高賽 周欣 陳華國(guó)

摘要：女貞子具抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、降血糖、降血脂等藥理作用，臨床應(yīng)用廣泛。本文對(duì)近年女貞子藥材化學(xué)成分和質(zhì)量控制研究進(jìn)行梳理，歸納質(zhì)量控制采用的技術(shù)手段和評(píng)價(jià)方法，為女貞子藥材加工及相關(guān)制劑開發(fā)提供參考。

關(guān)鍵詞：女貞子；化學(xué)成分；質(zhì)量控制；綜述

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.12.034

中圖分類號(hào)：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2018）12-0133-04

Abstract： Ligustri Lucidi Fructus has anti-inflammatory， immunoregulatory， anti-aging， hypoglycemic， hypolipidemic and other pharmacological effects， and is widely used in clinical practice. In this article， the researches on chemical components and quality control of Ligustri Lucidi Fructus in recent years were sorted out， and the technical means and evaluation methods used in quality control were summarized to provide reference for the processing of Ligustri Lucidi Fructus and related preparations.

Keywords： Ligustri Lucidi Fructus； chemical components； quality control； review

女貞子為木犀科植物女貞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果實(shí)，具有滋陰補(bǔ)腎、明目烏發(fā)功效，主要用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、腰膝酸軟、須發(fā)早白、內(nèi)熱消渴、骨蒸潮熱等病癥的預(yù)防與治療。女貞子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，謂其“味苦平，主補(bǔ)中，安五臟，養(yǎng)精神，出百病”?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，女貞子具有抗炎、提高免疫力、抗衰老、降血糖，降血脂等生物活性，臨床主要用于糖尿病、高血脂癥、冠心病、青光眼、乙型肝炎等的治療。本文對(duì)近幾年來(lái)女貞子的化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 化學(xué)成分

女貞子主要成分有三萜類[1]、黃酮類、多糖類、苯乙醇苷、揮發(fā)油、脂肪酸、氨基酸和微量元素等。

1.1 三萜類

三萜類化合物在女貞子中含量為5.61%[2]，其主要骨架為齊墩果烷型、羽扇豆烷型、烏索烷型和達(dá)瑪烷型。目前，已成功從女貞子中分離出齊墩果酸甲酯、3-O-乙酰熊果酸、3-羰基齊墩果酸、羽扇豆醇、齊墩果酸、19α-羥基熊果酸、3-O-乙酰齊墩果酸、熊果酸、白樺脂醇、fouquierol、19α-羥基-3-O-乙酰熊果酸、（Z）-馬斯里酸-3-O-對(duì)香豆酸酯和（E）-馬斯里酸-3-O- 對(duì)香豆酸酯等化學(xué)成分。

1.2 黃酮類

黃酮類化合物具有降脂作用。目前成功從女貞子中分離鑒定出β-谷甾醇葡萄糖苷、芹菜素、木犀草素、甘露醇、木樨草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、大波斯菊苷、芹菜素-7-O-乙酰-β-D-葡萄糖苷蘆丁和槲皮素等黃酮類化合物。

1.3 苯乙醇苷

苯乙醇苷類屬水溶性天然酚類化合物，主要分為苯乙醇單糖苷、雙糖苷、三糖苷和四糖苷。目前女貞子生品和酒制品已分離鑒定出紅景天苷和毛蕊花苷。

1.4 多糖

多糖類化合物廣泛存在于植物中，對(duì)細(xì)胞的免疫效應(yīng)具有促進(jìn)作用。女貞子多糖是女貞子具有多種功效的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，主要由阿拉伯糖、葡萄糖、蔗糖、鼠李糖和巖藻糖組成。

1.5 其他

女貞子還含有揮發(fā)油、氨基酸，以及鈣、鎳、鐵、鋅、鉻、鉬、錳、銅、釩、鈷等微量元素。

2 質(zhì)量控制

近年來(lái)，女貞子質(zhì)量控制研究的相關(guān)報(bào)道逐漸增多，采用的技術(shù)手段和質(zhì)量評(píng)價(jià)方法也不斷更新，極大豐富了女貞子的品質(zhì)評(píng)價(jià)方法[3]。

2.1 《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定

1963年版《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）僅對(duì)女貞子進(jìn)行了簡(jiǎn)單的性狀描述；2000年版《中國(guó)藥典》在性狀描述的基礎(chǔ)上，增加了薄層掃描法定量測(cè)定女貞子中齊墩果酸含量的闡述，并規(guī)定其含量限度不得低于0.60%；2005年版《中國(guó)藥典》在上一版基礎(chǔ)上增加了雜質(zhì)的限量要求，規(guī)定所含雜質(zhì)不得高于3%；2010年版《中國(guó)藥典》在上一版基礎(chǔ)上增加了水分（不得高于8.0%）、總灰分（不得高于5.5%）和乙醇浸出物（不得少于25.0%）的限量控制指標(biāo)，取消女貞子中齊墩果酸含量測(cè)定，改用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定特女貞苷的含量（不得低于0.7%）；2015年版《中國(guó)藥典》在上一版基礎(chǔ)上增加了顯微鑒別方法?？梢姡瑲v年版《中國(guó)藥典》對(duì)女貞子的質(zhì)量控制方法越來(lái)越完善。

2.2 單指標(biāo)成分質(zhì)量控制

單指標(biāo)成分質(zhì)量控制是指建立藥物中主要化學(xué)成分的含量測(cè)定方法，并用所建立的含量測(cè)定方法對(duì)藥物中相應(yīng)化合物含量進(jìn)行測(cè)定用以評(píng)價(jià)該藥品質(zhì)。目前，女貞子常見的指標(biāo)性成分主要有女貞子苷、特女貞苷、齊墩果酸、紅景天苷[4]等。

郭丹等[5]采用反相高效液相色譜法（RP-HPLC）測(cè)定女貞子中女貞子苷含量，得出其含量為0.35%～1.16%。黃雯等[6]采用HPLC測(cè)定10批女貞子中女貞子苷含量，結(jié)果表明，不同產(chǎn)地女貞子中女貞子苷含量為0.24%～3.06%。張迪文等[7]采用近紅外漫反射光譜法，建立快速測(cè)定女貞子中特女貞苷含量的方法，該方法準(zhǔn)確快速且無(wú)污染，91份女貞子樣品測(cè)定結(jié)果表明，特女貞苷的含量為3.07%～7.67%。

孫京海等[8]采用HPLC測(cè)定10批不同產(chǎn)地女貞子中齊墩果酸的含量，得出其含量為0.560%～1.414%，且因產(chǎn)地不同存在一定差異。李夢(mèng)[9]采用HPLC測(cè)定女貞子中齊墩果酸含量，得出其含量為0.624%～0.630%。秦紅霖等[10]采用RP-HPLC測(cè)定女貞子中紅景天苷含量，得出其含量為2.64%～3.13%。

2.3 多指標(biāo)成分質(zhì)量控制

多指標(biāo)成分控制通過(guò)測(cè)定多種化學(xué)成分的含量對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)。王文俊等[11]采用加速溶劑萃取-毛細(xì)管電泳同時(shí)測(cè)定女貞子中熊果酸和齊墩果酸含量，得到二者平均含量分別為1.35%、0.31%。該方法消耗溶劑量少、提取時(shí)間短、樣品用量小，具有較好的應(yīng)用前景。燕霞等[12]采用高效液相色譜-電霧式檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定女貞子藥材中齊墩果酸和熊果酸含量，得到二者含量分別為0.654%～1.217%、0.202%～0.455%，該方法不受化合物分子結(jié)構(gòu)的限制，可應(yīng)用于非揮發(fā)或半揮發(fā)化合物，且抗干擾能力強(qiáng)。劉慧妍等[13]以甲醇作為提取溶劑，采用快速溶劑萃取法測(cè)定女貞子中齊墩果酸和熊果酸含量，得到二者含量分別為1.455%～1.897%、0.573%～0.644%。

張炯怡等[14]基于HPLC技術(shù)同時(shí)測(cè)定女貞子中女貞子苷、特女貞苷和紅景天苷3種指標(biāo)性成分的含量。測(cè)定10批不同產(chǎn)地女貞子，得到紅景天苷、女貞苷和特女貞苷含量分別為0.12%～0.19%、0.05%～0.07%、0.60%～1.02%，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于控制女貞子藥材的質(zhì)量。

許浚等[15]建立綜合評(píng)價(jià)女貞子質(zhì)量的方法，同時(shí)測(cè)定女貞子中紅景天苷、松果菊苷、特女貞苷、橄欖苦苷4種主要成分的含量，得出含量分別為0.025%～0.042%、0.028%～0.046%、0.224%～0.308%、0.024%～0.042%，該方法準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，能有效評(píng)價(jià)女貞子的質(zhì)量。

2.4 指紋圖譜

中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖或光譜圖。其建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，主要用于評(píng)價(jià)中藥材及中藥材制劑半成品質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。徐長(zhǎng)根等[16]建立女貞子藥材的HPLC指紋圖譜分析方法，以齊墩果酸為參照物分析了16批不同產(chǎn)地女貞子樣品，采用計(jì)算機(jī)輔助相似性評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，女貞子藥材HPLC特征圖譜由14個(gè)特征峰構(gòu)成，10批樣品的指紋圖譜相似度均大于0.90，該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，可用于女貞子藥材的鑒別和質(zhì)量控制。顏磊等[17]采用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜對(duì)女貞子乙醇提取物進(jìn)行分離分析，考察緩沖體系濃度、pH值、SDS濃度等因素對(duì)分離度、峰容量的影響，得到代表其部分化學(xué)特征的電泳指紋圖譜。

史昆波等[18]采用X射線衍射Fourier譜鑒定法，對(duì)4個(gè)不同地區(qū)女貞子的乙醇、氯仿提取物進(jìn)行分析比較，分別獲得37、40、38、44和36、35、36、43個(gè)特征標(biāo)記峰值。通過(guò)比較X射線衍射峰值，得出不同產(chǎn)地女貞子的主要化學(xué)成分含量存在顯著差異，該方法可對(duì)女貞子進(jìn)行定性鑒別。蔣小春等[19]進(jìn)行女貞子B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)指紋圖譜研究，結(jié)果表明，女貞子可在一定濃度和溫度范圍內(nèi)產(chǎn)生明顯的化學(xué)振蕩，振蕩誘導(dǎo)期與濃度呈良好線性關(guān)系，其振蕩誘導(dǎo)期表觀活化能為33.37 kJ/mol，平均振蕩周期表觀活化能為74.20 kJ/mol。

崔蘊(yùn)慧等[20]建立女貞子的HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，對(duì)12個(gè)不同產(chǎn)地的女貞子樣品進(jìn)行分析，獲得女貞子的特征圖譜，包含12個(gè)共有峰。同時(shí)，測(cè)定女貞子中紅景天苷和特女貞苷的含量，分別為0.048%～0.294%、0.473%～2.149%。

趙麗敏等[21]采用RP-HPLC建立女貞子的特征圖譜，并對(duì)14批女貞子飲片特征圖譜中指標(biāo)性成分紅景天苷、酪醇、特女貞苷、槲皮素的含量及環(huán)烯醚萜類（以特女貞苷表征）、黃酮類（以槲皮素表征）的含量進(jìn)行表征，結(jié)合數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析。結(jié)果表明，女貞子飲片特征圖譜中含有酚類特征峰11個(gè)，14批飲片均有此11個(gè)特征峰，其中苯乙醇苷類成分特征峰2個(gè)、環(huán)烯醚萜類成分特征峰5個(gè)、黃酮類成分特征峰4個(gè)。該方法基于特征圖譜的質(zhì)與量及其關(guān)聯(lián)性的系統(tǒng)表征，建立基于藥物體系的女貞子特征圖譜質(zhì)量表征關(guān)聯(lián)分析評(píng)價(jià)模式，評(píng)價(jià)女貞子質(zhì)量整體關(guān)聯(lián)性與應(yīng)用有效性。

楊光明等[22]采用HPLC建立女貞子生品及炮制品的特征紋圖譜，分別標(biāo)定19個(gè)共有指紋特征峰，指認(rèn)出紅景天苷、女貞苷、特女貞苷、oleonuezhenide和橄欖苦苷5個(gè)化學(xué)成分，該方法精密度高、重現(xiàn)性良好，可作為女貞子質(zhì)量控制的參考。許浚等[15]采用HPLC-Q/TOF-MSE建立女貞子的特征圖譜，標(biāo)定14個(gè)共有峰，指認(rèn)出其中12個(gè)色譜峰，10批樣品相似度為0.994～1.000，可為女貞子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

2.5 化學(xué)模式識(shí)別

化學(xué)模式識(shí)別法是近10年來(lái)發(fā)展起來(lái)的方法，可用于中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)[23]，通過(guò)建立各類化合物的光譜、色譜、波譜等數(shù)據(jù)庫(kù)，利用計(jì)算機(jī)模式識(shí)別方法，分析藥物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及構(gòu)-效關(guān)系，從而進(jìn)行藥物真?zhèn)巫R(shí)別、藥材分類等[24]。

張興輝等[25]將女貞子甲醇浸出液的紫外光譜（UV）作為一個(gè)整體進(jìn)行綜合分析，以1 nm間隔測(cè)吸收值，每波長(zhǎng)與特定波長(zhǎng)的吸收度比值作為指標(biāo)，采用Shannon信息理論，對(duì)所有樣本計(jì)算每一波長(zhǎng)通道的信息量，取富含信息量的通道作為分類指標(biāo)，運(yùn)用主成分分析，探求女貞子的品質(zhì)評(píng)價(jià)方法，得出第1主成分特征值λ1=12.635，方差貢獻(xiàn)率為97.192，第2主成分特征值λ2=0.296，方差貢獻(xiàn)率為2.274，2個(gè)主成分的累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為99.467。

曹運(yùn)姣等[26]采用UV-化學(xué)模式識(shí)別鑒別中國(guó)和日本女貞子，基于主成分分析的數(shù)據(jù)和Q型聚類分析結(jié)果，建立快速鑒別女貞子和日本女貞子的判別函數(shù)，準(zhǔn)確性與重復(fù)性較高。該方法準(zhǔn)確、快捷，既反映了女貞子化學(xué)成分的整體性，又對(duì)多指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行降維處理，豐富中藥化學(xué)鑒定的內(nèi)容。

2.6 質(zhì)量標(biāo)志物

中藥質(zhì)量標(biāo)志物是存在于中藥材和中藥產(chǎn)品（飲片、水煎劑、提取物、中成藥制劑）中固有的或加工制備過(guò)程中形成的、與中藥的功能屬性密切相關(guān)的化學(xué)物質(zhì)。作為反映重要安全性和有效性的標(biāo)示性物質(zhì)，相關(guān)研究越來(lái)越受到重視。韓疏影等[27]以特女貞苷為參照物，采用HPLC建立測(cè)定女貞子中紅景天苷、女貞苷、特女貞苷、橄欖苦苷和oleonuezhenide含量的方法，統(tǒng)計(jì)其他成分的相對(duì)校正因子作為定量參數(shù)，同時(shí)統(tǒng)計(jì)其他組分與特女貞苷的相對(duì)保留時(shí)間作為定性參數(shù)。結(jié)果表明，各成分分離良好，系統(tǒng)適應(yīng)性與方法學(xué)考察結(jié)果符合含量測(cè)定要求。在系統(tǒng)適應(yīng)性范圍內(nèi)各相對(duì)校正因子RSD均小于5%，各相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于2%，校正因子法與外標(biāo)法的測(cè)定值無(wú)顯著差異，可用于女貞子質(zhì)量控制。

3 展望

女貞子藥材資源豐富、臨床療效確切且安全性好。目前研究表明，其主要化學(xué)成分有女貞子苷、特女貞苷、齊墩果酸、熊果酸和紅景天苷等，分離技術(shù)的不斷改進(jìn)有望給相關(guān)研究帶來(lái)新的進(jìn)展。質(zhì)量控制方面，主要模式有指標(biāo)性成分分析、指紋圖譜、質(zhì)量標(biāo)志物等，這些質(zhì)量控制手段與方法為該藥材的臨床安全使用提供了有效支撐。隨著女貞子藥材的使用范圍越來(lái)越廣泛，現(xiàn)行的質(zhì)量控制方法仍有巨大的發(fā)展空間。建議后續(xù)質(zhì)量控制研究可從以下幾方面開展：①針對(duì)女貞子的不同功效，對(duì)其發(fā)揮臨床療效的藥效物質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)辨識(shí)，以藥效物質(zhì)辨識(shí)結(jié)果為基礎(chǔ)，建立基于藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的質(zhì)量控制方法。②利用新技術(shù)、新方法對(duì)女貞子質(zhì)量控制進(jìn)行研究的同時(shí)，加強(qiáng)中醫(yī)藥理論體系在其中的指導(dǎo)作用，探索符合中醫(yī)藥特色的質(zhì)量控制模式。③注重女貞子發(fā)揮功效的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵闡釋方面的研究，建立基于生物標(biāo)志物方面的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法與模式，以期從生物學(xué)信息方面實(shí)現(xiàn)女貞子質(zhì)量的有效控制。

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