邱小蘭　李玉閩　鐘昌瑞　陳維媚

【摘要】 目的：探討紅細(xì)胞不規(guī)則抗體分布特點(diǎn)及對(duì)輸血安全的影響。方法：選取筆者所在醫(yī)院臨床收治的3 272例申請(qǐng)輸血的患者作為研究對(duì)象，均行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查。對(duì)比紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性者與陰性者的輸血反應(yīng)情況。結(jié)果：33例患者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。陽(yáng)性檢出率為1.01%，其中男10例，陽(yáng)性檢出率為0.55%（10/1 811），女23例，陽(yáng)性檢出率為1.57%（23/1 461），女性紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率顯著高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者抗-e、抗-Lea、抗-Fya、抗-Jka檢出率最低，均為0.03%；抗-Ce檢出率也較低，為0.06%；抗-M檢出率最高，為0.21%；抗-E檢出率次之，為0.18%；再次為抗-Ec，為0.15%；抗-D、自身抗體及非特異性抗體檢出率均為0.09%。不規(guī)則抗體的Ig類型：IgG共22例（66.67%），IgM+IgG共5例（15.15%），IgM共6例（18.18%）。47例輸血后發(fā)生不良反應(yīng)，以蕁麻疹、瘙癢等過(guò)敏反應(yīng)占大部分比例，其中發(fā)熱/心率異常7例，溶血/血常規(guī)異常14例。血制品類別分布：懸浮紅細(xì)胞7例，血漿21例，血小板17例，冷沉淀2例。7例有妊娠史，12例有輸血史，14例有輸血合并妊娠史。356例輸紅細(xì)胞制劑患者為無(wú)效輸血，其中不規(guī)則抗體陽(yáng)性15例，占無(wú)效輸血人數(shù)的4.21%。結(jié)論：紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性會(huì)影響輸血安全，輸血前進(jìn)行抗體篩選、鑒定有助于減少輸血不良反應(yīng)和輸血無(wú)效的發(fā)生，保障輸血安全。

【關(guān)鍵詞】 輸血； 紅細(xì)胞； 不規(guī)則抗體； 不良反應(yīng)

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.20.030 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2018）20-00-03

血型為人類的遺傳性狀之一，不同人種、不同個(gè)體的血型抗原分布差異較大，異體輸血可產(chǎn)生不規(guī)則抗體，從而造成交叉配血困難，增加輸血不良反應(yīng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[1]。紅細(xì)胞不規(guī)則抗體，指的是紅細(xì)胞抗體以外的抗體，有輸血史或妊娠史的群體更易產(chǎn)生紅細(xì)胞不規(guī)則抗體，紅細(xì)胞不規(guī)則抗體可引起血型鑒定困難、新生兒溶血病、輸血不良反應(yīng)等，所以輸血前進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查、鑒定，對(duì)于保證輸血的有效性及輸血安全具有重要作用[2]。為了解紅細(xì)胞不規(guī)則抗體分布特點(diǎn)及對(duì)輸血安全的影響，本研究選取了3 272例輸血患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取筆者所在醫(yī)院2016年12月-2017年12月臨床收治的3 272例輸血患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：在筆者所在醫(yī)院輸注懸浮紅細(xì)胞的非孕期患者；ABO、RhD同型輸血，ABO正反定型相符；交叉配血試驗(yàn)為相合輸血；患者知情同意并簽署知情同意書；研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有繼續(xù)失血者，如隱性失血、血液滲透至血管外、脫水、大量補(bǔ)液等；有溶血性輸血反應(yīng)史者；肝脾滯留者。男1 811例，女1 461例，平均（35.6±10.4）歲?？剖曳植迹簨D產(chǎn)科364例，血液科415例，消化科353例，重癥醫(yī)學(xué)科412例，心胸外科135例，其他外科1 054例，其他內(nèi)科539例。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 戴安娜公司生產(chǎn)的全自動(dòng)卡氏配血儀（型號(hào)：DIANA）、低離子介質(zhì)溶液、微柱凝膠抗人球蛋白卡、微柱凝膠卡專用孵育器（37 ℃）；KUBOTA公司生產(chǎn)的KA-2200型血庫(kù)專用離心機(jī)；上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供的標(biāo)準(zhǔn)試劑紅細(xì)胞、抗篩細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞（1～10號(hào)），抗人球蛋白試劑，Rh抗D、C、c、E、e及2-Me試劑。

1.2.2 不規(guī)則抗體篩查 取微柱凝膠抗人球蛋白檢測(cè)卡，上全自動(dòng)卡氏配血儀檢測(cè)患者不規(guī)則抗體篩查。若紅細(xì)胞均勻沉在管底，則判定為陰性，若紅細(xì)胞懸浮在凝膠表面或中部，則判定為陽(yáng)性。陽(yáng)性樣本需采用試管法做鹽水法和間接抗人球蛋白試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果仍為陽(yáng)性者，需使用抗體鑒定譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性鑒定。

1.2.3 不規(guī)則抗體特異性鑒定 不規(guī)則抗體篩查篩選試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性者，需采用微柱凝膠抗人球蛋白法進(jìn)行特異性鑒定。取微柱凝膠抗人球蛋白卡，在卡下空白處依次標(biāo)記1～10號(hào)，取25 μl血清樣本加入各孔中，然后依次加入1～10號(hào)濃度為0.8%的抗體鑒定譜細(xì)胞，劑量50 μl，在孵育箱（37 ℃）中孵育15 min。然后使用卡式離心機(jī)離心10 min，再觀察結(jié)果。

1.2.4 不規(guī)則抗體免疫球蛋白類別鑒定 取不規(guī)則抗體篩查篩選試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性者的血清樣本300 μl，再取300 μl的2-Me，將二者混合均勻后密封保存，水?。?7 ℃）15 min，再采用鹽水法和微柱凝膠法與相應(yīng)血型抗原的紅細(xì)胞進(jìn)行反應(yīng)。與2-Me混合后的凝聚強(qiáng)度無(wú)變化，判定為IgG類抗體，與2-Me混合后的凝聚強(qiáng)度降低但有凝集，判定為IgG+IgM抗體，與2-Me混合后與相應(yīng)血型抗原紅細(xì)胞無(wú)凝集，判定為IgM類抗體。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察患者輸血后不良反應(yīng)情況（包括過(guò)敏、呼吸困難、發(fā)熱、遲發(fā)性溶血、急性肺損傷、心率異常、血常規(guī)異常等）及輸血效果。所有患者輸血前均不使用抗過(guò)敏及鎮(zhèn)靜藥物。紅細(xì)胞輸血療效的判定：輸注紅細(xì)胞后24 h內(nèi)復(fù)查Hb，并與輸血前比較，在排除仍大量失血、輸液稀釋及溶血性輸血反應(yīng)等因素后，其升高值未達(dá)到預(yù)期值，即視為紅細(xì)胞輸注療效不佳或無(wú)效。輸血Hb預(yù)期值判定公式：Hb預(yù)期升高值=[供者Hb（g/L）×輸血量（L）/患者體重（kg）×0.085（L/kg）]×90%（輸入量是以全血量為標(biāo)準(zhǔn)，各種紅細(xì)胞制劑折算為對(duì)應(yīng)全血量）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

研究數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料（%）比較進(jìn)行字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體陽(yáng)性率

3 272例患者中有33例紅細(xì)胞不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。陽(yáng)性檢出率為1.01%，其中男10例，陽(yáng)性檢出率為0.55%

（10/1 811），女23例，陽(yáng)性檢出率為1.57%（23/1 461），女性紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率顯著高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

（字2=8.461，P<0.05）。

2.2 不規(guī)則抗體特異性鑒定結(jié)果

不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者抗-e、抗-Lea、抗-Fya、抗-Jka檢出率最低，均為0.03%；抗-Ce檢出率也較低，為0.06%；抗-M檢出率最高，為0.21%；抗-E檢出率次之，為0.18%；再次為抗-Ec，為0.15%；抗-D、自身抗體及非特異性抗體檢出率均為0.09%。不規(guī)則抗體的Ig類型：IgG共22例（66.67%），IgM+IgG共5例（15.15%），IgM共6例（18.18%）。不規(guī)則抗體的Ig類型：IgG 22例（66.67%），IgM、IgM+IgG共10例（30.30%），IgM共1例（3.03%），見表1。

2.3 輸血不良反應(yīng)

3 272例患者輸血后共有47例（1.44%）發(fā)生不良反應(yīng)。不良反應(yīng)類型：以蕁麻疹、瘙癢等過(guò)敏反應(yīng)占大部分比例，其中發(fā)熱/心率異常7例，溶血/血常規(guī)異常14例。血制品類別分布：懸浮紅細(xì)胞7例，血漿21例，血小板17例，冷沉淀2例?；颊咧饕植荚谘嚎?、消化科及產(chǎn)科，其中7例有妊娠史，12例有輸血史，14例有輸血合并妊娠史。

2.4 紅細(xì)胞輸血療效的判定

3 272例患者中，有輸注紅細(xì)胞制劑者有2 975例，其中無(wú)效輸血356例，其中不規(guī)則抗體陽(yáng)性15例，占無(wú)效輸血人數(shù)的4.21%。

3 討論

目前國(guó)內(nèi)基本上只針對(duì)輸血患者進(jìn)行抗體篩查，而國(guó)家不少國(guó)家都已將不規(guī)則抗體篩查納入了血液制品的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，我國(guó)針對(duì)血液制品的不規(guī)則抗體篩查則尚未開展[3-4]。紅細(xì)胞不規(guī)則抗體指的是除A、B、O血型系統(tǒng)抗-A、抗-B以外的所有紅細(xì)胞血型抗體，紅細(xì)胞自身抗體與同種抗體均包含在內(nèi)。研究發(fā)現(xiàn)，血型抗體是引起輸血不良反應(yīng)的一個(gè)重要因素，紅細(xì)胞不規(guī)則抗體可導(dǎo)致血型鑒定及交叉配血困難，引起免疫性溶血性反應(yīng)、新生兒溶血癥，紅細(xì)胞自身抗體還可引發(fā)自身免疫溶血性疾病[5]。

紅細(xì)胞不規(guī)則抗體是否存在無(wú)規(guī)律可循，人體在正常情況下，血液中是不含有不規(guī)則抗體的，不規(guī)則抗體主要通過(guò)輸血或妊娠接觸到有該抗原的紅細(xì)胞后引發(fā)免疫反應(yīng)而產(chǎn)生的。人體在首次接觸外來(lái)抗原后，經(jīng)過(guò)幾天的潛伏期后，會(huì)產(chǎn)生特異性抗體，并且抗體水平會(huì)逐漸升高，若無(wú)抗原的再次刺激，通常無(wú)法再次檢出抗體。初級(jí)免疫應(yīng)答發(fā)生后，再次受到抗原刺激，將會(huì)增強(qiáng)免疫應(yīng)答，血清抗體水平會(huì)在再次接觸抗原后的2～3 d開始升高，并在第10天左右達(dá)到峰值[6-7]。本次研究結(jié)果顯示，33例紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性者經(jīng)特異性鑒定，結(jié)果顯示22例抗體類型都為IgG，占到66.67%。這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相符，這是因?yàn)榧t細(xì)胞不規(guī)則抗體檢測(cè)是利用抗原刺激誘導(dǎo)機(jī)體的二級(jí)免疫應(yīng)答反應(yīng)，而機(jī)體的二級(jí)免疫應(yīng)答抗體主要為IgG，所以紅細(xì)胞不規(guī)則抗體類型以IgG抗體為主[8]。國(guó)內(nèi)有文獻(xiàn)[9-10]報(bào)道，受血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的陽(yáng)性率為0.87%，血制品中的紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率為0.32%。本次研究結(jié)果顯示，3 272例患者中有33例的紅細(xì)胞不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為1.01%。這一結(jié)果與前述文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)論基本一致。

在輸血安全性方面，本研究結(jié)果顯示47例發(fā)生輸血不良反應(yīng)，發(fā)生率為1.44%，不良反應(yīng)類型以蕁麻疹、瘙癢等過(guò)敏反應(yīng)居多，溶血/血常規(guī)異常、發(fā)熱/心率異常也較為常見，其中7例有妊娠史，12例有輸血史，14例有輸血合并妊娠史，占輸血不良反應(yīng)總數(shù)的70.21%，說(shuō)明發(fā)生輸血不良反應(yīng)者多有輸血史或妊娠史，而有多次輸血史和妊娠史的患者則易產(chǎn)生不規(guī)則抗體[11-12]。不規(guī)則抗體陽(yáng)性是引起無(wú)效輸血的一個(gè)主要原因，本次研究結(jié)果也顯示無(wú)效輸血的356例患者中，不規(guī)則抗體陽(yáng)性15例，占無(wú)效輸血人數(shù)的4.21%。因此，臨床有必要在輸血前進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查及特異性鑒定，以縮短交叉配血時(shí)間，降低輸血不良反應(yīng)和無(wú)效輸血發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，從而保障輸血安全。

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（收稿日期：2018-03-01）