隆茂俊 姚曉慧 夏利寧（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院 830052）

大腸埃希氏菌是一種典型的革蘭氏陰性無(wú)芽胞直桿菌，大腸桿菌病養(yǎng)殖場(chǎng)中是危害嚴(yán)重的常見(jiàn)病和多發(fā)病，其發(fā)病率和死亡率位于仔豬疫病之首[1]，給豬場(chǎng)和養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。一些豬場(chǎng)在預(yù)防和治療疾病的過(guò)程中盲目用藥、超劑量用藥，使細(xì)菌的耐藥率不斷攀升，耐藥譜不斷擴(kuò)大，尤其是飼料中各種抗生素的添加，耐藥性大腸桿菌急劇增加，多重耐藥問(wèn)題更加嚴(yán)重，給大腸桿菌的治療帶來(lái)困難，在增加治療成本的同時(shí)也給人類食品安全留下安全隱患。本研究對(duì)豬場(chǎng)不同生長(zhǎng)期糞源大腸桿菌分離鑒定，分析其耐藥性，為該地區(qū)豬場(chǎng)大腸桿菌的綜合治療提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

通過(guò)肛拭子在健康仔豬直腸采集糞樣 （40日齡：100份；60日齡：179份）和妊娠母豬 （100份）；共379份。大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌為ATCC25922，購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司。麥康凱培養(yǎng)基、普通肉湯和Mueller-Hinton（MH）培養(yǎng)基均購(gòu)自北京奧博星生物技術(shù)有限公司。阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋、氟苯尼考、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星、慶大霉素、安普霉素、阿米卡星藥品均為標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自中國(guó)獸藥監(jiān)察所。

1.2 試驗(yàn)方法

參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) （Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推薦的操作程序，采用瓊脂稀釋法檢測(cè)大腸桿菌對(duì)上述10種抗菌藥物的最小抑菌濃度（Minimal Inhibitory Concentration，MIC）值測(cè)定，以大腸桿菌ATCC25922作為質(zhì)控菌株，根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生長(zhǎng)期豬源大腸桿菌分離結(jié)果

不同生長(zhǎng)期豬糞源的大腸桿菌分離情況見(jiàn)表1。

表1 不同生長(zhǎng)期豬糞源的大腸桿菌分離情況

2.2 不同生長(zhǎng)期豬糞源大腸桿菌耐藥結(jié)果

豬糞源大腸桿菌對(duì)10種臨床常用抗菌藥物的耐藥結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 豬糞源大腸桿菌的耐藥率 （單位：%）

由表2可知，40d仔豬對(duì)阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星6種藥物耐藥率較高，均在90%以上，慶大霉素和安普霉素次之，也分別為73.5%和45.8%，對(duì)頭孢噻呋和阿米卡星耐藥率較低，分別為12%和8.4%；60d仔豬對(duì)阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星5種藥物耐藥率較高，在63～83%，對(duì)頭孢噻呋和阿米卡星耐藥率較低，分別為18%和0%；妊娠母豬對(duì)阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、慶大霉素6種藥物耐藥率較高，在26.5～66.3%，對(duì)頭孢噻呋、安普霉素、阿米卡星3種藥物耐藥率最低，分別為0%、6.1%、0%。

2.3 不同生長(zhǎng)期豬糞源大腸桿菌多藥耐藥結(jié)果

豬糞源大腸桿菌的多藥耐藥率見(jiàn)表3。

由表3可知，40日齡仔豬多藥耐藥主要以5耐、6耐和7耐為主，分別為19.3%、27.7%、42.2%，占89.2%；60日齡仔豬多藥耐藥主要以4耐、6耐和7耐為主，分別為18%、17%、18%，占53%；妊娠母豬多藥耐藥主要以2耐、3耐和4耐為主，分別為20.4%、22.4%、20.4%，占63.2%。

3 結(jié)論與討論

3.1 不同生長(zhǎng)期豬糞源大腸桿菌耐藥比較分析

從耐藥結(jié)果看來(lái)，不同生長(zhǎng)期豬源耐藥結(jié)果存在明顯差異，40日齡仔豬對(duì)10種藥物耐藥率主要集中在91.6～97.6%，60日齡仔豬對(duì)10種藥物耐藥率主要集中在63～83%，妊娠母豬明顯較低，耐藥率主要26.5～66.3%。仔豬耐藥率明顯大于妊娠母豬，其中40日齡仔豬耐藥率又明顯大于60日齡仔豬，仔豬的多藥耐藥程度也明顯大于妊娠母豬，這可能與仔豬隨著日齡增大斷奶，母源抗體逐漸降低，對(duì)疾病的抵抗力下降，生產(chǎn)中大量使用藥物，導(dǎo)致仔豬耐藥問(wèn)題比妊娠母豬嚴(yán)重；分離的350份豬糞源大腸桿菌均對(duì)阿米卡星和頭孢噻呋較為敏感，呈一定的相似性，對(duì)其他8種藥物耐藥率相對(duì)都較高。整體來(lái)看，不同生長(zhǎng)期豬糞源大腸桿菌對(duì)被檢測(cè)的大部分藥物均有較高的耐藥率，并且多藥耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。

3.2 與其他地區(qū)耐藥情況的差異

鄧均華等[2]2008年對(duì)武漢規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)分離鑒定出的73株大腸桿菌藥物敏感試驗(yàn)研究表明，豬源性大腸桿菌僅對(duì)阿米卡星和大部分頭孢類抗菌藥物的耐藥率較低，對(duì)多數(shù)抗菌藥物均表現(xiàn)為較高的耐藥率，并呈現(xiàn)出嚴(yán)重的多重耐藥現(xiàn)象。李小成[3]對(duì)遼寧朝陽(yáng)地區(qū)某豬場(chǎng)不同生長(zhǎng)階段豬源大腸桿菌耐藥性調(diào)查結(jié)果顯示，各類豬群采集到的大腸桿菌對(duì)環(huán)丙沙星高度敏感，氧氟沙星對(duì)妊娠母豬和肥育豬分離到的大腸桿菌為高度敏感，對(duì)保育豬中度敏感，對(duì)哺乳仔豬不敏感，不同類別豬群豬源大腸桿菌對(duì)抗生素存在一定的耐藥性問(wèn)題，尤其是哺乳仔豬對(duì)抗生素的耐藥種類上更為突出一些。這一結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。多藥耐藥結(jié)果顯示，仔豬糞源大腸桿菌以6～7耐為主，多藥耐藥水平與夏利寧[4]等報(bào)道相近。這種耐藥性的相似，與大腸桿菌疾病在臨床上普遍采用抗生素治療有關(guān)，在藥物使用過(guò)程中，把抗生素作為飼料添加劑，大劑量長(zhǎng)期單獨(dú)使用一種藥物，使細(xì)菌的耐藥問(wèn)題集聚發(fā)展，由不耐藥、單一耐藥逐漸發(fā)展到多重耐藥。

表3 豬糞源大腸桿菌的多藥耐藥情況

該縣主要的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)豬源多藥耐藥現(xiàn)象較嚴(yán)重，建議以后治療大腸桿菌病時(shí)，科學(xué)合理使用抗生素，選取敏感性高的藥物，比如阿米卡星和頭孢噻呋等，以便提高治療效果。同時(shí)選出其他治療方案，如聯(lián)合用藥，疫苗防疫，血清的應(yīng)用，微生態(tài)制劑的使用，以及提升圈舍的環(huán)境衛(wèi)生，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理措施等。