賈瑋，董旭陽，石琳，代春吉，許秀麗，儲曉剛,

（1.陜西科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，陜西西安 710021）（2.中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，北京 100123)

乳及乳制品中脂類、蛋白質(zhì)和糖類等都是篩查監(jiān)控分析的干擾來源[1]，而外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)又大多為小分子物質(zhì)，含量低，因此要求儀器有很高的選擇性與超高的質(zhì)量精度。此外，國家對乳及乳制品的監(jiān)控實(shí)行批檢，要求儀器具有操作的高效性與便捷性。其中高效性要求儀器具備類似高端三重四極桿質(zhì)譜的靈敏 度，可在一次分析中進(jìn)行定性、確證的同時(shí)得到定量結(jié)果，無需分為兩臺儀器檢測。便捷性主要體現(xiàn)在大量樣品壓力下儀器穩(wěn)定性好，受外界環(huán)境影響小。高分辨質(zhì)譜具有高分辨率與高質(zhì)量精度的特點(diǎn)，可在復(fù)雜背景中對痕量成分(mg/kg、μg/kg)進(jìn)行定性定量分析，與各種新型色譜技術(shù)聯(lián)用可得到待分析化合物的精確質(zhì)量色譜圖[2]，符合乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查分析的儀器要求。近些年來，針對高分辨質(zhì)譜法的相關(guān)研究呈上升趨勢，如圖1、圖2所示。其在乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查方面的應(yīng)用也受到人們廣泛的關(guān)注。

圖1 中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)情況 Fig.1 CNKI database literature statistics

圖 2 Wed of Science 數(shù)據(jù)庫文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)情況 Fig.2 Web of Science database literature statistics

1 乳與乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)概述

1.1 乳及乳制品

根據(jù)國際食品法典委員會標(biāo)準(zhǔn)《CODEX STAN 206 General Standard for the Use of Dairy》規(guī)定，乳及乳制品包括：液體乳類、乳脂肪類、煉乳類、乳粉類、干酪類以及其他乳制品，具體產(chǎn)品見表1。

表1 乳及乳制品分類 Table 1 The classification of milk and dairy products

1.2 乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)

歐盟指令2002/657/EC規(guī)定，乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)是指在奶牛養(yǎng)殖與乳及乳制品生產(chǎn)、加工、流通過程中引入的外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)。從奶牛養(yǎng)殖與牛奶加工方面來看，外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)可分為食品添加劑與非法添加物、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、塑化劑和真菌毒素五大類。

1.2.1 食品添加劑與非法添加物

近年來，隨著人們對乳品消費(fèi)需求的增加以及食品工業(yè)的快速發(fā)展，食品添加劑已經(jīng)成為乳制品工業(yè)技術(shù)進(jìn)步和科技創(chuàng)新的重要推動力[3]。2015年10月1日起實(shí)施的《中華人民共和國食品安全法》規(guī)定，食品添加劑指為改善食品品質(zhì)和色、香、味以及為防腐、保鮮和加工工藝的需要而加入食品中的人工合成或者天然物質(zhì)，包括營養(yǎng)強(qiáng)化劑[4]。乳及乳制品中的食品添加劑主要有酸度調(diào)節(jié)劑、甜味劑、抗氧化劑和著色劑等，具體作用見表2。

表 2 乳及乳制品中的食品添加劑[5～9] Table 2 Food additives in milk and dairy products

著色劑 天然胡蘿卜素、甜菜紅、高粱紅、柑橘黃 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、乳粉和奶油粉、稀奶油、嬰幼兒配方食品除外 增強(qiáng)乳制品色彩感官 胭脂紅及其鋁色淀、檸檬黃及其鋁色淀、紅曲米、紅曲紅 調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳、調(diào)制煉乳（包括加糖煉乳及使用了非乳原料的調(diào)制煉乳等） 檸檬黃及其鋁色淀、亮藍(lán)及其鋁色淀 風(fēng)味發(fā)酵乳、調(diào)制煉乳（包括加糖煉乳及使用了非乳原料的調(diào)制煉乳等）β-胡蘿卜素 稀奶油及其類似品、調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳、調(diào)制煉乳（包括加糖煉乳及使用了非乳原料的調(diào)制煉乳等）、熟化干酪和再制干酪及其類似品、以乳為主要配料的即食風(fēng)味食品或其預(yù)制產(chǎn)品（不包括冰淇淋和風(fēng)味發(fā)酵乳） 姜黃 調(diào)制乳和調(diào)制奶油粉 焦糖色（普通法、亞硫酸銨法、加氨生產(chǎn)）、紅米紅 調(diào)制煉乳（包括加糖煉乳及使用了非乳原料的調(diào)制煉乳等） 胭脂樹橙 熟化干酪、再制干酪 胭脂蟲紅 風(fēng)味發(fā)酵乳、干酪和再制干酪及其類似品、調(diào)制煉乳（包括加糖煉乳及使用了非乳原料的調(diào)制煉乳等）、調(diào)制乳和調(diào)制奶油粉 葉黃素 以乳為主要配料的即食風(fēng)味食品或其預(yù)制產(chǎn)品（不包括冰淇淋和風(fēng)味發(fā)酵乳） 番茄紅 風(fēng)味發(fā)酵乳 番茄紅素 調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳 葉綠素銅 稀奶油 β-阿撲-8-胡蘿卜醛 風(fēng)味發(fā)酵乳、再制干酪 增味劑 谷氨酸鈉、5’-鳥苷酸二鈉、 5’-肌苷酸二鈉、5’-呈味核苷酸二鈉 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、乳粉和奶油粉、稀奶油、嬰幼兒配方食品除外 增加乳制品香味 防腐劑 乳酸鏈球菌素 巴氏殺菌乳、滅菌乳、嬰幼兒配方食品除外 抑制微生物生長和繁殖 納他霉素、溶菌酶、山梨酸鉀及其鈉鹽 干酪和再制干酪及其類似品 穩(wěn)定劑和凝固劑 葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、乳粉和奶油粉、稀奶油、嬰幼兒配方食品除外 增強(qiáng)粘性固形物 氯化鈣 稀奶油、調(diào)制稀奶油 甜味劑 乳糖醇 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、乳粉和奶油粉、嬰幼兒配方食品除外 增強(qiáng)乳制品甜味 木糖醇、羅漢果苷、赤蘚糖醇 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、乳粉和奶油粉、稀奶油、嬰幼兒配方食品除外 紐甜 調(diào)制乳粉和調(diào)制奶油粉、風(fēng)味發(fā)酵乳、以乳為主要配料的即食風(fēng)味食品或其預(yù)制產(chǎn)品（不包括冰淇淋和風(fēng)味發(fā)酵乳） 阿斯巴甜 調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳、稀奶油及其類似品（稀奶油除外）、非熟化干酪、干酪類似品、以乳為主要配料的即食風(fēng)味食品或其預(yù)制產(chǎn)品（不包括冰淇淋和風(fēng)味發(fā)酵乳）、調(diào)制乳粉和調(diào)制奶油粉 麥芽糖醇和麥芽糖醇液 調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳、煉乳及其調(diào)制產(chǎn)品、稀奶油類似品 異麥芽酮糖 調(diào)制乳、風(fēng)味發(fā)酵乳

安賽蜜 以乳為主要配料的即食風(fēng)味食品或其預(yù)制產(chǎn)品（不包括冰淇淋和風(fēng)味發(fā)酵乳）、風(fēng)味發(fā)酵乳 山梨糖醇和山梨糖醇液 煉乳及其調(diào)制產(chǎn)品 甜菊糖苷、天門冬酰苯丙氨酸甲酯磺胺酸 風(fēng)味發(fā)酵乳 食品用香料 香蘭素、異香蘭素、乙基香蘭素等 巴氏殺菌乳、滅菌乳、發(fā)酵乳、稀奶油、嬰幼兒配方食品除外 賦予乳制品豐富的香味

三聚氰胺事件后，衛(wèi)生部相繼發(fā)布了《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單(第一批)》，《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單(第二批)》，以及《全國打擊違法添加的非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治近期政治工作重點(diǎn)及要求》，列出了乳及乳制品中常見的四種非法添加物：三聚氰胺、硫氰酸鈉、皮革水解物、β-內(nèi)酰胺酶。其中三聚氰胺可以冒充蛋白質(zhì)，硫酸氫鈉可以延長乳及乳制品的保質(zhì)期，皮革水解物可以增加乳及乳制品中的蛋白質(zhì)含量，β-內(nèi)酰胺酶可以降解抗生素，從而制造人工無抗奶。

1.2.2 農(nóng)藥殘留

乳及乳制品中的農(nóng)藥殘留來源于奶牛飼養(yǎng)過程中食用被農(nóng)殘污染的飼料和水源，以及殺蟲劑和殺菌劑的不當(dāng)使用。乳及乳制品中的農(nóng)藥殘留對人體的危害屬于微劑量、長時(shí)期、慢性細(xì)微毒性效應(yīng)[10]。目前，主要國家和組織對乳及乳制品中443種農(nóng)藥設(shè)定了最大殘留限量，其目的除了保護(hù)人體健康外，利用農(nóng)藥殘留限量及其檢測技術(shù)可以設(shè)置貿(mào)易障礙，作為國際貿(mào)易的技術(shù)壁壘[11]。我國規(guī)定了生乳中硫丹、艾氏劑、滴滴涕、狄氏劑、林丹、六六六、氯丹和七氯八種農(nóng)藥的最大殘留限量[12]，具體限量值見表3。

表3 生乳中農(nóng)藥殘留最大限量值(mg/kg) Table 3 The maximum value of pesticide residues in raw milk(mg/kg)

1.2.3 獸藥殘留

乳及乳制品中的獸藥殘留來源于奶牛在喂養(yǎng)的過程中頭孢菌素類、四環(huán)素類、磺胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類等治療藥物與飼料中藥物添加劑的不合理使用，以及飼養(yǎng)場周圍土壤與水源的污染。獸藥殘留對人體的危害表現(xiàn)在細(xì)菌耐藥性、過敏反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、激素作用、致癌作用和致畸作用等方面。除此之外，因具有抑菌作用，獸藥殘留還會影響發(fā)酵乳、奶酪等發(fā)酵型乳制品的加工工藝[13]。不同國家規(guī)定的獸藥限量的數(shù)量差別較大，日本規(guī)定的獸藥限量高達(dá)418種，歐盟為390種，我國為48種[14]。

1.2.4 塑化劑

乳及乳制品中塑化劑來源于包裝材料中塑化劑的遷移以及在加工過程中使用含有鄰苯二甲酸二酯的乳化劑。乳及乳制品的包裝材料多為高分子聚合物，這些材料在生產(chǎn)、加工中需要添加助劑以增強(qiáng)塑料的柔韌性能，常用的助劑為鄰苯二甲酸酯類化合物。在運(yùn)輸與儲存的過程中，鄰苯二甲酸酯類化合物易遷移至乳制品中。鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)為“環(huán)境激素”，對機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)造成干擾，導(dǎo)致生殖功能紊亂、致畸和致癌[15]。

1.2.5 真菌毒素

乳及乳制品中真菌毒素來源于奶牛食用被真菌毒素污染的飼料，其污染水平主要由喂養(yǎng)飼料被真菌毒素污染的程度及毒素種類決定。如玉米在生長、收獲及后期的貯存過程中發(fā)霉，產(chǎn)生黃曲霉毒素。奶牛喂食被黃曲霉毒素、伏馬毒素和T-2毒素等真菌毒素污染的飼料后，在擠出的鮮乳中可檢測到相應(yīng)的真菌毒素。除了伏馬毒素B1外，其他真菌毒素都可經(jīng)牛體代謝而轉(zhuǎn)化，如黃曲霉毒素B1轉(zhuǎn)化為黃曲霉毒素M1，T-2毒素轉(zhuǎn)化為HT-2毒素等多種代謝產(chǎn)物[16]。因此，乳與乳制品中的真菌毒素包括飼料中的原毒素及毒性更高的代謝產(chǎn)物，其中黃曲霉毒素M1為二類致癌物，黃曲霉毒素B1為一類致癌物，可引起機(jī)體生長障礙、急性中毒、急性肝炎和肝細(xì)胞脂肪變性[17]。目前我國僅對乳及乳制品中黃曲霉毒素 M1進(jìn)行限量[18]，限量標(biāo)準(zhǔn)為 0.5 μg/kg。

2 乳與乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查分析技術(shù)概述

2.1 篩查分析技術(shù)的定義

歐盟2002/657/EC將篩查分析技術(shù)定義為一種用于檢測基質(zhì)中目標(biāo)物質(zhì)是否存在并予以定量分析的技術(shù)手段，該方法具有高通量與快速分析兩個特點(diǎn)[19]。由于外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的種類多、差異大，其分析技術(shù)也呈現(xiàn)多樣化。如揮發(fā)性較強(qiáng)的物質(zhì)可以采用氣相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜的分析方法，對揮發(fā)性不強(qiáng)的物質(zhì)可以采用液相色譜/多波長檢測或液相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜的分析方法，對離子態(tài)的物質(zhì)可以采用離子色譜的分析方法。

這些篩查分析技術(shù)主要分為兩類，第一類為已知目標(biāo)化合物的篩查，即根據(jù)待分析目標(biāo)化合物的性質(zhì)與基質(zhì)類型選擇相應(yīng)的前處理手段與檢測儀器，這類確定對象的篩查分析技術(shù)與多組分化合物的檢測技術(shù)不同之處為其待分析化合物數(shù)目通常為200至500個，需進(jìn)行快速、高通量分析。第二類為未知目標(biāo)物篩查技術(shù)，需要在海量的數(shù)據(jù)中篩選與確證待分析化合物間性質(zhì)的差異，這也決定了未知目標(biāo)物篩查分析技術(shù)一般主要依靠飛行時(shí)間質(zhì)譜或四級桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜等高分辨分析儀器，且需要運(yùn)用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化與數(shù)據(jù)處理[20]。曹新悅等[21]以水果、蔬菜中 208種農(nóng)藥為目標(biāo)物質(zhì)，對氣相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜與氣相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜兩種設(shè)備進(jìn)行篩選、確證能力的對比，發(fā)現(xiàn)四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜在快速篩查、準(zhǔn)確定性以及非目標(biāo)化合物檢測等方面表現(xiàn)突出。

2.2 高分辨質(zhì)譜的分類

高分辨質(zhì)譜儀包括傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀、離子淌度質(zhì)譜儀、四級桿-靜電場軌道離子阱質(zhì)譜儀、四級桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀等。由于這些高分辨質(zhì)譜儀質(zhì)量分析器結(jié)構(gòu)不同，其在性能上也有很大的差異。其中傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀的分辨率和質(zhì)量精度最高，主要應(yīng)用在大分子分析、氣相離子反應(yīng)動力學(xué)研究和復(fù)雜體系分析等領(lǐng)域[22]，但其價(jià)格昂貴、體積龐大、操作復(fù)雜，目前僅在少數(shù)研究實(shí)驗(yàn)室使用。離子淌度質(zhì)譜儀是離子淌度分離與質(zhì)譜聯(lián)用的一種新型二維質(zhì)譜分析技術(shù)，結(jié)合了離子淌度技術(shù)靈敏、快速、能夠提供離子結(jié)構(gòu)信息與質(zhì)譜能夠提供準(zhǔn)確質(zhì)量信息的特點(diǎn)，在化合物異構(gòu)體分析、生物大分子相互作用分析等方面顯示出其獨(dú)有的優(yōu)勢[23]。四級桿-靜電場軌道離子阱質(zhì)譜儀與四級桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀是目前食品安全領(lǐng)域常用的兩種篩查分析儀器，四級桿-靜電場軌道離子阱質(zhì)譜可提供接近傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜的分辨率和質(zhì)量精度，保證了復(fù)雜樣品分析時(shí)所需的高靈敏度和高特異度，定量與定性能力強(qiáng)[24]，同時(shí)四級桿-靜電場軌道離子阱質(zhì)譜可分析分子量在50～3500范圍內(nèi)的物質(zhì)，如小分子活性多肽[25]。四級桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀采樣速度快，可與超高效液相色譜聯(lián)用[26]。

2.3 高分辨質(zhì)譜在乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查方面的應(yīng)用

2.3.1 在食品添加劑及非法添加物篩查方面的應(yīng)用

隨著食品工業(yè)的快速發(fā)展，食品添加劑的濫用與非法添加物的使用已成為影響乳品質(zhì)量安全的重要因素，因此對乳及乳制品中食品添加劑及非法添加物進(jìn)行快速篩查確證尤為重要。云環(huán)等[27]搭建了離子色譜-軌道離子阱質(zhì)譜的分析裝置，并利用該設(shè)備非定向性地篩查了乳制品中的有機(jī)酸。試樣經(jīng) 1%的氫氧化鉀溶液提取后固相萃取法凈化，在部分樣品中篩查到酒石酸、乳酸、檸檬酸和蘋果酸。隨后該課題組[28]使用Oasis MAX固相萃取小柱凈化，進(jìn)一步優(yōu)化前處理方法，在樣品中可以篩查到蘋果酸、檸檬酸、丁二酸、乳酸和己二酸。該方法簡單、快速，可用于乳制品中多種酸度調(diào)節(jié)劑的篩查分析。

Chen等[29]建立了基于強(qiáng)陽離子交換填料的分散微固相萃取(Dispersive microsolid phase extraction，DMSPE)凈化方法，并采用高效液相色譜-靜電場軌道阱質(zhì)譜法對牛奶和奶粉中的三聚氰胺和氰胺進(jìn)行快速分析。該前處理方法簡單、靈敏度高，適用于大規(guī)模檢測，也可用于乳及乳制品中其他非法添加物的篩查，有利于乳品安全監(jiān)管工作的開展。新開發(fā)的基于PCX吸附材料的DMSPE清理方法有望在今后的樣品清理中廣泛應(yīng)用于微量堿性污染物的分析。近年來，為避免檢查出過量使用抗生素，某些商家在原料奶中違規(guī)添加抗生素降解劑來制造人工“無抗奶”。如使用β-內(nèi)酰胺酶降解牛乳中殘留的青霉素生成青霉素噻唑酸，對人類健康存在潛在風(fēng)險(xiǎn)[30]。針對這一現(xiàn)象，趙鳳娟等[31]建立了人工“無抗奶”中青霉素類藥物降解產(chǎn)物的非定向篩查檢測方法。采用超高效液相色譜-四級桿-軌道阱質(zhì)譜儀對青霉素類藥物降解后的產(chǎn)物進(jìn)行篩查，發(fā)現(xiàn)羥氨芐青霉素、氨芐青霉素、鄰氯青霉素和芐青霉素的殘留標(biāo)識物分別為相應(yīng)的青霉噻唑酸及去羧青霉噻唑酸，對人工“無抗奶”的鑒別濃度低限為10 μg/kg，該方法簡單、快速、靈敏度高，可作為人工“無抗奶”的鑒別方法，為完善乳制品的檢測方法提供了一定的理論基礎(chǔ)。

2.3.2 在農(nóng)獸藥殘留篩查方面的應(yīng)用

在奶牛飼養(yǎng)過程中農(nóng)藥和獸藥的不合理使用，導(dǎo)致農(nóng)獸藥在奶牛體內(nèi)蓄積，從而影響乳及乳制品的質(zhì)量安全[32]。Hayward等[33]利用液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜建立了牛奶和奶油中 34種殺蟲劑的篩查方法，所有農(nóng)藥的定量限值(LOQs)為 0.20 g/kg或0.40 g/kg；嚴(yán)麗娟等[35]結(jié)合了篩查數(shù)據(jù)庫的高通量分析方法與超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)，在9 min內(nèi)完成了對乳制品中氯丙嗪、氟哌啶醇、地西泮等 20種鎮(zhèn)靜劑的高通量篩查和定量分析，檢出限為0.3～1.5 μg/L。與數(shù)據(jù)庫比對后，樣品中添加的鎮(zhèn)靜劑全部被篩查出來。

目前，奶牛在飼養(yǎng)過程中抗生素濫用是導(dǎo)致乳及乳制品中獸藥殘留超標(biāo)的主要因素，這些超量使用的抗生素通過食物鏈富集到人體內(nèi)，導(dǎo)致人體產(chǎn)生抗藥性。Hu[36]等利用液相色譜-高分辨質(zhì)譜法對牛奶中磺胺類藥物進(jìn)行非定向篩查。已知磺胺類藥物數(shù)據(jù)通過Full-MS采集，特征碎片離子通過AIF(全子離子碎裂掃描）得到，進(jìn)而對未知的磺胺類藥物進(jìn)行分析確證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明分析物回收率為68.8%～115.8%，檢測限(LOD)為0.003～0.2 μg/L。該方法簡單、快速、靈敏度高，為乳品中非法藥物的檢測提供了技術(shù)支持。王帥兵等[37]利用親水作用色譜-高分辨質(zhì)譜對生鮮牛乳中鏈霉素、雙氫鏈霉素、慶大霉素、妥布霉素、卡那霉素、阿米卡星和安普霉素共 7種氨基糖苷類抗生素（AGs）殘留進(jìn)行檢測，該方法的定量限低于我國規(guī)定的生鮮乳中AGs的最高殘留限量，可作為生鮮牛乳中AGs藥物殘留監(jiān)測的手段。將該方法應(yīng)用于50個生鮮牛乳樣品的檢測中，未檢出氨基糖苷類藥物殘留。

Moreno-Gonzalez等[38]利用毛細(xì)管區(qū)帶電泳串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜測定了牛奶中8種四環(huán)素和7種喹諾酮類化合物，定量限(LOQ)為 1.5～9.6 μg/kg，低于歐盟規(guī)定的最大殘留限量，適用于牛奶中四環(huán)素和喹諾酮類抗生素藥物的檢測。Konak等[39]使用超高效液相色譜-離子阱質(zhì)譜(UHPLC-Orbitrap-MS)測定了嬰兒食品中12種磺胺類藥物和5種乙?；x物。對比了QuEChERS和加速溶劑萃取法(Accelerated solvent extraction，ASE)兩種提取方法以實(shí)現(xiàn)對分析物的高效回收。ASE（回收率為60.90%～85.90%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤19.1%）對萃取分析物的效率明顯高于QuEChERS(回收率為 75.5%～96.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10.1%)。樣品檢出限為 0.10～0.55 μg/ kg。將該方法用于47種不同嬰兒食品的分析中，未發(fā)現(xiàn)陽性樣品。

Jia等[40]建立了同時(shí)篩查嬰幼兒配方食品樣品中333種農(nóng)藥和獸藥殘留的分析方法，試樣經(jīng)響應(yīng)面優(yōu)化的雙水相萃取法提取后利用超高效液相色譜-四級桿-軌道離子阱質(zhì)譜檢測，333種農(nóng)藥和獸藥的定量限為0.01～9.27 μg/kg，回收率為79.80%～110.70%。方法建立后，應(yīng)用于93個嬰幼兒配方食品樣品中農(nóng)獸藥殘留的篩查，在樣品中檢出了替米考星、芬苯達(dá)唑、酒石酸、泰樂菌素和噻苯咪唑。Wang等[41]進(jìn)一步改進(jìn)了樣品前處理與篩查方法，建立了超高效液相色譜-電噴霧四極桿軌道阱質(zhì)譜(UHPLC/ESI Q-Orbitrap)檢測牛奶中氟喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類等11類105種獸藥殘留的多級目標(biāo)篩選方法。使用鹽析和固相萃取程序從牛奶中提取獸藥殘余物，Q-Orbitrap Full MS/dd-MS2（數(shù)據(jù)依賴性采集）獲取單個獸藥的產(chǎn)物離子譜圖以建立化合物數(shù)據(jù)庫和質(zhì)譜庫，F(xiàn)ull MS/mDIA用于采集所有樣品數(shù)據(jù)，加強(qiáng)了1.0或10.0 μg/kg獸藥的目標(biāo)篩選，該方法分別在1.0和10.0 μg/kg的105種獸藥中篩選出58%和96%，且無需在數(shù)據(jù)處理過程中手動評估每種化合物，減少了常規(guī)實(shí)踐中的工作量。

2.3.3 在其他外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查方面的應(yīng)用

Rubert等[42]采用液相色譜串聯(lián)高分辨質(zhì)譜法，首次完成了對 35例母乳樣品中霉菌毒素及其代謝產(chǎn)物的全面篩選、量化和確認(rèn)。該方法簡單、快速，有助于估計(jì)母親和嬰兒的暴露程度真菌毒素，為女性在孕期和哺乳期的飲食建議提供了新的視角。Lin等[43]采用固相萃取-氣相色譜串聯(lián)高分辨質(zhì)譜法對人乳中的持久性有機(jī)污染物二苯并對二惡英、二苯并呋喃、多溴聯(lián)苯二苯醚和多氯聯(lián)苯進(jìn)行檢測，基于硫酸硅膠柱和堿性氧化鋁柱的串聯(lián)固相萃取凈化裝置至少可同時(shí)清理10個樣品，每個樣品不超過1 h，與自動化樣品清洗系統(tǒng)(Automate sample clean-up system，ASCS)相比，在減少工作量，時(shí)間和溶劑消耗以及提高吞吐量方面具有絕對優(yōu)勢，滿足人乳中持久性有機(jī)污染物分析樣品預(yù)處理的高通量要求。該方法在LOD足夠低的情況下得到了很好的驗(yàn)證，從而可以對普通人群進(jìn)行低暴露水平檢測，并且具有令人滿意的方法準(zhǔn)確度和精確度。

Mao[44]等利用超高效液相色譜四極桿軌道阱質(zhì)譜分析了原料乳中黃曲霉毒素B1，赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮，α-玉米醇溶蛋白等14種霉菌毒素。樣品中霉菌毒素經(jīng) AOZ免疫親和柱提取和純化，降低基質(zhì)效應(yīng)。添加的少量乙腈有利于從復(fù)合乳基質(zhì)中提取真菌毒素，特別是玉米赤霉烯酮及其衍生物。檢出限為0.0003～0.008 μg/kg，提取回收率為60%～106%。與三重四級桿質(zhì)譜法相比，Q-Orbitrap可提供前體和產(chǎn)物離子的精確質(zhì)量數(shù)，從而在不犧牲分析性能的前提下提高了分析物識別的準(zhǔn)確度。劉蕓等[45]利用高效液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱質(zhì)譜，在10 min內(nèi)檢測確證了乳粉及乳制品中壬基酚和雙酚A含量，加標(biāo)回收率均在70%以上，精密度較高，可適用于大多數(shù)乳粉及乳制品樣品的檢測。

3 結(jié)論

目前，復(fù)雜樣品基質(zhì)、痕量化合物、高通量分析等都是乳品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查分析的需求與挑戰(zhàn)。而高分辨質(zhì)譜具有高分辨率和高質(zhì)量精度，可得到化合物的元素組成；實(shí)現(xiàn)低分辨質(zhì)譜難以解決的目標(biāo)物同分異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)類似物的鑒別；實(shí)現(xiàn)高通量檢測和樣品數(shù)據(jù)回溯；可利用化合物的母離子精確質(zhì)量數(shù)及同位素豐度比，結(jié)合模擬推斷的二級碎片離子精確質(zhì)量數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確定性，實(shí)現(xiàn)非目標(biāo)化合物的篩選。這些特性使其在乳及乳制品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查分析中得到越來越廣泛的應(yīng)用。今后，為應(yīng)對我國日益增長的乳品消費(fèi)需求，保障國民食品安全，仍需繼續(xù)研究簡便、快速、準(zhǔn)確、適用于企業(yè)及第三方檢測機(jī)構(gòu)的檢測方法，發(fā)展高效、高靈敏的全自動聯(lián)用技術(shù)和多殘留組分確證技術(shù)，實(shí)現(xiàn)分析過程的自動化和智能化，提高分析效率、降低成本。如探索開發(fā)全二維氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀結(jié)合在線樣品凈化技術(shù)，原位電離與高分辨質(zhì)譜相結(jié)合的技術(shù)。其中原位電離技術(shù)可在常壓敞開式條件下簡化或免除樣品前處理過程，使樣品的現(xiàn)場快速分析檢測成為可能?？梢灶A(yù)見，隨著科技水平的發(fā)展、儀器價(jià)格的降低和檢測技術(shù)的進(jìn)步，高分辨質(zhì)譜法在食品中外源性風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查確證領(lǐng)域?qū)玫皆絹碓綇V泛的應(yīng)用。