黃 偉，姜宜飛，吳進(jìn)龍

(農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，北京100125)

1 前言

二氯異噁草酮 CAS號(hào):81777－95－9，分子式:C12H13Cl2NO2，化學(xué)名稱(chēng):2－［(2，4－dichlorophenyl)methyl］－4，4－dimethyl－3－isoxazolidinone［1］。

目前國(guó)內(nèi)有關(guān)二氯異噁草酮懸浮劑的分析方法尚未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道。本文采用高效液相色譜法，對(duì)二氯異噁草酮懸浮劑進(jìn)行分析，該方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 乙腈:色譜純;超純水:電阻率18.2MΩ·cm(25℃);二氯異噁草酮標(biāo)樣:已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.6%(由農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所提供);二氯異噁草酮懸浮劑 (由某公司提供)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀:Agilent 1200，具有二極管陣列檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器;Agilent色譜工作站;Millipore超純水制備系統(tǒng);色譜柱:150mm×4.6mm(id)不銹鋼柱，內(nèi)裝Eclipse XDB－C8、3.5μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動(dòng)相:ψ(乙腈∶水) =50∶50(V/V);流量:1.0mL/min;柱溫:40℃;檢測(cè)波長(zhǎng):230nm;進(jìn)樣體積:5μL;保留時(shí)間:二氯異噁草酮約7.7min。

二氯異噁草酮懸浮劑的高效液相色譜圖(圖1)。

圖1 二氯異噁草酮懸浮劑高效液相色譜圖

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱(chēng)取二氯異噁草酮標(biāo)樣0.05g(精確至0.000 02g)，置于50mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱(chēng)取含二氯異噁草酮0.05g的試樣 (精確至0.000 02g)，置于50mL容量瓶中，用乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫，乙腈稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾。

2.4.3 測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器基線(xiàn)穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對(duì)變化＜1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4.4 計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中二氯異噁草酮峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中二氯異噁草酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω(%)，按式 (1)計(jì)算:

式中:

A1──標(biāo)樣溶液中二氯異噁草酮峰面積的平均值;

A2──試樣溶液中二氯異噁草酮峰面積的平均值;

m1──標(biāo)樣的質(zhì)量，g;

m2── 試樣的質(zhì)量，g;

P──標(biāo)樣中二氯異噁草酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過(guò)Agilent 1200高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得二氯異噁草酮的紫外波長(zhǎng)掃描圖 (圖2)。從圖中可以看到在230nm處二氯異噁草酮有較大吸收波長(zhǎng)，且該波長(zhǎng)下溶劑不會(huì)對(duì)其產(chǎn)生顯著干擾，故將檢測(cè)波長(zhǎng)定為230nm。

色譜柱選擇常用的Eclipse XDB－C8反相柱。依據(jù)二氯異噁草酮物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收截止波長(zhǎng)，用乙腈作為溶劑溶解樣品，并選擇乙腈和水作為流動(dòng)相。將流動(dòng)相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)，最終確定流動(dòng)相為ψ(乙腈∶水) =50∶50，在流速1.0mL/min時(shí)，有效成分與雜質(zhì)能得到很好的分離，峰形對(duì)稱(chēng)，基線(xiàn)平穩(wěn)，并且分析時(shí)間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的線(xiàn)性相關(guān)性試驗(yàn) 將2.4.1中配制的標(biāo)樣溶液在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，進(jìn)樣量分別為2、3、5、8、10μL，以二氯異噁草酮質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得線(xiàn)性方程為y=1 944.1x+229.54，其線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

3.3 分析方法的精密度試驗(yàn) 從同一產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱(chēng)取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得二氯異噁草酮的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.06，變異系數(shù)為0.17%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

3.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn) 從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的二氯異噁草酮懸浮劑 (36.55%)中稱(chēng)取5個(gè)試樣，分別加入一定量的二氯異噁草酮標(biāo)樣(99.6%)，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得二氯異噁草酮的平均回收率為99.96%(表2)。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線(xiàn)性關(guān)系良好，并且操作簡(jiǎn)便、快速，是進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)較理想的分析方法。