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      AP—4、EZH2基因表達(dá)量與子宮內(nèi)膜癌病灶中細(xì)胞凋亡、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究

      2018-10-30 10:17:44季福水
      醫(yī)學(xué)信息 2018年14期
      關(guān)鍵詞:癌細(xì)胞上皮內(nèi)膜

      季福水

      摘 要:目的 研究AP-4、EZH2基因表達(dá)量與子宮內(nèi)膜癌病灶中細(xì)胞凋亡、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性。方法 回顧分析2017年1月~2018年1月在我院進(jìn)行切除術(shù)治療的35例子宮內(nèi)膜癌患者臨床資料,收集子宮內(nèi)膜癌病灶和癌旁病灶適量,提取RNA后分別測(cè)定AP-4、EZH2基因表達(dá)量,進(jìn)一步測(cè)定病灶中細(xì)胞凋亡、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化基因的表達(dá)量。結(jié)果 子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4、EZH2基因表達(dá)量高于癌旁病灶,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于癌旁病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin的mRNA表達(dá)量低于癌旁病灶;AP-4高表達(dá)病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76的mRNA表達(dá)量高于低表達(dá)病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達(dá)量低于AP-4低表達(dá)病灶;EZH2高表達(dá)病灶內(nèi)ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于EZH2低表達(dá)病灶,α-catenin的mRNA表達(dá)量低于EZH2低表達(dá)病灶。結(jié)論 宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4、EZH2基因高表達(dá)量,可以抑制癌細(xì)胞凋亡、促進(jìn)癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,值得臨床予以重視和關(guān)注。

      關(guān)鍵詞:AP-4、EZH2基因;子宮內(nèi)膜癌;細(xì)胞凋亡;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

      中圖分類號(hào):R737.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2018.14.026

      文章編號(hào):1006-1959(2018)14-0092-03

      Abstract:Objective To investigate the correlation between the expression of AP-4 and EZH2 gene and apoptosis and epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer.Methods The clinical data of 35 patients with endometrial cancer who underwent resection in our hospital from January 2017 to January 2018 were retrospectively analyzed.Endometrial cancer lesions and adjacent lesions were collected.After RNA extraction,AP-4 was determined.The expression level of EZH2 gene was further measured in the lesions and the expression level of epithelial-mesenchymal transition genes.Results The expression of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions was higher than that in adjacent lesions,and the difference was statistically significant(P<0.05).The mRNA expression levels of SRPX2,RLIP76,ZEB1,SALL4,TET1,RANKL and N-cadherin in endometrial cancer lesions were higher than those in adjacent lesions,and the mRNA expression levels of Fat-1,ITLN-1,Caspase-3 and α-catenin were higher.The mRNA expression levels of Fat-1,ITLN-1,Caspase-3 and α-catenin were lower than those of adjacent lesions.The mRNA expression of SRPX2 and RLIP76 in AP-4 high expression lesions was higher than that of low expression lesions,F(xiàn)at-1 and ITLN.-1,Caspase-3 mRNA expression was lower than AP-4 low expression lesion;EZH2 high expression lesions ZEB1,SALL4,TET1,RANKL,N-cadherin mRNA expression was higher than EZH2 low expression lesion,the mRNA expression level of α-catenin was lower than that of EZH2 low expression lesions.Conclusion The high expression levels of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions can inhibit cancer cell apoptosis and promote cancer cell epithelial-mesenchymal transition.It is worthy of clinical attention.

      Key words:AP-4,EZH2 gene;Endometrial cancer;Apoptosis;Epithelial-mesenchymal transition

      子宮內(nèi)膜癌(endometrial cancer,EC)是臨床女性常見的惡性腫瘤,與患者的生活習(xí)慣、非正規(guī)雌激素替代質(zhì)量等因素相關(guān)[1]。尤其是今年來發(fā)病率不斷升高,嚴(yán)重威脅患者的生命健康安全。病灶內(nèi)細(xì)胞凋亡和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化異常是子宮內(nèi)膜癌的重要病理特點(diǎn),臨床研究其調(diào)節(jié)機(jī)制具有重要的作用,本文結(jié)合臨床病例,分析子宮內(nèi)膜癌病灶中AP-4、EZH2基因表達(dá)量的變化情況和相應(yīng)的生物學(xué)作用,希望為臨床子宮內(nèi)膜癌的診斷、治療提供一定的參考,為臨床的治療效果的監(jiān)測(cè)提供判斷依據(jù)?,F(xiàn)報(bào)告如下:

      1資料與方法

      1.1一般資料 回顧分析2017年1月~2018年1月在天津市靜海區(qū)醫(yī)院進(jìn)行切除術(shù)治療的35例子宮內(nèi)膜癌患者臨床資料,本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。年齡26~46歲,平均年齡(38.10±3.18)歲;絕經(jīng)30例,未絕經(jīng)16例;其中Ⅰ級(jí)9例,Ⅱ級(jí)15例,Ⅲ級(jí)11例。納入標(biāo)準(zhǔn):①均經(jīng)分段診刮術(shù)病理學(xué)確診為子宮內(nèi)膜癌;②患者自愿參加本研究,并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①病理證實(shí)合并有子宮內(nèi)膜異位癥或?qū)m頸癌、卵巢癌等其他惡性腫瘤;②入院時(shí)有急性炎癥的患者;③有精神、智力障礙,語言表達(dá)障礙者。

      1.2研究方法

      1.2.1標(biāo)本采集 手術(shù)后留取子宮內(nèi)膜癌病灶、癌旁病灶適量,用生理鹽水清洗后冷凍于液氮中,于15~30 min后取出病灶樣本,在-70 ℃超低溫冰箱內(nèi)長(zhǎng)期保存[2]。

      1.2.2基因表達(dá)量測(cè)量 取癌病灶、癌旁病灶樣本適量,使用裂解液分離病灶內(nèi)的RNA,使用試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA進(jìn)行PCR反應(yīng),所用引物分別針對(duì)AP-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因,依據(jù)PCR反應(yīng)曲線即可計(jì)算出相應(yīng)基因mRNA表達(dá)量[3]。

      1.3觀察指標(biāo) 觀察子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)A、癌旁病灶A(yù)P-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因表達(dá)量。

      1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究所有數(shù)據(jù)分析使用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析,計(jì)量資料采用(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2結(jié)果

      2.1子宮內(nèi)膜癌病灶和癌旁病灶中AP-4、EZH2基因表達(dá)量 子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4、EZH2基因表達(dá)量高于癌旁病灶,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

      2.2子宮內(nèi)膜癌病灶細(xì)胞凋亡基因表達(dá)量與AP-4的相關(guān)性 子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76的mRNA表達(dá)量高于癌旁病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達(dá)量低于癌旁病灶,見表2。AP-4高表達(dá)病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76的mRNA表達(dá)量高于低表達(dá)病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達(dá)量低于AP-4低表達(dá)病灶,見表3。

      2.3子宮內(nèi)膜癌病灶中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化基因表達(dá)量與EZH2的相關(guān)性 子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于癌旁病灶,α-catenin的mRNA表達(dá)量低于癌旁病灶,見表4。EZH2高表達(dá)病灶內(nèi)ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于EZH2低表達(dá)病灶,α-catenin的mRNA表達(dá)量低于EZH2低表達(dá)病灶,見表5。

      3討論

      隨著子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率的不斷提高,臨床對(duì)其有效治療方法越來越受重視。但是臨床缺少有效的治療手段,加之疾病的發(fā)病機(jī)制不完全明確,臨床治療難度較大[4]。為了有效的治療子宮內(nèi)膜癌,臨床研究其基因表達(dá)量與細(xì)胞凋亡、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性,希望使臨床治療更具有針對(duì)性。

      已有研究結(jié)果顯示,子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中AP-4和EZH2的表達(dá)分別能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,但關(guān)于子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4和EZH2表達(dá)量的變化以及相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)仍未明確[5]。本文通過研究顯示,子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4、EZH2基因表達(dá)量高于癌旁病灶。由此表明高表達(dá)量的AP-4、EZH2與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生密切相關(guān),且可能參與了細(xì)胞增殖、凋亡等過程,以調(diào)控子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生。AP-4是參與細(xì)胞凋亡和增值的調(diào)控分子,而子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和凋亡與多種凋亡基因的表達(dá)量相關(guān)。子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76的mRNA表達(dá)量高于癌旁病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達(dá)量低于癌旁病灶。同時(shí)AP-4高表達(dá)病灶內(nèi)SRPX2、RLIP76的mRNA表達(dá)量高于低表達(dá)病灶,F(xiàn)at-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達(dá)量低于AP-4低表達(dá)病灶。所以,子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)AP-4高表達(dá)可以促進(jìn)增殖基因的表達(dá),抑制凋亡基因的表達(dá),進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖,抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡。而EZH2參與細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,是癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移、侵襲能力增強(qiáng)的重要病理變化。本文研究結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜癌病灶內(nèi)ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于癌旁病灶,α-catenin的mRNA表達(dá)量低于癌旁病灶。同時(shí)EZH2高表達(dá)病灶內(nèi)ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達(dá)量高于EZH2低表達(dá)病灶,α-catenin的mRNA表達(dá)量低于EZH2低表達(dá)病灶。所以,高表達(dá)的EZH2會(huì)增加間質(zhì)轉(zhuǎn)化基因的表達(dá)和抑制上皮型基因的表達(dá),從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和侵襲。

      總之,對(duì)于子宮內(nèi)膜癌患者來說,病灶內(nèi)AP-4、EZH2基因呈高表達(dá)量,且高表達(dá)量的AP-4會(huì)抑制癌細(xì)胞凋亡或促進(jìn)癌細(xì)胞增殖,而高EZH2基因表達(dá)量會(huì)促進(jìn)癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。

      參考文獻(xiàn):

      [1]別延紅,李納,吳又明,等.轉(zhuǎn)錄因子增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-4基因沉默對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡的影響[J].山東醫(yī)藥,2017,57(2):5-9.

      [2]Lv QY,Xie BY,Yang BY,et al.Increased TET1 Expression in Inflammatory Microenvironment of Hyperinsulinemia Enhances the Response of Endometrial Cancer to Estrogen by Epigenetic Modulation of GPER[J].J Cancer,2017,8(5):894-902.

      [3]王娟,馬莉,陳靜,等.RNA干擾抑制EZH2基因表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展,2017,26(2):99-103.

      [4]Wang J,Liu Y,Wang L,et al.Clinical prognostic significanceand pro-metastatic activity of RANK RANKL via the AKT pathway in endometrial cancer[J].Oncotarget,2016,7(5):5564-5575.

      [5]Liu Y,Wang J,Ni T,et al.CCL20 mediates RANK RANKL-induced epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer cells[J].Oncotarget,2016,7(18):25-39.

      收稿日期:2018-5-7;修回日期:2018-5-17

      編輯/王海靜

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