦和脊髓。（2）進(jìn)針點(diǎn)組織連接較緊，進(jìn)針力度、深度、方向不好把握，此處操作更多靠操作者個(gè)人經(jīng)驗(yàn)和憑感覺，初學(xué)者不易掌握，多數(shù)學(xué)生需要多只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后才能一次性成功刺入顱腔。（3）向前損毀腦腔后，“探針抽回至進(jìn)針處（即枕骨大孔處，注意勿全部拔出探針），再向后刺入椎管”這步操作對(duì)初學(xué)者感覺最困難，大數(shù)學(xué)生因?yàn)椴荒苓M(jìn)入椎管，探針誤入胸腹腔，或者刺破皮膚、誤傷、刺破手。（4）蟾蜍耳后腺分泌物可能會(huì)射入操作者的眼部，對(duì)操作者造成損傷。（5）如果選用的青蛙（蟾蜍）特別大或者別小，進(jìn)針點(diǎn)選取、損毀腦和脊髓都比較困難。（6）初學(xué)者成功率不高，導(dǎo)致毀腦和脊髓不徹底，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.2 一步法優(yōu)點(diǎn)

（1）進(jìn)針點(diǎn)易找。進(jìn)針點(diǎn)選取部位在體表解剖標(biāo)志明顯、范圍較大，初學(xué)者容易找準(zhǔn)部位。（2）進(jìn)針較易。經(jīng)口腔蝶篩骨下方進(jìn)針，因蝶篩骨，骨質(zhì)有孔，較薄，所以容易進(jìn)針。（3）方向明確。進(jìn)針后顱腔范圍大，不會(huì)誤入其他組織。進(jìn)入顱腔后，探針上下左右輕輕擺動(dòng)，搗毀腦組織，再由前向后進(jìn)針，出枕骨大孔直接進(jìn)入脊髓腔。因?yàn)榍嗤埽蛤埽╋B腔和枕骨大孔解剖連接口較大，動(dòng)物身體又是平躺著的，正常解剖結(jié)構(gòu)沒有破壞，所以探針由顱腔順勢(shì)經(jīng)枕骨大孔，進(jìn)入椎管損毀脊髓很容易，特別對(duì)初學(xué)者。（4）本操作不受青蛙（蟾蜍）大小的影響，尤其對(duì)特別小的動(dòng)物，因?yàn)樽倒茌^細(xì)，在動(dòng)物俯屈毀顱腔后，解剖結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，探針進(jìn)入椎管更加困難的情況下，這種方法更顯示出優(yōu)越性。對(duì)特別大的青蛙，如果操作者的手較小，一個(gè)手拿住動(dòng)物，并讓動(dòng)物俯屈較困難。把握進(jìn)針的力度、準(zhǔn)確刺入顱腔和椎管會(huì)更困難。經(jīng)體表法毀損不完全或誤入其他部位的，改用一步法，經(jīng)過大量試驗(yàn)都能成功。（5）本方法讓動(dòng)物平躺在操作者手上，背向下，可避免蟾蜍耳后腺分泌物噴射入眼睛。（6）與體表法相比，使用本方法到損毀腦和脊髓完成所用時(shí)間，至少縮短70%，特別是對(duì)初學(xué)者。（7）與體表法相比，進(jìn)針點(diǎn)沒有出血和腦脊液的流出，更符合動(dòng)物倫理學(xué)的要求。

3 結(jié)語

青蛙（蟾蜍）經(jīng)口腔一步法毀腦毀脊髓方法是從青蛙（蟾蜍）正常結(jié)構(gòu)中最薄弱的蝶篩骨部位進(jìn)入顱腔，由顱腔順著自然解剖路徑進(jìn)入脊髓腔。和現(xiàn)在常規(guī)教學(xué)所用方法相比，在體表定位準(zhǔn)確性、操作難度、節(jié)省時(shí)間、一次性成功率等方面，經(jīng)過學(xué)校三年500多學(xué)生教學(xué)使用，都有明顯優(yōu)勢(shì)，值得在所有學(xué)校推廣使用。