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      食品微生物檢測中快速檢測法的應用探究

      2018-12-07 06:43:19朱倩倩胡妍
      商品與質量 2018年47期
      關鍵詞:計數法流式磁珠

      朱倩倩 胡妍

      嵊泗縣市場監(jiān)督管理檢驗檢測中心 浙江舟山 202450

      1 傳統(tǒng)檢測方法

      1.1 瓊脂平板培養(yǎng)法

      瓊脂平板培養(yǎng)法包括選擇性培養(yǎng)基檢測方法和顯色培養(yǎng)基檢測方法。選擇性培養(yǎng)基檢測方法利用不同微生物化學物質及其敏感度的差異性,在瓊脂平板培養(yǎng)基中,加入具有抑制效果的化學制劑,可對某種微生物的生長產生一定影響,從而對其進行檢測。顯色培養(yǎng)基檢測方法利用生物化學反應進行檢測,在瓊脂平板培養(yǎng)基中適當的加入細菌特異性酶顯色物質,從而使其所檢測的菌群發(fā)生顏色的變化,根據所呈現的變化情況判斷該物質的數量以及存在狀況檢測微生物種類,這種方法是目前檢測食品微生物致病菌最常見的傳統(tǒng)方法之一。調查結果顯示,檢測過程中存在部分微生物感染不能全部檢測出來的情況,并且所獲得的檢測結果還可能是假陰性[1]。

      1.2 顯微鏡檢測方法

      將待測食品中的微生物進行富集,之后將其滴在放置好的載玻片上,用準備好的蓋玻片將其蓋好后,向其中適當的添加香柏油鏡檢。

      2 免疫學方法

      2.1 免疫層析技術

      在免疫測定技術中,免疫層析是一種新興的方式,其檢測主要是在相應的膜毛細血管作用下,檢測的物質發(fā)生定向移動,且在這個過程中,有效地實現抗原抗體的融合、固化和分離,最后根據顏色的變化來判斷食品的合格性。但是據目前的調查結果來看,最受歡迎以及應用最多的是金免疫層技術,它所應用的范圍非常廣泛,所涉及的食品行業(yè)也非常多。與其他技術相比較,金免疫層技術操作簡易,且不會造成任何污染。另外該技術在沙門氏菌、布氏桿菌的檢測方面,也取得了良好的效果[2]。

      2.2 免疫磁珠技術

      免疫磁珠法將磁珠微球技術與免疫化學技術進行有效地結合,具有快速性和高效性。

      2.3 酶聯免疫吸附技術

      酶聯免疫吸附技術主要是將放射免疫技術和熒光技術相結合,同時應用該技術進行檢測時,必須要將其具有的抗原抗體特異性充分利用起來,另外將免疫酶進行染色,可有效實現食品微生物的快速檢測目標。

      2.4 免疫熒光技術

      免疫熒光技術能夠對食品中含有的活性抗原體進行熒光標記,肉眼是觀察不到其熒光所在的,只有在相應的顯微鏡下才能觀察到其熒光,從而有效地對食品微生物進行快速的檢測。

      2.5 乳膠凝集試驗

      乳膠凝集試驗獲得的結果比較直觀的,其主要是通過在抗體上被大分子乳膠顆粒標記,同時又和待測的微生物發(fā)生凝集的現象,以此來達到檢測的目的。這種方法在免疫檢測中是比較常見的一種,且檢測效果十分可觀。

      3 分子生物學檢測法

      PCR技術與基因芯片技術為生物分子技術中的兩大代表性技術。以聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,簡稱PCR)為例,該技術模仿DNA的天然復制過程,對不同物質中的微生物進行測量。采用該方法檢測,首先需對DNA進行變性,使其形成單鏈DNA[3]。在此基礎上,經退火、延伸等過程,既可得到最終的檢測結果。當前,部分PCR擴增區(qū)較短。因此,Taq酶的活性,對DNA復制時間的影響較為有限。將PCR技術,應用到食品微生物檢測過程中,同樣能夠使檢測效率得以提升。與傳統(tǒng)的鏡檢法相比,優(yōu)勢顯著。

      4 細菌計數法

      4.1 流式法

      流式法主要是指充分利用激光技術識別細胞的濃度。流式法主要流程如下:①選擇好檢測樣品,之后通過激光進行照射。②檢測者要時刻對樣品的變化進行密切觀察,看是否存在著反射現象。③詳細分析檢測的樣品,其中包括細胞的大小以及和散射光之間的聯系、激光亮度和細胞膜的抗原強度之間的密切關系。④得出最終結果,并且進行詳細的記錄。合理地應用流式法,不但能夠將微生物的形狀進行快速的檢測,同時對于所含有的菌群數量也依然能夠準確的檢測出來。

      4.2 固定式計數法

      固定式計數法也是常見的檢測方法之一,又被稱為SPC計數方法,這項技術方法具體應用于單個微生物或者革蘭氏陰性菌的檢測,這個方法與其他的檢測方法相比更準確。

      5 傳感器檢測方法

      5.1 基因傳感器法

      基因傳感器法主要是在傳感器上固定一個已知核苷酸序列的DNA分子單鏈,同時要讓其和另一條相關的DNA單鏈雜交,從而有效的構成一條新的雙鏈DNA,這樣能夠將物理信號通過換能器準確地反映以及傳達出來。基因傳感器所應有的優(yōu)勢是具有較高的靈敏性以及在操作上是比較容易操作的?,F如今我國所呈現的基因傳感器是多種多樣的,但是主要將其概括為石英晶體振蕩器以及電極電化學式基因傳感器2種。

      5.2 生物傳感器

      應用生物傳感器進行有效的檢測,主要是將被測物質放在生物接收器的敏感材料上,同時出現一系列的化學反應現象,所表現的現象可能是顏色以及離子強度發(fā)生了改變,或者有強烈的信號發(fā)出。這個生物傳感器所具有的優(yōu)點就是靈敏度較高。

      6 結語

      食品是人們生活的基礎,所以食品的檢測已經成為了目前國家重點關注的問題,但在生產的過程中總是由于各種外在的因素導致食品中有剩余的微生物細菌存留,而這些細菌是肉眼觀察不出來的,所以需要采用進行微生物檢測,食品檢測中合理的引用快速檢測方法,可有效提升食品的檢測效率。

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