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      仔豬偽狂犬病繼發(fā)大腸桿菌病的診斷

      2018-09-17 08:41:58
      獸醫(yī)導(dǎo)刊 2018年17期
      關(guān)鍵詞:膠乳狂犬病菌落

      2017年11月,墊江縣某新建豬場的仔豬發(fā)生一種發(fā)病率高、死亡率高、以高熱、神經(jīng)癥狀為特征的疫病。筆者通過臨床檢查、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn),確診為豬偽狂犬病繼發(fā)大腸桿菌病,現(xiàn)報(bào)告如下。

      (一)疫病情況

      此場原為一小學(xué)改造而成,分東西兩棟圈舍,外有圍墻相隔。于2017年11月8日從外縣引入16頭純種約克母豬,1頭純長白公豬,30頭50日齡左右榮昌仔母豬,132頭兩月齡內(nèi)育肥仔豬;13日有14頭仔豬出現(xiàn)減食、發(fā)熱、后軀不能站立,到16日,數(shù)量增至78頭,當(dāng)時(shí)診斷為飼料中毒和水腫病,更換飼料并投與抗菌素、對癥治療,疫病得到一定控制。但至20日,病豬出現(xiàn)呼吸困難、頸部水腫、后軀不能站立,神經(jīng)癥狀,部分倒地,呈劃水狀,死亡迅速。特別是原發(fā)病后看似正常者,一旦再發(fā)病,死亡很快。11月23日當(dāng)天,全場就死亡仔豬32頭,即報(bào)告至縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,后經(jīng)確切診斷,積極處理,至28日,有效地控制了病情,全場無新增病例,12月5日,停止死亡。

      (二)臨床癥狀

      病豬主要表現(xiàn)精神沉郁,食欲不振、甚者絕食,呼吸加快,體溫升高,一般在40℃~41℃。個(gè)別仔豬嘔吐,多數(shù)拉烏青色稀糞。耳腹出現(xiàn)紫色斑塊,眼瞼水腫,頸部腫脹。多數(shù)仔豬在出現(xiàn)臨床癥狀后不久即出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)癥狀,一些仔豬出現(xiàn)間歇性抽搐,唾液分泌增多,出現(xiàn)間歇性轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng),有的仔豬呆立不動(dòng),頭觸地或抵墻,共濟(jì)失調(diào);有的仔豬因后肢麻痹呈犬坐姿勢,進(jìn)一步發(fā)展為四肢麻痹,完全不能站立,側(cè)臥,四肢呈游泳狀劃動(dòng)。嚴(yán)重者呼吸困難,叫聲嘶啞,口吐白沫,體溫下降,持續(xù)性抽搐,很快死亡。

      (三)剖檢變化

      對當(dāng)天死亡的8頭死亡仔豬進(jìn)行對比剖檢:

      1.頸部皮下水腫,切口浸出淡黃色液體。

      2.頜下淋巴結(jié)、呼吸道淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血,切面呈大理石樣變化。

      3.心包積液,心包炎,嚴(yán)重者心臟與心包膜粘連,剝開心包膜,心臟表面呈現(xiàn)絨毛狀,心肌出血。

      4.喉頭充血,肺水腫、瘀血

      5.肝、脾稍腫大,表面散在有粟粒大灰白色壞死灶。

      6.腎表面、皮質(zhì)及髓質(zhì)內(nèi)可見針尖大小的出血點(diǎn)。

      7.胃腸漿膜及肌層出現(xiàn)廣泛性出血,胃腸粘膜脫落、出血,腸系膜有膠凍樣纖維素性附著物。

      8.腦膜及腦膜下出血,灰質(zhì)部有小點(diǎn)狀出血。

      9.腸道內(nèi)寄生大量蛔蟲。

      (四)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

      1.取病死豬的肝、肺、脾、腦、腎等病料進(jìn)行涂片、染色、鏡檢,可觀察到呈球狀、桿狀、革蘭氏陰性細(xì)菌。

      2.無菌取病死豬心包液、肺、十二指腸粘膜、腸系膜淋巴結(jié),接種于血瓊脂培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng),仔細(xì)觀察。24 h左右出現(xiàn)一種呈β溶血的菌落。40 h左右出現(xiàn)一種不溶血小菌落。

      3.將4.2分離到的溶血性菌落,接種于普通瓊脂培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)18~24 h,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上有呈圓形、整齊、隆起、濕潤、光滑及灰白色的菌落生長,直徑約2~3 mm。取此菌劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)18~24 h,發(fā)現(xiàn)有紅色菌落生長。

      取此菌涂片、染色鏡檢,呈革蘭氏陰性、中等大小桿菌。

      生化鑒定:對培養(yǎng)所得的細(xì)菌進(jìn)行葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)。結(jié)果均能發(fā)酵上述糖類,并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

      4.取病死豬心血5份及前腔靜脈采取病豬血液15份,離心制作血清,等檢。

      5.用偽狂犬病膠乳凝集試驗(yàn)試劑盒進(jìn)行偽狂犬病檢測。試劑盒由武漢科前動(dòng)物生物制品有限公司生產(chǎn),批號:170301。

      (1)凝集反應(yīng)強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn):

      + + + + 全部膠乳凝集,顆粒聚于液滴邊緣,液體完全透明。

      + + + 大部膠乳凝集,顆粒明顯,液體稍渾濁。

      + + 約50%膠乳凝集,但顆粒較細(xì),液體較渾濁。

      + 有少許凝集,液體呈渾濁。

      - 液滴呈原有的均勻乳狀。

      出現(xiàn)“+ +”以上凝集判為陽性。

      (2)陽性對照試驗(yàn):將陽性血清進(jìn)行2倍系列稀釋,取1滴(20μl)與等量膠乳抗原進(jìn)行膠乳凝集試驗(yàn),結(jié)果膠乳抗原與1∶64稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ +”凝集反應(yīng),與1∶32、1∶16稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ + +”凝集反應(yīng),與1∶8以內(nèi)稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ + + +”凝集反應(yīng)。

      陰性對照試驗(yàn):陰性血清加抗原,未發(fā)生凝集反應(yīng)。

      稀釋液對照試驗(yàn):抗原加稀釋液混合后,未發(fā)生凝集反應(yīng)。

      (3)被檢血清試驗(yàn):取20份被檢血清各一滴(20μl),陽性血清、陰性血清、稀釋液各1滴(20μl),分別置于玻片上,各加等量膠乳抗原1滴,混勻,攪拌并搖動(dòng)1~2 min,在3~5 min內(nèi)觀察,判定結(jié)果。

      (4)20份檢測血清試驗(yàn)結(jié)果如下:

      反應(yīng)強(qiáng)度 - + + + + + + + + + +待檢血清數(shù) 2 1 10 5 2

      從以上結(jié)果可以看出,呈陽性反應(yīng)的待檢血清數(shù)量為17份。占待檢血清數(shù)量的85%。

      通過以上疫病調(diào)查、臨床檢查、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢測,可以確診:此批仔豬疫病是由豬偽狂犬病引起,并繼發(fā)大腸桿菌病。

      (五)防治

      1.首先作好隔離。對出現(xiàn)癥狀的豬,全部隔離到東邊圈舍。

      2.全場使用碘伏、百毒殺、復(fù)合酚等進(jìn)行徹底消毒,對入場口、入舍口設(shè)立消毒池,每日更換新鮮消毒液。

      3.對健康豬采用豬偽狂犬弱毒疫苗進(jìn)行緊急預(yù)防注射。疫苗由四川華神生物制品有限公司生產(chǎn),批號:170808。

      4.停止飼喂顆粒料。給予以玉米為主的粉料,加倍量添加多種維生素、阿莫西林粉或氟苯尼考原粉,減少料中蛋白質(zhì)及微量金屬含量,以降低應(yīng)激,控制繼發(fā)感染。避免飼喂發(fā)霉飼料、油巴、胡豆等不易消化性飼料。

      5.對出現(xiàn)癥狀者,使用氨芐西林、卡那霉素、氟苯尼考、恩諾沙星等控制感染。

      6.對癥治療。嚴(yán)重者,可使用5%葡萄糖生理鹽水、CoA、ATP、VitC等進(jìn)行腹腔注射,使用時(shí)注意將液體溫度調(diào)節(jié)到正常體溫。

      7.加強(qiáng)護(hù)理。保持舍內(nèi)溫度,可使用紅外線燈升溫;飼料少量多次;注意保護(hù)極弱仔豬。

      8.使用左旋咪唑或丙硫咪唑進(jìn)行驅(qū)蟲。

      9.禁止飼養(yǎng)犬、貓,撲殺老鼠。

      (六)討論

      1.仔豬偽狂犬病近來病例發(fā)生較多,又極易繼發(fā)其他疾病。從本次疫情來看,盡早診斷、及時(shí)緊急防疫是控制本病最關(guān)鍵的措施。因此,一旦有疫情發(fā)生,盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室鑒別診斷,以指導(dǎo)臨床,撲滅疫病。

      2.大腸桿菌病是臨床上最常見的一種疾病,其本身可單獨(dú)發(fā)生,也可因其它疾病引起繼發(fā)感染。作好同型菌株的大腸桿菌防疫,是控制本病的關(guān)鍵。

      3.仔豬的長途運(yùn)輸,是引起許多疫病的誘因。由于高致病性藍(lán)耳病引起許多地方的豬發(fā)病而死亡,導(dǎo)致仔豬的長途調(diào)運(yùn),也讓現(xiàn)在的疫病更加復(fù)雜、多變。

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