許鵬 甄興厚 汪睿辰 張習(xí)苗 劉暢 劉紅英(通訊作者)
(濰坊醫(yī)學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 山東 濰坊 261053)
目前,國內(nèi)外眾多學(xué)者研究證實家裝污染物對人體健康具有極大影響[1],如苯對大鼠腦組織結(jié)構(gòu)和認(rèn)知功能的影響[2]、甲醛對精子的致畸影響[3]等,但尚缺乏分子遺傳學(xué)水平的研究探討以及混合因素對微核率影響的劑量和時間效應(yīng)的研究數(shù)據(jù)。
本實驗同時觀察了家裝污染物單一因素及混合因素對微核率的不同影響,探討了苯、甲醛、氯化鉛對小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率的影響的分子機(jī)制,從而為進(jìn)一步研究家裝污染物對人類遺傳物質(zhì)的影響,以及提出更合理有效的防治措施提供了實驗依據(jù)。
昆明種清潔級小白鼠84只,雌雄各半,體重27~33g,8周齡,由濰坊醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。
隨機(jī)分組,實驗組共12組,包括甲醛組、苯組、氯化鉛組及混合組,其中每組各分為高、中、低濃度3組。對照組2組,即生理鹽水組、花生油組。所用染毒試劑為0.050mg/ml、0.025mg/ml、0.125mg/ml的氯化鉛溶液;1%、0.5%、0.25%的甲醛溶液;以及100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml的苯溶液。
實驗組采用腹腔注射染毒。每4天一次,共6次,染毒劑量0.002ml/g。各組小鼠分別在第2、4、6次染毒24小時后處死[4],常規(guī)制作微核制片[8]后觀察計數(shù),微核率以千分率表示[5,7],分別計算雌雄動物微核率的均值,無明顯差異可合并計數(shù)。利用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0,以1000個嗜多染紅細(xì)胞中出現(xiàn)微核的細(xì)胞個數(shù)為指標(biāo),采用單因素方差檢驗分析,檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。各組均數(shù)比較采用One-WayANOVA、組間兩兩比較采用SNK檢驗、實驗組與對照組采用對照樣本的t檢驗。
苯對小鼠微核率的影響見表1。結(jié)果表明,無論以染毒時間為變量還是以染毒劑量為變量,實驗組小鼠的微核率均明顯高于對照組(P<0.05),且隨著染毒時間的延長和染毒劑量的增加,小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(P<0.05)。
表1 苯對小鼠微核率的影響
甲醛對小鼠微核率的影響見表2。結(jié)果顯示,使用甲醛染毒會導(dǎo)致小鼠微核率明顯增加,且有時間和劑量效應(yīng)(P<0.05)。
表2 甲醛對小鼠微核率的影響
氯化鉛對小鼠微核率的影響見表3。結(jié)果表明,無論以染毒時間為變量還是以染毒劑量為變量,實驗組小鼠的微核率均明顯高于對照組(P<0.05),且隨著染毒時間的延長和染毒劑量的增加,小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(P<0.05)。
表3 氯化鉛對小鼠微核率的影響
混合染毒對小鼠微核率的影響見表4。結(jié)果表明,混合染毒對小鼠的微核率影響效應(yīng)明顯高于單一因素染毒對小鼠的影響(P<0.05),且隨著染毒時間的延長和染毒劑量的增加,小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(P<0.05)。
表4 混合染毒對小鼠微核率的影響
微核(micronucleus,MC),也叫衛(wèi)星核,是真核生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu),是染色體畸變在間期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。微核的產(chǎn)生過程與染色體損傷密切相關(guān)[9-10],且出現(xiàn)的頻率決定于組織DNA損傷的程度,故可以通過微核率的高低來推測組織畸變情況[11-13]。微核實驗是遺傳毒理學(xué)常用的實驗方法之一,可以檢測遺傳損傷程度,可以通過觀察細(xì)胞中微核的個數(shù)來檢測遺傳毒物對細(xì)胞的損傷程度[9]。已有多項研究表明,在受到了化學(xué)誘變劑、生物因素、電離輻射等影響后,細(xì)胞的微核率均明顯增加[14-17]。故微核試驗最大的優(yōu)點是經(jīng)濟(jì)、簡單、快速,大量對比試驗研究表明該方法在敏感性、特異性和準(zhǔn)確性方面,與經(jīng)典的染色體畸變分析方法基本相當(dāng)。
本實驗以時間、劑量、種類為變量,多角度多層次研究了苯、甲醛、氯化鉛對小鼠骨髓細(xì)胞微核率的影響。結(jié)果顯示,隨著家裝污染物濃度的增加和染毒時間的延長,小鼠骨髓細(xì)胞的微核率均明顯升高;且混合因素染毒對小鼠遺傳物質(zhì)的損傷程度明顯高于單一因素的影響。
該結(jié)果提示我們在注重家裝材料的美觀性以及家具的實用性的同時更應(yīng)當(dāng)重視家裝材料的環(huán)保性??刂坪皖A(yù)防家裝污染物的毒害,不僅要從法律制度上著手,還要加強(qiáng)綠色環(huán)保家裝材料的教育宣傳,盡可能的減少家裝污染物對人們身體健康的危害。