自制鹽酸普羅帕酮片與參比制劑溶出度的一致性評價

陳志江，陶 敏，彭 龍，劉 燕，楊 陽，梅興國，舒 婷

(1.湖北科技學(xué)院藥學(xué)院，咸寧 437000；2.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所，北京 100850)

鹽酸普羅帕酮是IC(即直接作用于細(xì)胞膜)類抗心律失常藥，屬廣譜抗心律失常藥物，其在水中極微溶解，屬于BCS分類Ⅱ類，普羅帕酮具有廣譜、起效迅速、療效確切、維持時間長以及不良反應(yīng)較少等優(yōu)點(diǎn)?？诜?～3 h到達(dá)藥效頂峰，t1/2為3.4～4 h，藥效作用時間可持續(xù)8 h以上，其主要作用機(jī)制是阻斷心肌細(xì)胞膜的鈉離子通道，阻滯心肌的折返激動，同時延長不應(yīng)期，降低心肌的興奮性，對異位刺激或因折返機(jī)制引起的心律失常有良好的療效[1-11]。鹽酸普羅帕酮對室性及室上性心律失常均有顯著的療效，據(jù)報道，對房室結(jié)折返性心動過速(AVNRT)和房室折返性心動過速(AVRT)轉(zhuǎn)復(fù)率最高可達(dá)100%和81%。對一些無法反判斷QRS波的快速型心律失常也可選用，由其他多種原因所致心律失常(且其他類型抗心律失常藥效用不明顯)如頻發(fā)性房性期前收縮、房性心動過速、陣發(fā)性室上性心動過速、心房撲動、陣發(fā)性房顫和頻發(fā)頑固性心律失常等(既往他種抗心律失常藥物而效用不明顯者)均可給予普羅帕酮進(jìn)行治療。

研究表明，普羅帕酮具有治療窗窄、個體差異大的特點(diǎn)，經(jīng)常有嚴(yán)重的心血管毒性和不良反應(yīng)，而國內(nèi)部分企業(yè)的制劑質(zhì)量與原研藥品相差較大，表現(xiàn)為溶出曲線不相似。為了全面考察自制片劑的質(zhì)量，根據(jù)《中國藥典》附錄[12]配制4種溶出介質(zhì)，對自制片與參比制劑進(jìn)行了溶出曲線比較，采用相似因子法對其進(jìn)行體外溶出一致性評價。

1 儀器與試藥

1.1儀器 708-DS智能溶出儀(美國安捷倫科技有限公司)；UV-1800紫外分光光度計(日本島津公司)；BT25S電子天平(德國Sartorius集團(tuán))。

1.2試藥 鹽酸普羅帕酮原料藥(河南輔仁制藥廠)；鹽酸普羅帕酮對照品(中國食品藥品檢定研究院)；鹽酸普羅帕酮片(自制，規(guī)格為50 mg，批號：20170928，20170930，20171003)；鹽酸普羅帕酮片參比制劑(悅復(fù)隆?，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1檢測波長的確定 精密稱取鹽酸普羅帕酮對照品，配制成質(zhì)量濃度為20 μg·mL-1的對照品溶液，按照紫外分光光度法在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明，藥物在250 nm波長處有最大吸收，故選用250 nm 作為測定波長。

2.2濾膜吸附的考察 精密稱取10 mg原料藥，配制成質(zhì)量濃度為20 μg·mL-1的溶液，取溶液適量，0.45 μm水相濾膜過濾，平行制備6份濾過液，分別在最大吸收波長250 nm處測定吸光度值。結(jié)果顯示，樣品濾前吸光度值為0.403，平行6份濾過液吸光度值分別為0.380，0.389，0.393，0.395，0.395和0.395，計算RSD值為1.77%，小于2%，說明0.45 μm水相濾膜對藥物無吸附作用。

2.3專屬性實(shí)驗(yàn) 取空白片、自制片(批號20170928)，分別加入4種溶出介質(zhì)，按照2.1項下方法配制質(zhì)量濃度為20 μg·mL-1的供試品溶液和空白對照溶液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果見圖1，空白輔料及釋放介質(zhì)對本品釋放度測定無干擾，說明本方法專屬性良好。

圖1專屬性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Fig.1 Specificity test results

2.4線性考察 精密稱取鹽酸普羅帕酮對照品10 mg，置于100 mL量瓶中，分別加入適量4種溶出介質(zhì)溶解并定容，作為母液。精密移取母液0.05，0.1，0.5，1.0，2.0，4.0和6.0 mL，分別置于10 mL量瓶中，加入上述介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為各對照品溶液。以釋放介質(zhì)為空白對照，分別在250 nm處測定吸光度值。以質(zhì)量濃度C對吸光度值A(chǔ)進(jìn)行線性回歸，計算相關(guān)系數(shù)r。結(jié)果見表1，普羅帕酮質(zhì)量濃度在0.5～60 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取鹽酸普羅帕酮片，以1 000 mL水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r·min-1，依法操作，經(jīng)3 min時，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按照紫外-可見分光光度法(《中國藥典》2010年版二部附錄ⅣA)，分別于0，2，4，6，8和12 h，在250 nm波長處測定其吸光度值，測定結(jié)果顯示，樣品6次吸光度值分別為0.948，0.946，0.940，0.943，0.946和0.953，RSD值為0.445%，小于2%，說明溶液穩(wěn)定性良好。

表1回歸方程和相關(guān)系數(shù)

Tab.1 Regression equations and correlation coefficients (n=3)

2.6重復(fù)性 取自制制劑6片(批號20170928)，按照2.1項下方法進(jìn)行溶出度測定，在45 min時間點(diǎn)取樣，濾過，測定溶液吸光度值，計算溶出度及RSD值，見表2。結(jié)果表明，該方法對同一批樣品測定重復(fù)性良好。

表2不同介質(zhì)測定重復(fù)性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

Tab.2 Repeatability of different media

溶出介質(zhì)均值變異系數(shù)/%pH 1.2緩沖液0.2511.320pH 4.0緩沖液0.2600.793pH 6.8緩沖液0.2580.621水0.2421.785

2.7回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取適量鹽酸普羅帕酮對照品，加入處方量的輔料，按照2.8項下方法，分別配制50%，100%和150% 3種不同濃度，取續(xù)濾液作為供試品溶液。測定其吸光度值，進(jìn)行加樣回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表3，結(jié)果顯示，4種介質(zhì)下的平均回收率均在98%～102%之間，說明本方法準(zhǔn)確度良好。

2.8測定法 取本品，按照溶出度與釋放度測定法(通則0931第一法)[12]，溶出介質(zhì)體積為1 000 mL，溫度為37 ℃，轉(zhuǎn)速為75 r·min-1，依法操作，經(jīng)5，10，15，20，30和45 min時，取溶液20 mL，棄去至少10 mL初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液，按照紫外-可見分光光度法(通則0401)，在250 nm波長處測定吸光度值；另取鹽酸普羅帕酮對照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋成質(zhì)量濃度為1 μg·mL-1的溶液，同法測定，計算每片的溶出量。限度為標(biāo)示量的70%，符合規(guī)定。

2.9溶出曲線比較 按照2.8項下方法操作，分別以pH 1.2，pH 4.0，pH 6.8和水4種溶出介質(zhì)對3批自制鹽酸普羅帕酮片和1批參比制劑(各6片)進(jìn)行體外溶出實(shí)驗(yàn)，測定吸光度值并計算各時間點(diǎn)的累積溶出度，結(jié)果見表4。

結(jié)果表明，在4種溶出介質(zhì)中，與進(jìn)口參比制劑的溶出曲線比較，3批自制片溶出曲線的f2>50，且累積溶出度均大于規(guī)定限度，可認(rèn)為與進(jìn)口產(chǎn)品溶出行為相似。

表3回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.3 Results of recovery test

序號加入量/μg·mL-1測得量/μg·mL-1平均回收率/%RSD/%110.2610.331100.260.43210.1710.233310.1510.184420.1220.220520.1319.976620.0820.123730.3830.453830.2430.257930.1730.306

表4不同介質(zhì)下不同批號自制鹽酸普羅帕酮與參比制劑的累積溶出度

Tab.4 The cumulative drug release profile of self-prepared Propafenone Hydrochloride of different batches and reference preparation in different media

溶出介質(zhì)批號不同時間(min)溶出度/%051015203045f2pH 1.2緩沖液2017092807.8634.2257.0776.0599.74101.0161.52017093006.1033.1756.6978.33100.96102.2462.432017100205.7230.5957.7580.16102.03103.1862.42參比制劑0 6.4124.4149.1576.0797.03100.36pH 4.0緩沖液20170928013.0940.0472.7190.8598.4199.7473.062017093007.6836.6562.7586.7296.9198.3175.772017100207.5134.8764.0387.7996.6697.9977.35參比制劑010.8536.6368.2886.5797.8598.69水2017092809.4339.6866.9291.3295.7696.9372.992017093007.3437.7567.9091.1096.4697.9476.012017100207.8442.0173.0493.8297.3498.6767.42參比制劑010.7134.5971.4488.6695.6095.10pH 6.8緩沖液2017092807.0435.5963.5688.4796.2797.9571.092017093003.6426.2154.6378.0095.1097.2961.492017100204.2129.9760.6386.6798.5497.7469.20參比制劑010.1834.3860.8381.7097.7299.87

3 結(jié)論

參考相關(guān)文獻(xiàn)方法[13-20]，針對本品劑型的特點(diǎn)，采用紫外可見分光光度法測定鹽酸普羅帕酮片的溶出度，并建立了適用于本品溶出度檢測的紫外可見分光光度法。方法學(xué)研究表明，線性范圍、回收率、溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)等主要方法學(xué)指標(biāo)滿足檢測要求，所用的輔料對測定無干擾。3批自制鹽酸普羅帕酮片在4種介質(zhì)中，與進(jìn)口參比制劑的溶出曲線比較，溶出曲線的f2>50，且累積溶出度均大于規(guī)定限度，可認(rèn)為與進(jìn)口產(chǎn)品溶出行為相似，達(dá)到了一致性評價的目的，能更好地滿足臨床安全性和有效性的需求。