耿金峰，趙鄢鵬，馮 倩，蔡忠貞，王慧嶺，張晉陽，王 冰，劉敏勝，白雪梅

(新奧科技發(fā)展有限公司，煤基低碳能源國家重點實驗室，河北廊坊 065001)

微藻是一類種類繁多、生長速度快、具有極大應(yīng)用價值的生物資源。微藻是海洋生物資源的重要來源，是生態(tài)系統(tǒng)中最主要的初級生產(chǎn)者。藻類是地球上通過光合作用合成物質(zhì)量最多的生物，它合成的物質(zhì)量約占全部光合作用合成生物量的1/3。許多海洋微藻富含對人體有重要生理作用與保健功能的長鏈多不飽和脂肪酸，微藻及其代謝產(chǎn)物可用于天然食品、營養(yǎng)品、保健食品、生物餌料、生物肥料、可持續(xù)生物能源生產(chǎn)等方面，具有重要的經(jīng)濟(jì)價值和社會價值[1-5]。其中眼點擬微綠球藻體內(nèi)含有大量的二十碳五烯酸(EPA)，是天然的EPA來源[6-7]，其藻粉添加到畜禽飼料和畜牧飼料中，將提高雞蛋中EPA含量和動物肉質(zhì)中EPA含量，提升產(chǎn)品營養(yǎng)價值和附加值，可為養(yǎng)殖戶增加收入；而且眼點擬微綠球藻已經(jīng)進(jìn)入中國飼料原料目錄中，具有巨大的應(yīng)用潛力。

世界范圍內(nèi)很多科研機構(gòu)和高校都在對微藻進(jìn)行著系統(tǒng)的、深入的、高水平的研究[8]。在研究條件穩(wěn)定的情況下，其微藻的產(chǎn)量較高，如Zhang等[9]在日本的北方地區(qū)，夏季利用1.5 cm板式反應(yīng)器培養(yǎng)集胞藻，在試驗控溫的情況下占地面積產(chǎn)量可達(dá)39.0 g/(m2·d)；Torzillo等[10]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水平可達(dá)到14.8 g/(m2·d)；Moheimani等[11]報道的養(yǎng)殖水平為16.0～33.5 g/(m2·d)。而微藻生產(chǎn)企業(yè)實際的戶外微藻養(yǎng)殖中產(chǎn)量較低，一般在5～10 g/(m2·d)。究其原因，除了自然的晴天、陰天、多云、高溫、低溫等多變的條件外，還有一個重要的影響因素就是敵害生物污染問題。微藻養(yǎng)殖過程若遇到嚴(yán)重的敵害生物污染發(fā)生，將會導(dǎo)致養(yǎng)殖顆粒無收[12]。因此，微藻養(yǎng)殖過程中的敵害生物污染嚴(yán)重制約著微藻的規(guī)模化過程，限制生物資源的開發(fā)，限制眼點擬微綠球藻在飼料產(chǎn)業(yè)中應(yīng)用。目前科學(xué)家們對污染的關(guān)注度也是越來越高。微藻養(yǎng)殖過程的污染可分為原生動物污染和細(xì)菌污染，其中對原生動物污染目前研究成果顯著，如吳松[13]使用表面活性劑、漂白粉對原生動物的滅殺；叢立晶等[14]利用酸化法、堿化法等對藻液中的纖毛蟲、游捕蟲進(jìn)行治理；規(guī)?；^常用的方法還有碳酸銨鹽法等[12,15]。而細(xì)菌和微藻是一個共生體[16-19]，有些細(xì)菌對微藻有促進(jìn)作用，有些細(xì)菌對微藻有抑制作用[20-22]，甚至有些細(xì)菌具有溶藻的特性[23-25]，可以導(dǎo)致藻細(xì)胞較快速死亡，嚴(yán)重的將導(dǎo)致養(yǎng)殖失敗。目前針對細(xì)菌污染的有效方法是抗生素治理，如劉曉娟等[26]研究多種抗生素去除藻液中細(xì)菌，從而獲得無菌藻株；宋程飛等[27]利用抗生素建立杜氏鹽藻的無菌培養(yǎng)體系。但抗生素對環(huán)境存在污染，主要殘留在水體中[28]，將影響人類健康。抗生素殘留去除的研究主要集中在畜禽類廢水中，研究的去除方法有活性炭吸附、光降解、紫外法、臭氧法等[28-31]，而藻液中關(guān)于抗生素殘留的去除研究鮮見報道，而且部分抗生素對藻類的毒性很大[28]。因此，筆者以可應(yīng)用于飼料領(lǐng)域的眼點擬微綠球藻為研究對象，針對該藻株戶外養(yǎng)殖過程的細(xì)菌污染進(jìn)行研究，首先篩選對藻細(xì)胞有致死作用細(xì)菌的有效抗生素，在此基礎(chǔ)上針對抗生素開展深入的去除方法研究，獲得的去除方法既要保證抗生素的有效去除同時又要保證不能對微藻生長帶來顯著的抑制作用。這些研究結(jié)果將會為微藻的細(xì)菌污染治理提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)積累與支持，為眼點擬微綠球藻的戶外穩(wěn)定養(yǎng)殖提供一種抗細(xì)菌污染的技術(shù)儲備。

1 材料與方法

1.1材料試驗所用抗生素均購自Sigma公司，配制成1 g/L 母液，根據(jù)需要進(jìn)行稀釋(母液經(jīng)0.22 μm濾膜除菌，稀釋全過程無菌操作)。金黃色葡萄球菌，購自中國微生物研究所，編號1.2465。試驗過程其他試劑均為常規(guī)分析純試劑。

1.2儀器臭氧機，北京山美水美環(huán)保高科技有限公司CF-YG10型。分光光度計，日本島津UV-2550型。

1.3藻種與培養(yǎng)試驗所用眼點擬微綠球藻(Nannochloropsisoculata)，由ENN生物質(zhì)能源技術(shù)中心藻種質(zhì)庫提供。所有試驗培養(yǎng)基均采用f/2海水培養(yǎng)基[16]，鹽度為(3.3±0.1)%。試驗采用批次培養(yǎng)的方式進(jìn)行。

細(xì)菌污染的藻液，簡稱污染藻液(下同)：來自眼點擬微綠球藻戶外培養(yǎng)過程得到，細(xì)菌數(shù)量在106/mL數(shù)量級上。其中導(dǎo)致藻細(xì)胞死亡的細(xì)菌已經(jīng)得到分離，并得到分子鑒定。

1.4試驗方法

1.4.1接種密度。各試驗組藻細(xì)胞接種密度在0.8～1.0 g/L，主要以各試驗組相同體積下具有相同的生物質(zhì)量為原則。

1.4.2試驗用反應(yīng)器規(guī)格。玻璃板式反應(yīng)器，10 cm(長)×5 cm(寬)×60 cm(高)，其中反應(yīng)器寬度即反應(yīng)器光程。玻璃柱式反應(yīng)器，內(nèi)徑5 cm、高度80 cm玻璃柱式(管式)反應(yīng)器，一側(cè)封口、一側(cè)開口。

1.4.3抗生素選擇試驗。

1.4.3.1藻種對抗生素耐受性試驗。從5大類抗生素(β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和氯霉素類)中選擇常見的抗生素對藻細(xì)胞進(jìn)行其耐受性試驗，依次分別選取青霉素、慶大霉素、四環(huán)素、紅霉素和氯霉素，其中各抗生素的使用量均分別為50、100、200 mg/L這3個濃度梯度。

試驗方法：各試驗組使用100 mL三角瓶，裝有30 mL無菌培養(yǎng)的藻液，根據(jù)表1依次加入對應(yīng)量的抗生素，放置在搖床中、2 000 lx光強下?lián)u床培養(yǎng)48 h，測定微藻生物量。根據(jù)生物量的增強情況考察藻細(xì)胞對不同抗生素的耐受范圍。每組試驗3個平行樣。

1.4.3.2抗生素對細(xì)菌治理試驗。根據(jù)藻細(xì)胞耐受性試驗結(jié)果，選擇對藻細(xì)胞無明顯負(fù)作用的抗生素進(jìn)行細(xì)菌治理效果試驗，最終選擇既具有細(xì)菌治理效果又不影響藻細(xì)胞自身特性的抗生素種類。

污染藻液分裝到各組試驗組的玻璃板式反應(yīng)器中，每組試驗3個平行樣，每組反應(yīng)器中加入800 mL的污染藻液；并按照表1所示加入對應(yīng)種類的抗生素和加量，在10 000 lx光強的人工光源下連續(xù)培養(yǎng)7 d，反應(yīng)器中底部通入含有5%二氧化碳的空氣混合氣，將藻液pH控制在7.5～8.5；同時每天監(jiān)控藻細(xì)胞濃度和細(xì)菌數(shù)量。

表1 抗生素添加

1.4.4慶大霉素的檢測。

1.4.4.1慶大霉素檢測法的制定——比濁法。配制10個濃度梯度(2、4、6、8、10 mg/L)的慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)液，分別取3 mL各標(biāo)準(zhǔn)液于100 mL三角瓶；每個樣品3個平行。將提前活化至對數(shù)生長期的金黃色葡萄球菌稀釋至OD580為1的菌懸液，取3 mL菌液加入已滅菌的LB培養(yǎng)基和生理鹽水的培養(yǎng)體系中，并分裝至滅過菌的100 mL三角瓶中，每瓶27 mL；將分裝好的三角瓶于恒溫振蕩搖床上培養(yǎng)(搖床，140 r/min，37 ℃，避光)；在3 h時檢測菌液OD580。

1.4.4.2慶大霉素的去除。取20 L經(jīng)慶大霉素治理后的藻液，經(jīng)5 000 r/min離心5 min后，取離心清液開展試驗。各組試驗方法：①臭氧組。將臭氧發(fā)生器產(chǎn)生的穩(wěn)定臭氧通過軟管導(dǎo)入玻璃柱式反應(yīng)器底部，通過軟管連接的曝氣石向藻液通入臭氧氣體。試驗組依次為試驗5、試驗6、試驗7，分別通入臭氧0.5、1.0、2.0 h。②次氯酸鈉組。將含量10%有效氯的分析純次氯酸鈉溶液按照各組所需有效氯濃度折算取量。試驗組依次為試驗8、試驗9、試驗10，分別加入次氯酸150、500、1 000 μL/L。③臭氧+紫外組。臭氧通入方式同①中所述，紫外處理指同時將15 W的紫外燈管直接插入玻璃柱式反應(yīng)器中直接紫外照射藻液。④有效氯+紫外組。在②的基礎(chǔ)上，同時將15 W的紫外燈管直接插入玻璃柱式反應(yīng)器中直接紫外照射藻液。⑤紫外處理組。單獨使用15 W的紫外燈管直接插入玻璃柱式反應(yīng)器中直接紫外照射藻液。

參照表2，分裝到內(nèi)徑5 cm的玻璃柱式反應(yīng)器中，每個反應(yīng)器中裝800 mL。各試驗組處理完畢后均通入空氣20 min，以排除水中殘留的臭氧因素等干擾。處理后的樣品進(jìn)行慶大霉素含量的檢測，采用比濁法測定，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定慶大霉素含量。

表2 慶大霉素去除方法

1.4.5細(xì)菌污染治理方法驗證試驗。取20 L經(jīng)慶大霉素治理后的藻液，混合均勻后直接分裝到內(nèi)徑5 cm玻璃柱式反應(yīng)器中，每個反應(yīng)器中裝800 mL液體，每組3個平行樣。試驗設(shè)計：試驗16為向藻液中同時加入150 μL/L 次氯酸溶液和利用紫外燈處理0.5 h。同時陽性對照(CK7)為無菌狀態(tài)下的藻液，未經(jīng)任何處理；陰性對照(CK8)為受到污染的藻液，不經(jīng)過任何處理。以上試驗組均在避光條件下進(jìn)行操作，試驗組通入空氣與二氧化碳的混合氣16 h，檢測慶大霉素殘留量，期間藻液避光。16 h后，給10 000 lx人工光，開始正常養(yǎng)殖5 d，每24 h進(jìn)行OD檢測。

1.5生物量的測定[32-33]取一定體積量V的藻液先利用3 500 r/min 進(jìn)行離心分離藻細(xì)胞和培養(yǎng)液，藻液中若有細(xì)菌此時由于其自身質(zhì)量輕、形態(tài)小，將在培養(yǎng)液層存在；再加入5倍V體積量的一次水進(jìn)行溶解藻泥層，待混勻后進(jìn)行抽濾，此時將藻細(xì)胞截留在濾膜(恒定質(zhì)量，m0)上，并用等體積量蒸餾水懸浮藻細(xì)胞3次，最后將濾膜于105 ℃的烘箱過夜至恒定質(zhì)量，冷卻后稱量m1。細(xì)胞質(zhì)量濃度(g/L)=(m1-m0) /V。

2 結(jié)果與分析

2.1不同抗生素對藻細(xì)胞生長的影響圖1為5種抗生素在3種濃度梯度下對眼點擬微綠球藻生長的影響程度。通過生物量生長數(shù)據(jù)對比可知，慶大霉素、四環(huán)素和紅霉素在200 mg/L以內(nèi)對藻細(xì)胞無明顯的抑制作用;而青霉素在50 mg/L 時藻細(xì)胞就有較小的抑制作用，達(dá)到100 mg/L以上時對藻細(xì)胞抑制作用非常顯著；氯霉素在50 mg/L對藻細(xì)胞無明顯的抑制作用，當(dāng)濃度達(dá)到100 mg/L以上時對藻細(xì)胞的抑制隨著濃度的增加而顯著提高。

圖1 不同抗生素對眼點擬微綠球藻細(xì)胞生長的影響 Fig.1 Effect of different antibiotics on the growth of Nannochloropsis oculata cells

2.2不同抗生素對藻液細(xì)菌污染治理方法的研究由圖2可知，污染藻液的陰性對照組(CK1組)未經(jīng)任何處理，其藻細(xì)胞經(jīng)過幾日的連續(xù)培養(yǎng)，藻細(xì)胞逐漸大幅死亡，同時藻液中明顯短桿狀細(xì)菌增加。硫酸慶大霉素處理組(試驗組1)和四環(huán)素處理組(試驗組2)，污染的藻細(xì)胞生長狀態(tài)良好；其中試驗組1藻細(xì)胞生長狀態(tài)與空白對照組(CK2組)生長狀態(tài)相當(dāng)；試驗組2前期抑菌效果明顯，藻細(xì)胞生長狀態(tài)良好，但后期抑菌效果差，細(xì)菌又得到大量繁殖，藻細(xì)胞生長受到明顯的影響。紅霉素處理組(試驗組3)對導(dǎo)致藻細(xì)胞死亡的細(xì)菌無明顯的治理作用，其試驗組3藻細(xì)胞初期就開始死亡，細(xì)胞濃度呈現(xiàn)快速下降趨勢。在選用的3種抗生素中，對導(dǎo)致擬微綠球藻死亡的細(xì)菌，有效的抗生素有慶大霉素，四環(huán)素短期有效，紅霉素對該類細(xì)菌無抑制效果。

圖2 不同抗生素對眼點擬微綠球藻的細(xì)菌污染治理情況對比Fig.2 Comparison of bacterial contamination control of Nannochloropsis oculata with different antibiotics

2.3慶大霉素去除方法的研究

2.3.1硫酸慶大霉素檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果。圖3為以LB培養(yǎng)基作為金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)體系、加入低濃度慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)液(2、4、6、8、10 mg/L)培養(yǎng)3 h后檢測的OD580結(jié)果。從圖中可以看出，培養(yǎng)3 h后，菌懸液OD均與慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品中的慶大霉素濃度呈線性關(guān)系，且慶大霉素濃度越高，菌懸液OD越低，即慶大霉素濃度越高，對金黃色葡萄球菌的滅殺性越好，細(xì)菌的增長量越低。根據(jù)線性擬合結(jié)果Y=-6.355 7X+11.351 0(R2=0.991 7)可知，3 h時檢測結(jié)果的線性關(guān)系良好。因此，利用比濁法檢測水中慶大霉素時，應(yīng)以LB培養(yǎng)基作為細(xì)菌的培養(yǎng)體系，培養(yǎng)3 h時進(jìn)行檢測的效果較好，且只能對低濃度的慶大霉素進(jìn)行檢測(檢測范圍為2～10 mg/L)，對于高濃度的待測樣品可進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)的稀釋處理。

圖3 測試樣品中慶大霉素濃度變化Fig.3 Change of gentamicin concentration in the test sample

2.3.2慶大霉素去除方法的比較。各試驗組的出水慶大霉素濃度和慶大霉素去除率見圖4。根據(jù)檢測結(jié)果可知，試驗5(臭氧處理0.5 h)水樣中慶大霉素濃度約為13.40 mg/L，去除率為81.83%；臭氧處理1.0 h組(試驗組6)、臭氧處理2.0 h組(試驗組7)水樣中慶大霉素濃度分別為12.78和3.80 mg/L，折合去除率分別為82.69%和94.84%。臭氧氧化法去除水中慶大霉素具有一定穩(wěn)定性和可應(yīng)用性，隨著作用時間的增加，慶大霉素的去除率可達(dá)到95%左右。而CK3對照組慶大霉素去除率為97.11%，表明藻液中通入臭氧后再經(jīng)過20 min的曝氣將過多的臭氧去除的方法對細(xì)菌無明顯的致死作用，而且也消除了可能殘留的臭氧氣體對慶大霉素的干擾。

用一定濃度的有效氯氧化去除水中慶大霉素時，去除效果受有效氯添加量影響嚴(yán)重。15 mg/L有效氯組(試驗組8)水樣中慶大霉素濃度為34.23 mg/L，去除率為53.60%；50 mg/L 有效氯組(試驗組9)水樣中慶大霉素濃度為25.73 mg/L，去除率為65.12%；100 mg/L有效氯組(試驗組10)水樣中慶大霉素濃度為1.98 mg/L，去除率為97.31%，即添加有效氯的量低于50 mg/L時對慶大霉素去除效果較差，當(dāng)添加的有效氯達(dá)到100 mg/L時，水樣中慶大霉素含量降至1 mg/L以下時去除效果較好；且通過對CK4對照組結(jié)果可知，有效氯的加入對慶大霉素濃度的檢測結(jié)果基本無影響。

圖4 慶大霉素的化學(xué)方法去除對比Fig.4 Comparison of chemical removal of gentamicin

在圖4方法的基礎(chǔ)上，慶大霉素去除方法的使用過程中又增加了紫外照射的方法，2種方法結(jié)合對慶大霉素的去除效果如圖5所示。根據(jù)檢測結(jié)果可知，臭氧+紫外處理0.5 h組(試驗組11)水樣中慶大霉素濃度為2.30 mg/L，去除率達(dá)到97.41 %；15 mg/L有效氯+紫外處理0.5 h組(試驗組12)水樣中慶大霉素濃度為8.51 mg/L，去除率達(dá)到90.44%；50 mg/L有效氯+紫外處理0.5 h組(試驗組13)水樣中慶大霉素濃度為6.13 mg/L，去除率達(dá)到93.12%。2種方法的組合使用比單獨每一種方法的去除效果明顯。而單獨使用紫外處理其慶大霉素的去除效果較差，紫外處理0.5 h組(試驗組14)和紫外處理1.0 h(試驗組15)的慶大霉素去除率分別為32.61%和67.99%。

圖5 慶大霉素的物理方法去除對比Fig.5 Comparison of the physical methods of gentamicin removal

2.3.3細(xì)菌污染治理驗證試驗。慶大霉素的去除方法研究表明，有效氯和紫外照射這2種方法的共同作用對樣品中慶大霉素的去除具有很好的作用。但“2.3.2”中研究方法是將藻液中的藻細(xì)胞利用離心方式去除，僅針對離心后的清液水體進(jìn)行的方法研究。為此，在藻液中的應(yīng)用也進(jìn)行了研究，證實該方法在去除慶大霉素的同時，又對藻細(xì)胞本身無明顯的負(fù)作用。

圖6 藻液中慶大霉素去除方法對養(yǎng)殖的影響情況Fig.6 Effect of gentamicin removal method on culture in algae solution

由藻液中慶大霉素去除方法對養(yǎng)殖影響情況對比(圖6)可知，CK7對照組與CK8對照組藻細(xì)胞生長情況相當(dāng)，說明在慶大霉素治理藻細(xì)胞細(xì)菌污染時，慶大霉素的治理效果很好，治理后的藻細(xì)胞保持與無污染正常狀態(tài)下藻細(xì)胞相同的生長狀態(tài)；而試驗組16在慶大霉素去除的試驗前期藻細(xì)胞生長遲緩，藻細(xì)胞第1天負(fù)增長，從第2天開始逐漸恢復(fù)，說明慶大霉素去除方法中的15 mg/L有效氯對藻細(xì)胞具有一定的損傷，隨著養(yǎng)殖天數(shù)的增加，藻細(xì)胞形狀逐漸恢復(fù)，生長趨于正常。治理后的第2天，測定藻液中的慶大霉素含量，CK8的慶大霉素含量為80.15 mg/L，通過有效氯和紫外2種方法一同處理的試驗組16中慶大霉素含量為5.05 mg/L，則慶大霉素的去除率為93.70%。

3 討論與結(jié)論

該研究過程中，首先通過藻細(xì)胞對5種抗生素的耐受性選擇，選定3種抗生素；并對3種抗生素對污染藻液進(jìn)行污染治理效果的篩選，確定出硫酸慶大霉素對眼點擬微綠球藻中致死菌具有很好的滅殺作用，并可將受到細(xì)菌污染的藻液治愈成生長速度正常的藻細(xì)胞，有利于微藻的持續(xù)養(yǎng)殖。該試驗選出的最佳試劑為慶大霉素，參考劉曉娟等[26]給出的慶大霉素對眼點擬微綠球藻細(xì)胞的生長抑制率為8.95%的結(jié)論，可以初步確定硫酸慶大霉素對藻細(xì)胞負(fù)作用較低，而且對細(xì)菌具有良好的致死作用。該方法有利于戶外連續(xù)養(yǎng)殖的穩(wěn)定性。雖然硫酸慶大霉素對藻液中致死菌具有較好的殺滅作用，但硫酸慶大霉素畢竟是一種抗生素，如果將殘留慶大霉素的水體外排將嚴(yán)重污染環(huán)境[24]。因此該研究考察幾種方法單獨處理慶大霉素的作用效果，以及2種方法聯(lián)合處理慶大霉素的作用效果。

從試驗數(shù)據(jù)可知，單獨使用治理方法中，通入臭氧2 h和100 mg/L高濃度有效氯的方法對慶大霉素的去除效果最好，去除效率可達(dá)到97%以上。雖然慶大霉素的去除率很高，但由于單獨方法中單一方法使用藥劑的劑量或作用時長較大，對藻細(xì)胞的損傷很大，有些劑量最嚴(yán)重可導(dǎo)致藻細(xì)胞死亡，因此這些方法不適宜對慶大霉素處理后的藻液再進(jìn)行慶大霉素的去除。但是單一的去除方法作用簡單、操作簡便、慶大霉素去除率高，這些優(yōu)點可將該方法應(yīng)用于去除藻細(xì)胞后的清液的慶大霉素的去除，將清液中的慶大霉素含量盡可能地降到最低，為抗生素的深入去除奠定基礎(chǔ)。

在2種方法聯(lián)合處理慶大霉素方面：臭氧0.5 h+紫外0.5 h和15 mg/L有效氯+紫外0.5 h，這2種聯(lián)合作用方法在去除慶大霉素方面效果最好，去除率可達(dá)90%以上。上述方法均可應(yīng)用到藻液中，但臭氧較長時間通入到藻液中，會對藻細(xì)胞產(chǎn)生較為嚴(yán)重的負(fù)影響。該試驗中所采用的15 mg/L有效氯+紫外0.5 h的方法是非常有效的一種去除藻細(xì)胞中慶大霉素殘留的方法，雖然應(yīng)用前期也存到一些負(fù)影響，其原因是有效氯對藻細(xì)胞的作用導(dǎo)致藻細(xì)胞受到一定損傷，但藻細(xì)胞性狀很快就能得到恢復(fù)，達(dá)到之前的生長速度，因此該方法可作為室內(nèi)外養(yǎng)殖的藻種環(huán)節(jié)針對該類細(xì)菌污染時的一種有效的治理方法，也為微藻穩(wěn)定養(yǎng)殖提供細(xì)菌污染治理方面的數(shù)據(jù)積累和技術(shù)支持，為眼點擬微綠球藻的穩(wěn)定養(yǎng)殖提供一種有效的治理細(xì)菌污染的方法，促進(jìn)該藻株的穩(wěn)定養(yǎng)殖及產(chǎn)業(yè)化推廣，有助于EPA飼料產(chǎn)業(yè)及EPA產(chǎn)品市場的發(fā)展。