香菇和杏鮑菇培養(yǎng)基pH值條件和營(yíng)養(yǎng)液濃度的優(yōu)化

胡敏　杜寶海

摘 要：為優(yōu)化香菇和杏鮑菇兩種食用菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基條件，對(duì)不同pH值和營(yíng)養(yǎng)液濃度下菌絲形態(tài)和菌落的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行研究，篩選適宜兩種食用菌生長(zhǎng)的pH值條件和營(yíng)養(yǎng)液濃度。結(jié)果表明，香菇和杏鮑菇培養(yǎng)液的最適pH值分別為8.0和6.0，最適培養(yǎng)液濃度均為0.6%，在此條件下，菌絲生長(zhǎng)速度快，橫隔多，鎖狀聯(lián)合密集，液泡和細(xì)胞核明顯。

關(guān)鍵詞：香菇；杏鮑菇；培養(yǎng)條件；菌絲形態(tài)；菌落

中圖分類(lèi)號(hào)：S646 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.09.013

Optimization of Medium pH and Nutrient Solution Concentration of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii

HU Min， DU Baohai， BI Xiaojuan， SUN Meng， LIN Jiaying， MENG Xiangsen

（College of Life Science ， Daqing Normal University， Daqing， Heilongjiang 163712， China）

Abstract： In order to optimize the conditions of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii， the experiment was conducted to study the mycelial morphology and the colony growth in different pH and nutrient solution concentration， selecting the optimal environment for the growth. The results showed that the optimum pH of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii were 8.0 and 6.0 respectively， the optimum nutrient solution concentration were both 0.6%. Compared with the other conditions， the two edible fungi under the optimized condition had faster growth rate， more transverse septa of mycelium， denser had clamp connection of mycelium ， and the vacuole and cell nuclear were easier to be observed.

Key words： Lentinus edodes； Pleurotus eryngii； training condition； hyphase form； colony

香菇（Lentinus edodes），又名香菌，是側(cè)耳科植物香菌的子實(shí)體，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高[1]。香菇的培養(yǎng)過(guò)程中，菌絲生長(zhǎng)速度常常作為早期重要指標(biāo)廣泛應(yīng)用于菌種特性評(píng)價(jià)和育種篩選工作中[2]。

杏鮑菇（Pleurotus eryngii），又名刺芹側(cè)耳，杏鮑菇菌肉肥厚，質(zhì)地脆嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有杏仁香味[3]，有較高的食用價(jià)值和藥用價(jià)值，具有潤(rùn)腸、美容、抗腫瘤等作用，是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織向世界各國(guó)推薦的食用菌新品[4]。

食用菌的菌絲在不同培養(yǎng)條件下，生長(zhǎng)狀態(tài)有所不同，菌絲形態(tài)、生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)等特征存在差異[5]。本文通過(guò)控制pH值和營(yíng)養(yǎng)液濃度，觀察香菇和杏鮑菇菌絲形態(tài)和菌落特征，最終確定單因素條件下兩種食用菌菌絲培養(yǎng)的最佳環(huán)境，為食用菌子實(shí)體的生長(zhǎng)和大規(guī)模栽培提供一定的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試材料 香菇和杏鮑菇為市售。

1.1.2 試劑 固體PDA培養(yǎng)基；市售營(yíng)養(yǎng)液為濃縮液體肥，其配方包括大量元素氮（30 g·L-1）、磷（15 g·L-1）、氧化鉀（17.5 g·L-1），中量元素氧化鎂（1.3 g·L-1）、硫（1.7 g·L-1）外，還含有利于植物茁壯成長(zhǎng)所備的整合態(tài)微量元素，其總含量≥0.2 g·L-1；1 mol·L-1 HCl溶液；1 mol·L-1 KOH溶液。

1.1.3 儀器設(shè)備 高壓蒸汽滅菌鍋，超凈工作臺(tái)，顯微鏡，電磁爐，水浴鍋，6 mm打孔器；燒杯，玻璃棒，三角瓶，培養(yǎng)皿（若干）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌種的獲取 將香菇和杏鮑菇切成1 cm3小塊，酒精浸泡1 min，用濾紙吸干酒精后分別接種在固體PDA培養(yǎng)基中，在溫度為25 ℃，濕度為60%條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

1.2.2 pH值條件優(yōu)化試驗(yàn) 將培養(yǎng)至第7天的香菇和杏鮑菇菌絲用打孔器分別接種在pH值為5，6，7，8，9的固體PDA培養(yǎng)基上，每個(gè)pH值培養(yǎng)基接種2組，一組用于菌落觀察，另一組用作插片觀察[6]，每組重復(fù)3次。

1.2.3 營(yíng)養(yǎng)液濃度優(yōu)化試驗(yàn) 將培養(yǎng)至第7天的香菇和杏鮑菇菌絲用打孔器分別接種在營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.4%，0.5%，0.6%，0.7%，0.8%的固體PDA培養(yǎng)基上，每個(gè)營(yíng)養(yǎng)液濃度的培養(yǎng)基接種2組，一組用于菌落觀察，另一組用作插片觀察，每組重復(fù)3次。

1.2.4 菌絲形態(tài)和菌落的觀察 （1）用光學(xué)顯微鏡（物鏡40×；油鏡100×）進(jìn)行插片鏡檢，對(duì)其分隔的有無(wú)及是否明顯，鎖狀聯(lián)合的有無(wú)及密集程度（不密集，較密集，密集，多密集），液泡和細(xì)胞核是否明顯等進(jìn)行觀察，并拍照記錄；（2）觀察菌絲的外觀形態(tài)和生長(zhǎng)勢(shì)，用“+++”表示生長(zhǎng)勢(shì)好，用“++”表示生長(zhǎng)勢(shì)一般，用“+”表示生長(zhǎng)勢(shì)差，用“-”表示不生長(zhǎng)；（3）測(cè)量菌落半徑，每個(gè)平板按照劃線測(cè)量4個(gè)值，取平均值，計(jì)算菌落生長(zhǎng)半徑（cm·d-1）。

2 結(jié)果與分析

2.1 pH值條件優(yōu)化

2.1.1 不同pH值對(duì)兩種食用菌菌絲形態(tài)的影響 從表1和圖1可以看出，香菇在pH值6～9時(shí)，菌絲有橫隔和鎖狀聯(lián)合，液泡和細(xì)胞核有些較明顯，其中pH值為8時(shí)有明顯分隔，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯；杏鮑菇在pH值為5～9時(shí)，菌絲有橫隔，有鎖狀聯(lián)合，液泡和細(xì)胞核有些較明顯，其中pH值為6時(shí)有明顯分隔，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯。

2.1.2 不同pH值對(duì)兩種食用菌菌落的影響 從表2可以看出，香菇在pH值為5，6，7，9時(shí)，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)一般或較差，菌落生長(zhǎng)半徑較小，pH值為8時(shí)菌絲生長(zhǎng)勢(shì)好，菌落生長(zhǎng)半徑最大，為1.95 cm·d-1；杏鮑菇pH值為5，7，8，9時(shí)，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)一般或較差，菌落生長(zhǎng)半徑較小，pH值為6時(shí)菌絲生長(zhǎng)勢(shì)好，菌落生長(zhǎng)半徑最大，為2.01 cm·d-1。

2.2 營(yíng)養(yǎng)液濃度優(yōu)化

2.2.1 不同營(yíng)養(yǎng)液濃度對(duì)兩種食用菌菌絲形態(tài)的影響 從表3和圖2可以看出，香菇在營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.5%～0.8%時(shí)，菌絲有橫隔，有鎖狀聯(lián)合，液泡和細(xì)胞核有些較明顯，其中濃度為0.6%時(shí)菌絲分隔明顯，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯；杏鮑菇在營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.4%～0.8%時(shí)，菌絲有橫隔，有鎖狀聯(lián)合，液泡和細(xì)胞核有些較明顯，其中濃度為0.6%時(shí)菌絲分隔明顯，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯。

2.2.2 不同營(yíng)養(yǎng)液濃度對(duì)兩種食用菌菌落的影響 從表4可以看出，香菇在營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.4%，0.5%，0.7%，0.8%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)一般或較差，菌落生長(zhǎng)半徑較小，營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.6%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)最好，菌落生長(zhǎng)半徑最大，為2.28 cm·d-1；杏鮑菇在營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.4%，0.5%，0.7%，0.8%時(shí)，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)一般或較差，菌落生長(zhǎng)半徑較小，營(yíng)養(yǎng)液濃度為0.6%時(shí)菌絲生長(zhǎng)勢(shì)最好，菌落生長(zhǎng)半徑最大，為1.85 cm·d-1。

3 結(jié)論與討論

食用菌菌絲在不同的外界條件影響下其生長(zhǎng)特性均有不同的表現(xiàn)，其顯微形態(tài)結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)與外在形態(tài)之間具有一定的關(guān)聯(lián)特征。當(dāng)外界條件適宜菌絲生長(zhǎng)時(shí)，菌絲表現(xiàn)為生長(zhǎng)速度快、長(zhǎng)勢(shì)好，其顯微形態(tài)結(jié)構(gòu)通常表現(xiàn)為菌絲間橫隔長(zhǎng)，鎖狀連合密集，并且液泡和細(xì)胞核容易觀察到。當(dāng)外界條件不適宜菌絲生長(zhǎng)時(shí)，菌絲表現(xiàn)為生長(zhǎng)速度慢，長(zhǎng)勢(shì)差，其顯微形態(tài)結(jié)構(gòu)通常表現(xiàn)為菌絲橫隔短，鎖狀連合不密集，并且液泡和細(xì)胞核不容易觀察到[6]。

本試驗(yàn)在研究不同pH值條件對(duì)兩種食用菌菌絲形態(tài)的影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)香菇和杏鮑菇分別在pH值8.0和pH值6.0時(shí)生長(zhǎng)勢(shì)最好，菌絲橫隔明顯，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯，最大生長(zhǎng)半徑分別為1.95 cm·d-1和2.01 cm·d-1；在研究不同營(yíng)養(yǎng)液濃度對(duì)兩種食用菌的影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)香菇和杏鮑菇均在濃度為0.6%時(shí)生長(zhǎng)勢(shì)最好，菌絲生長(zhǎng)速度快，橫隔明顯，鎖狀聯(lián)合多密集，液泡和細(xì)胞核明顯，最大生長(zhǎng)半徑分別為2.28 m·d-1和1.85 cm·d-1。與張穎等[7]在研究外界環(huán)境對(duì)香菇菌絲體生長(zhǎng)影響中香菇最適pH值不同，主要原因在于所用培養(yǎng)基配方存在本質(zhì)上差異導(dǎo)致，本試驗(yàn)所采用的僅是普通的固體PDA培養(yǎng)基。

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