□ 王維堅(jiān) 侯麗麗 吉林工商學(xué)院糧食學(xué)院 陳洪海 長(zhǎng)春設(shè)備工藝研究所
人參是一種極其珍貴的藥材,并且具有極高的藥用價(jià)值,因此人們總是叫它“百草之王”,在人參中發(fā)現(xiàn)的成分已達(dá)到三百多種,主要包括人參皂苷類和人參多糖類,具有多種保健功效[1-2]。本試驗(yàn)以超聲法為主,以人參皂苷提取率為標(biāo)準(zhǔn),獲得超聲法提取人參總皂苷的最佳工藝。
1.1.1 試驗(yàn)儀器設(shè)備
HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋,金壇市江南儀器廠;L-MU330微波組合聯(lián)用儀,濟(jì)南藍(lán)邁公司;TU-1810紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;TDL-5-A低速離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠;CP214電子天平奧豪斯儀器(上海)有限公司制造。
1.1.2 材料與試劑
材料:人參,吉林紫鑫藥業(yè)提供;人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品,中國(guó)藥品生物制品檢定所。試劑:三氯甲烷、正丁醇、甲醇、香草醛、高氯酸、冰醋酸,分析純。
1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
參照劉繼菊[3]的方法,將吸光度作為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液Re的濃度為橫坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出回歸曲線方程 Y=4.278 6X+0.001 2,R2=0.999 9。
1.2.2 乙醇回流法
參照侯麗麗等人[4]的方法進(jìn)行了回流實(shí)驗(yàn):乙醇濃度為70%,料液比為 1 ∶ 20,70 ℃回流提取 3 h。
由圖1可得,隨著料液比的增加,提取率也隨之增加,在料液比為1∶35時(shí),是人參皂苷的提取率的最高峰,提取率為3.47%,為了兼顧成本和提取率,選擇作正交試驗(yàn)的3水平比例為1∶25、1∶30、1∶35。
由圖2可得,在超聲溫度升高時(shí),提取率也增加。在超聲溫度為70 ℃時(shí),提取率最高。但在超聲溫度為75 ℃時(shí),開(kāi)始下降,說(shuō)明超聲溫度最高為70 ℃比較適宜,選作為正交試驗(yàn)的3水平為 60、70、75 ℃。
由圖3可以明顯看出,在處理時(shí)間勻速增加的同時(shí),提取率也在不斷地提高,在超聲時(shí)間為75 min時(shí),提取率最高,為3.94%。當(dāng)超聲處理時(shí)間達(dá)到90 min,此時(shí)提取率下降。選擇作為正交試驗(yàn)的3水平為45、60、75 min。
由圖4可得,當(dāng)乙醇濃度為60%時(shí),提取率最高,為3.33%。乙醇濃度為70~80%時(shí),開(kāi)始下降。根據(jù)提取率的多少,作為正交試驗(yàn)的3水平,即60%、70%、80%。
圖1 料液比對(duì)人參總皂苷提取率的影響
圖2 超聲溫度對(duì)人參總皂苷提取率的影響
圖3 超聲時(shí)間對(duì)人參總皂苷提取率的影響
圖4 乙醇濃度對(duì)人參總皂苷提取率的影響
表1 正交試驗(yàn)因素水平表
表2 L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果
表3 方差分析表
表4 超聲提取法和乙醇回流法的比較
依據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,利用L9(34)正交試驗(yàn)來(lái)找出最適合提取的工藝條件,見(jiàn)表1。試驗(yàn)結(jié)果及方差分析見(jiàn)表2、3。
以表2的數(shù)據(jù)為依據(jù),對(duì)人參皂苷提取率影響高低進(jìn)行排序,依次為:A(料液比)、D(乙醇濃度)、C(超聲時(shí)間)、B(超聲溫度)。根據(jù)對(duì)數(shù)據(jù)的分析,得到最優(yōu)工藝為:料液比1∶35,乙醇濃度60%,超聲溫度70 ℃,超聲時(shí)間 45 min。
由表4可知,超聲提取時(shí)間比較短,提取率相對(duì)較高,而且提取效果好。
超聲法在乙醇濃度60%,料液比1∶35,溫度70 ℃,提取時(shí)間45 min條件下進(jìn)行提取,得到了2.81%的人參總皂苷。與回流法對(duì)比,超聲法的提取效果會(huì)更好一些。通過(guò)比較,超聲波提取法提取率高、方便、快捷,可以作為工業(yè)化生產(chǎn)的一個(gè)參照。