野生樹莓果實(shí)總酚含量及抗氧化能力分析

張志敏，朱 祥，劉針杏

（1.銅仁學(xué)院農(nóng)林工程與規(guī)劃學(xué)院，貴州銅仁 554300；2.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西楊凌 712100）

樹莓（Rubus parvifolius L.）屬于薔薇科懸鉤子屬落葉半灌木植物，在我國野生資源豐富，全國大部分地區(qū)均有分布，適應(yīng)性特別強(qiáng)，常見于路旁、向陽山坡及灌草叢中[1-2]。樹莓藥用價(jià)值很高，根、莖、葉均可入藥，具有活血化瘀、利尿消腫、清熱解毒、散節(jié)止痛等療效[3-4]。果實(shí)營養(yǎng)豐富、風(fēng)味獨(dú)特，含有多種維生素、礦物質(zhì)元素、有機(jī)酸、無機(jī)鹽，以及能清除人體有害自由基的抗氧化、抗癌物質(zhì)，如花青素、黃酮、鞣花酸等[5-9]，是一種新興第三代小漿果，栽培前景廣闊。

樹莓栽培歷史悠久，已有300余年，目前世界上有30多個(gè)國家種植樹莓，主要分布在美國、波蘭、智利、俄羅斯、加拿大、新西蘭和德國等國，常見的優(yōu)良栽培品種有80多個(gè)[10]。我國樹莓栽培和育種工作都比較滯后，從20世紀(jì)80年代才開始大面積栽培。沒有本土的優(yōu)良品種，一般從國外引進(jìn)。果實(shí)中酚類物質(zhì)含量及抗氧化能力是樹莓引種栽培中重要的參考指標(biāo)，對(duì)梵凈山野生樹莓果實(shí)中酚類物質(zhì)含量及抗氧化能力進(jìn)行分析比較，篩選出酚類物質(zhì)含量高、抗氧化能力強(qiáng)的優(yōu)良品系（種）進(jìn)行引種栽培，為生產(chǎn)提供一定的理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與方法

試驗(yàn)于2015—2018年在貴州省銅仁市梵凈山進(jìn)行。根據(jù)野生樹莓葉、花、果實(shí)及物候期，綜合鑒別出4個(gè)野生樹莓品系[1-2，11]，以同年生優(yōu)良品種“Festival”為對(duì)比參照。不同野生樹莓品系于2016年3-4月選生長健壯并且一致的植株連根帶土挖掘移栽到平地處（海拔400 m左右），同一品系種植在一個(gè)小區(qū)內(nèi)，試驗(yàn)采取隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。種植后植株統(tǒng)一進(jìn)行常規(guī)的水、肥管理。

1.2 試驗(yàn)地概況

梵凈山是武陵山脈的主峰，最高峰鳳凰山為2 570.5 m，全區(qū)總面積約600 km2，位于貴州省東北部，屬于我國亞熱帶地區(qū)，年均降水量1 100～2 600 mm，處于東經(jīng) 108°35'55''～108°48'30''，北緯 27°46'50''～28°1'30''，與江口縣、印江縣、松桃縣交界；年均溫度6～17℃，相對(duì)濕度年均80%以上，積溫1 500～5 500℃。種質(zhì)資源豐富，生態(tài)環(huán)境復(fù)雜。

1.3 測(cè)試指標(biāo)與方法

（1） 總酚測(cè)定?？偡雍康臏y(cè)定參照Folin-Ciocalteu（FC）[12]的方法有改動(dòng)；沒食子酸（Gallic acid）作為標(biāo)準(zhǔn)物，于波長765 nm下用紫外-可見分光光度計(jì)（Fisher Scientific，Ottawa，ON） 測(cè)定吸光度，如果樣品的吸光度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍的最高點(diǎn)（1 mg/mL），用50%的甲醇稀釋樣品，以每克鮮食中沒食子酸的等價(jià)物（Gallic Acid Equivalent）表示總酚含量（GAEμg/g冷凍果實(shí)）。

（2） 抗氧化能力測(cè)定。FRAP法（Ferric reducing/antioxidant power（FRAP）） 測(cè)定總抗氧化能力，測(cè)定方法根據(jù)Benzie and Strain[13]描述且稍微改動(dòng)，于波長593 nm處測(cè)定吸光度?？偪寡趸芰σ悦靠诵迈r果實(shí)中Fe2+的等價(jià)物表示（FeSO4·7H2Oμg/g鮮重）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件GML過程進(jìn)行差異顯著分析，圖表使用Origin 8.5繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 野生樹莓果實(shí)中總酚含量的分析

由圖1可知，野生樹莓品系1、品系2、品系3和品系4的果實(shí)總酚含量分別為2 563，2 891，1 982，3 567μg/g，對(duì)照品種（CK，F(xiàn)estival）為2 478μg/g；經(jīng)多重比較分析可知，4個(gè)野生樹莓品系果實(shí)中相互之間總酚含量差異顯著（p＜0.05），除品系1與品系2外，品系4、品系3與CK之間差異顯著（p＜0.05），其中品系4的總酚含量高出CK 1 089μg/g，品系3低于CK 496μg/g；品系1和品系2與CK之間無明顯的差別 （p＞0.05）。

野生樹莓果實(shí)中總酚含量的比較分析見圖1。

圖1 野生樹莓果實(shí)中總酚含量的比較分析

2.2 野生樹莓果實(shí)中抗氧化能力分析

不同野生樹莓果實(shí)中抗氧化能力分析見圖2。

野生樹莓品系1、品系2、品系3和品系4的果實(shí)抗氧化能力分別為4 429，3 980，3 245，5 234μg/g，對(duì)照品種（CK，F(xiàn)estival）為4 210μg/g（由表2知）；經(jīng)多重比較分析可知，4個(gè)野生樹莓品系果實(shí)中相互之間抗氧化能力差異顯著（p＜0.05），除品系1與品系2外；品系4、品系3與CK之間差異顯著（p＜0.05），其中品系4總酚含量高出CK 1 024μg/g，品系3低于CK 965μg/g；品系1和品系2與CK之間無明顯的差別（p＞0.05）。

圖2 不同野生樹莓果實(shí)中抗氧化能力分析

2.3 總酚含量與抗氧化能力的相關(guān)性分析

總酚和抗氧化能力的相關(guān)性分析見表1。

表1 總酚和抗氧化能力的相關(guān)性分析

由表1可知，總酚與抗氧化能力的相關(guān)系數(shù)為0.913，表現(xiàn)出極度相關(guān)性。

3 結(jié)論

（1）4個(gè)野生樹莓品系果實(shí)中酚類含量差異比較大，其中品系4酚類物質(zhì)含量最高，高于優(yōu)良品種Festival，并且差異顯著；其次是品系2、品系1，與優(yōu)良品種Festival無明顯的差異性；品系3的酚類物質(zhì)含量最低，明顯低于優(yōu)良品種Festival。

（2）4個(gè)野生樹莓品系果實(shí)的抗氧化能力含量差異比較大。其中，品系4抗氧化能力最強(qiáng)，高于優(yōu)良品種Festival，并且差異顯著；其次是品系2、品系1，與優(yōu)良品種Festival無明顯的差異性；品系3果實(shí)的抗氧化能力最弱，明顯低于優(yōu)良品種Festival。

（3）野生樹莓果實(shí)的總酚含量和抗氧化能力之間表現(xiàn)出極強(qiáng)的相關(guān)性。

另外，該研究只對(duì)野生樹莓引種后果實(shí)總酚含量和抗氧化能力進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)研究，得出的結(jié)論只能作為初步的參考，生產(chǎn)中引種栽培還要對(duì)品系其他的農(nóng)藝性狀（物候期、抗寒性、抗?jié)承裕┻M(jìn)行深入的調(diào)查研究。