任勤 程尚 王瑞生 曹蘭 姬聰慧

（重慶市畜牧科學(xué)院蜂業(yè)研究所，榮昌 402460）

蜜蜂營養(yǎng)雜交是指把甲蜂種的幼蟲提供給乙蜂種飼喂后，由甲蜂種幼蟲發(fā)育而來的蜜蜂具有乙蜂種的遺傳特性[1]。Ruttner[2]早在1957年就對(duì)西方蜜蜂不同品種間進(jìn)行了營養(yǎng)雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示雜交后代在形態(tài)上不同程度的出現(xiàn)某種品種的特征[2]。Smaragdova[3]，Rinderer[4]等先后也進(jìn)行了意大利蜜蜂不同品種間的營養(yǎng)雜交實(shí)驗(yàn)，得出相同的結(jié)論。我國學(xué)者進(jìn)行用意蜂王漿飼喂中蜂蜂王的營養(yǎng)雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，在中蜂子代個(gè)體上出現(xiàn)了意蜂的體色特征[5,6]，但都集中在形態(tài)方面，對(duì)蜂王初生重、繁殖能力、蜂群生產(chǎn)性能等很少涉及。近年來，蜜蜂科研工作者進(jìn)行了這方面的大量研究，涉及面不斷擴(kuò)大，主要集中在營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王初生重[7]、蜂王生殖能力[7,8]、工蜂初生重[9]、蜂群抗病性能[10]等方面。

本實(shí)驗(yàn)通過人工飼喂新鮮意蜂王漿給中蜂蜂王幼蟲，培育出營養(yǎng)雜交中蜂蜂王，并測(cè)定了營養(yǎng)雜交蜂王初生重、產(chǎn)卵力、子一代工蜂初生重以及子一代蜂群抗囊狀幼蟲病能力，并對(duì)實(shí)驗(yàn)過程中的操作方法進(jìn)行了探索和實(shí)踐。本研究結(jié)果可作為蜂王培育及育種過程中如何提高蜂王品質(zhì)及提升蜂群整體抗病能力的理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)蜂群

中華蜜蜂Apis cerana cerana（簡(jiǎn)稱“中蜂”）30群，意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica（簡(jiǎn)稱“意蜂”）5群，由重慶市南川區(qū)珙桐林養(yǎng)蜂專業(yè)合作社試驗(yàn)蜂場(chǎng)提供，自然條件下現(xiàn)代活框飼養(yǎng)，管理水平一致，蜂子比及蜂群內(nèi)蜜粉量基本一致，健康無病，品種統(tǒng)一。

1.1.2 設(shè)備與儀器

育王框，蜂王產(chǎn)卵控制器，臺(tái)基棒，分析天平，注射器，鑷子，眼科剪，恒溫恒濕培養(yǎng)箱等。

1.2 方法

1.2.1 新鮮王漿獲取

將育王框置于事先組織好的意大利蜂群中，待蜂群清理干凈后，移入意大利蜜蜂小幼蟲，讓蜂群吐漿培育，用注射器吸取所需王漿即可。

1.2.2 營養(yǎng)雜交

將事先準(zhǔn)備好的育王框置于意大利蜂群中讓蜂群清理12h后，移入意大利蜜蜂小幼蟲，待24h后將王臺(tái)中的小幼蟲用鑷子取出，移入中華蜜蜂小幼蟲，然后將育王框置于中華蜜蜂蜂群中繼續(xù)培育并定期人工飼喂意大利蜜蜂王漿。王臺(tái)封蓋后，將王臺(tái)移到恒溫恒濕培養(yǎng)箱中進(jìn)行培育。

1.2.3 雜交王及后代初生重測(cè)定

蜂王出臺(tái)后馬上用電子天平稱其體重，然后將蜂王介紹到交尾群中讓其自然交尾，蜂王產(chǎn)卵后代即為雜交中蜂一代。蜂王產(chǎn)卵后，將蜂王置于蜂王產(chǎn)卵控制器中，并放1張空巢脾，讓蜂王產(chǎn)卵，幼蟲封蓋后，將封蓋子脾置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中人工培育，工蜂開始出房后測(cè)定其初生重。

1.2.4 雜交蜂王產(chǎn)卵力測(cè)定

產(chǎn)育力是蜂王產(chǎn)卵力和工蜂哺育力的總和，一般用有效產(chǎn)卵量來衡量。測(cè)定方法為：制作4.4×4.4cm的方格，一個(gè)方格大約有100個(gè)巢房（封蓋子），每11天測(cè)定一次封蓋子數(shù)量，重復(fù)3次，然后統(tǒng)計(jì)總封蓋子數(shù)。

1.2.5 雜交后代蜂群抗病力測(cè)定

分別對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行人為感染囊狀幼蟲病病毒，10天后進(jìn)行抗病力測(cè)試。具體方法：將囊狀病病毒均勻拌入稀糖水中，飼喂給實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每次飼喂量保持500ml，連續(xù)飼喂3天，10天后，對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中的每群蜂隨機(jī)選取5個(gè)封蓋子區(qū)域（利用4.4×4.4cm方格測(cè)定，每方格100個(gè)封蓋子）測(cè)定發(fā)病封蓋子數(shù)，統(tǒng)計(jì)每群蜂單位面積內(nèi)封蓋子的發(fā)病率。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

使用Excel 2013版和SPSS 21.0進(jìn)行數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。當(dāng)P<0.05時(shí)，差異達(dá)到顯著水平；P<0.01時(shí)，差異達(dá)到極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 營養(yǎng)雜交最適條件及方法

2.1.1 冷凍王漿和新鮮王漿對(duì)王臺(tái)接受率的影響

冷凍王漿和新鮮王漿對(duì)王臺(tái)接受率的影響如表1所示，實(shí)驗(yàn)組王臺(tái)接受率顯著高于對(duì)照組王臺(tái)接受率（P<0.01）。

表1 冷凍王漿和新鮮王漿對(duì)王臺(tái)接受率的影響

2.1.2 提框換移蟲時(shí)間控制

為了保持王臺(tái)內(nèi)部王漿充足、新鮮且不過量，在對(duì)不同時(shí)間王臺(tái)內(nèi)部王漿量進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，在移蟲24h時(shí)王臺(tái)內(nèi)部王漿量適宜，而且保持新鮮。因此，在移蟲利用意大利蜜蜂飼喂24h后進(jìn)行換移蟲操作。

2.1.3 注射器飼喂王漿時(shí)王臺(tái)高度控制

在人工進(jìn)行飼喂時(shí)發(fā)現(xiàn)，王臺(tái)封蓋高低嚴(yán)重影響注射器插入飼喂，故在每次進(jìn)行飼喂時(shí)用眼科剪將王臺(tái)減掉一圈，高度2～3mm，連續(xù)3天后讓王臺(tái)自然封蓋即可。

2.2 營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王初生重影響

營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王初生重的影響如表2所示，實(shí)驗(yàn)組蜂王平均初生重顯著高于對(duì)照組蜂王初生重（P<0.01）。

表2 營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王初生重的影響

2.3 營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王產(chǎn)卵力影響

營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王產(chǎn)卵力的影響如表3所示，實(shí)驗(yàn)組蜂王有效產(chǎn)卵力顯著高于對(duì)照組蜂王有效產(chǎn)卵力（P<0.01）。

表3 營養(yǎng)雜交對(duì)蜂王產(chǎn)卵力的影響

2.4 營養(yǎng)雜交對(duì)子一代工蜂初生重影響

營養(yǎng)雜交對(duì)子一代初生重的影響如表4所示，實(shí)驗(yàn)組工蜂平均初生重顯著高于對(duì)照組工蜂初生重（P<0.01）。

表4 營養(yǎng)雜交對(duì)子一代工蜂初生重的影響

2.5 營養(yǎng)雜交對(duì)蜂群抗病力影響

營養(yǎng)雜交對(duì)子代蜂群抗病力的影響如表5所示，實(shí)驗(yàn)組蜂群發(fā)病率明顯低于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組蜂群發(fā)病程度顯著低于對(duì)照組蜂群發(fā)病程度（P<0.01）。

表5 營養(yǎng)雜交對(duì)子代蜂群抗病力的影響

3 討論

利用新鮮王漿培育蜂王王臺(tái)接受率明顯高于利用冷凍王漿培育蜂王的王臺(tái)接受率，這可能與蜂王漿在冷凍保存過程中形狀和營養(yǎng)成分發(fā)生改變有關(guān)。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過程中發(fā)現(xiàn)，為保證王臺(tái)內(nèi)部王漿新鮮且充足的情況，在移蟲24h時(shí)進(jìn)行換移蟲操作。王臺(tái)封蓋高低嚴(yán)重影響注射器插入飼喂，故在每次進(jìn)行飼喂時(shí)用眼科剪將王臺(tái)減掉一圈，高度2～3mm，這樣既不影響王臺(tái)封蓋，而且還能提高飼喂效率和飼喂難度。對(duì)蜂王性能影響研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能顯著提高蜂王初生重和產(chǎn)卵能力，平均分別提高20mg和100粒左右。對(duì)子一代工蜂初生重影響研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能提高子一代初生重，平均增重10mg左右。對(duì)子一代蜂群抗囊狀幼蟲病研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能提高蜂群整體抗囊狀幼蟲病能力，在整體發(fā)病率和發(fā)病程度上有明顯降低。

本研究結(jié)果顯示，不管是個(gè)體還是群體，營養(yǎng)雜交在一定程度上都可以提高蜂群的整體性能，故在培育蜂王或者育種中都可以參考。