麝香保心丸對同型半胱氨酸血癥大鼠血清炎癥因子IL-6和CRP的影響

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高同型半胱氨酸(Hcy )血癥在臨床非常常見，并伴發(fā)于高血壓、代謝綜合征等疾病，研究證實(shí)，同型半胱氨酸血癥是導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙和動脈粥樣硬化等血管損傷性疾病的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因子[1]，而炎癥反應(yīng)常常貫穿于上述血管損傷性疾病始終。麝香保心丸具有保護(hù)內(nèi)皮功能、抗炎及抑制血管鈣化等作用，在動脈粥樣硬化及血管鈣化等血管重塑性疾病的治療中發(fā)揮了重要的作用[2-3]，但能否保護(hù)Hcy導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)尚不清楚，為此，本實(shí)驗(yàn)在高Hcy大鼠模型上，用麝香保心丸干預(yù)，觀察血清炎癥因子白介素-6(IL-6)和C反應(yīng)蛋白(CRP)濃度的變化，初步探討麝香保心丸的作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及藥品 雄性SD大鼠，由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，8周齡。L-蛋氨酸購自北京寶希迪科技有限公司，純度>99%；IL-6和CRP試劑盒購自北京華英生物研究所，同型半胱氨酸酶聯(lián)免疫試劑盒購自上海史瑞可生物科技有限公司；麝香保心丸購自上海和黃藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號：12050401。其余為進(jìn)口或國產(chǎn)分析純試劑。

1.2 Hcy動物模型制備 雄性SD大鼠隨機(jī)分3組，每組10只。 正常對照組：大鼠予飲用水灌胃。Hcy 組：予L-蛋氨酸灌胃1 g/(kg·d)，溶于飲用水。Hcy+麝香保心丸組：模型制作同Hcy 組，加予麝香保心丸胃灌14 mg/(kg·d)，1次/天。3組動物常規(guī)飼養(yǎng)，4周后稱重，3%水合氯醛麻醉，心臟取血，分別置入含有EDTA和促凝劑的試管中，4 ℃離心分離血漿和血清，-80 ℃保存。

1.3 血漿同型半胱氨酸含量的測定 采用Elisa法測定血漿Hcy含量，具體步驟按試劑盒說明書操作。

1.4 放射免疫法檢測血清IL-6和CRP濃度的表達(dá) 取血清約200 μL，干冰低溫保存下送北京華英生物研究所檢測，采用放射免疫法檢測，具體操作按說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠血漿同型半胱氨酸含量的變化 Hcy 組血漿同型半胱氨酸水平為(7.25±0.05)μmol/L，明顯高于正常組的( 3.14±0.06)μmol/L(P<0.01)，提示Hcy模型建立成功，Hcy+麝香保心丸組為(7.14±0.07)μmol/L ， 用麝香保心丸干預(yù)并未降低血漿同型半胱氨酸水平。

2.2 大鼠血清CRP和IL-6濃度的變化 與正常組相比，Hcy組血清CRP和IL-6表達(dá)明顯上調(diào)，用麝香保心丸干預(yù)后，血清CRP和IL-6的濃度有所下降。詳見表1。

表1 各組血清CRP和IL-6的濃度比較(±s)

3 討 論

同型半胱氨酸是體內(nèi)蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，其血漿濃度大于16 μmol/L即為高Hcy，是導(dǎo)致動脈粥樣硬化等心血管疾病的一個(gè)重要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本實(shí)驗(yàn)采用L-蛋氨酸灌胃4周后，血漿同型半胱酸水平明顯升高，大鼠Hcy模型建立成功。同時(shí)發(fā)現(xiàn)Hcy大鼠血清炎癥因子CRP和IL-6濃度明顯高于正常組，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示Hcy 可明顯上調(diào)血清炎癥因子的表達(dá)，可能是導(dǎo)致動脈粥樣硬化等心血管疾病的重要作用機(jī)制。已知CRP和IL-6等是體內(nèi)重要的炎癥因子，可與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)，從而加重血管損傷[4]。

麝香保心丸是芳香溫通類的代表藥物，源于宋代經(jīng)典名方《太平惠民和劑局方》中的蘇合香丸。麝香保心丸在臨床上作為一種常用治療冠心病的有效藥物，對緩解心絞痛癥狀等有較顯著的作用。麝香保心丸不僅具有保護(hù)血管內(nèi)皮和抗炎的作用[5]，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，麝香保心丸還具有穩(wěn)定逆轉(zhuǎn)斑塊[6]、促進(jìn)血管生長及預(yù)防PCI后血管再狹窄[7-8]等作用，但在Hcy 導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)是否亦有抑制作用尚不清楚。用麝香保心丸干預(yù)后，大鼠血漿同型半胱氨酸水平無明顯下降，但血清CRP和IL-6水平明顯下降，這提示麝香保心丸具有下調(diào)血清炎癥因子的抗炎作用，并且該作用獨(dú)立于降低血漿同型半胱氨酸水平之外。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)麝香保心丸雖無降低血漿同型半胱氨酸水平，但可下調(diào)Hcy 誘導(dǎo)的炎癥因子CRP和IL-6的表達(dá)，這將為血管損傷的機(jī)制研究及防治提供新的思路和作用靶點(diǎn)，具體的分子作用機(jī)制和細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。由于植物提取物成分和有效成分作用靶點(diǎn)的復(fù)雜性，中藥成分對保護(hù)血管內(nèi)皮功能的藥理學(xué)作用尚需進(jìn)一步研究。