李佩 王波

國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利局專利審查協(xié)作四川中心 四川成都 610200

伴隨社會(huì)經(jīng)濟(jì)的持續(xù)發(fā)展，有力推動(dòng)著現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)的大發(fā)展、大繁榮，其日漸規(guī)?；诩s化；為了最大程度獲得商業(yè)利益，將高密度飼養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)降至最低，一些養(yǎng)殖戶出現(xiàn)盲目、濫用獸藥的現(xiàn)狀。在各種動(dòng)物源食品當(dāng)中，如果存在獸藥殘留，便會(huì)經(jīng)食物鏈而毒害人體。需要指出的是，因動(dòng)物源食品有著比較復(fù)雜的基質(zhì)，其中含有許多化合物，比如糖類、脂肪、蛋白質(zhì)等，而其中殘留的獸藥含量并不多，這使得檢測(cè)動(dòng)物源食品當(dāng)中的獸藥殘留工作變得更加復(fù)雜，因而非常需要一種實(shí)用、高效的檢測(cè)分析技術(shù)，本文從多方面、多角度就用于檢測(cè)獸藥殘留的高通量快速分析檢測(cè)技術(shù)作一探討與分析。

1 制備高通量樣品及主要凈化技術(shù)

1.1 日本一齊分析法

早在2005年，日本某省根據(jù)本地區(qū)發(fā)展需要，頒布了《食品中殘留農(nóng)藥獸藥飼料添加劑檢測(cè)方法》，也就是我們所說(shuō)的一齊試驗(yàn)法。此方法不僅囊括了諸如乙腈提取及無(wú)水硫酸鈉、正己烷除水等方法，而且還涉及乙腈/正己烷分配、合成硅酸鎂柱色譜法等。除此之外，還涵蓋提取乙腈-甲醇-0.2%偏磷酸混合溶液等分析檢測(cè)方法，這些方法能夠?qū)π?、水產(chǎn)品當(dāng)中的大部分化合物進(jìn)行檢測(cè)。而基于整體試驗(yàn)來(lái)分析，方法不同，其所包含的化合物種類便存在差異，另外，當(dāng)針對(duì)同一化合物采用不同的方法時(shí)，其所需要的檢測(cè)條件會(huì)存在差異。而基于試驗(yàn)結(jié)果層面來(lái)分析，部分化合物有著比較低的回收率，究其原因，可能因?yàn)槠渑c一齊法有著過(guò)多的處理步驟，以及有著較高的凈化程度要求等因素相關(guān)。

1.2 柱切換在線凈化-色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

針對(duì)柱切換技術(shù)而言，其又被稱作多柱色譜、順序色譜，實(shí)為一種比較常見且實(shí)用的在線固相分離技術(shù)，能通過(guò)對(duì)樣品的簡(jiǎn)單處理，便可以完成復(fù)雜樣品基質(zhì)當(dāng)中的各種待測(cè)無(wú)進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。對(duì)于柱切換系統(tǒng)來(lái)講，其主要由切換閥、多個(gè)預(yù)柱、多個(gè)泵、分析柱及多個(gè)多種流動(dòng)相構(gòu)成。在采用分析柱對(duì)試樣進(jìn)行分析前，首先需要在預(yù)柱上實(shí)施濃縮富集處理，將待測(cè)物保留于預(yù)柱上，而對(duì)于其中的雜質(zhì)來(lái)安靜，會(huì)被洗脫，然后進(jìn)入到指定的廢液池當(dāng)中。最后借助切換閥，選擇一些新的流動(dòng)相沖洗預(yù)柱，待測(cè)物會(huì)被重進(jìn)分析柱中，實(shí)施分離處理，最后進(jìn)檢測(cè)器，開展檢測(cè)分析。

2 高通量樣品檢測(cè)技術(shù)

2.1 高分辨率質(zhì)譜技術(shù)

當(dāng)前，在對(duì)動(dòng)物源食品當(dāng)中的獸藥殘留進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，其方式、方法已經(jīng)發(fā)生根本性改變，已經(jīng)從之前的目標(biāo)型LC-QqQ-MS檢測(cè)，開始轉(zhuǎn)變?yōu)榫_質(zhì)量非目標(biāo)型HRMS全掃描檢測(cè)。針對(duì)LC-QqQMS技術(shù)來(lái)講，將其定量分析中的應(yīng)用，有著較大優(yōu)勢(shì)，但也有不足的地方。比如只有那些采質(zhì)譜方法所涉及到的化合物，才能被檢測(cè)到，存在著相對(duì)有限的化合物分析數(shù)量，需對(duì)各化合物的各種參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，這樣較為耗費(fèi)時(shí)間，而且在干擾基質(zhì)時(shí)，較為敏感，一些樣品制備方法復(fù)雜程度高；而對(duì)于那些有著相近分子量的化合物，能顧對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分，這勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性。而相比于QqQMS，HRMS多借助保留時(shí)間及精確質(zhì)量數(shù)的方式，來(lái)定性識(shí)別待測(cè)物。針對(duì)HRMS的各種參數(shù)而言，在設(shè)定時(shí)操作步驟簡(jiǎn)單，以真實(shí)的同位素峰型分布為基礎(chǔ)的測(cè)定能力，以及以真實(shí)高分辨能力為基礎(chǔ)的高準(zhǔn)確度，其精確質(zhì)量數(shù)能夠?qū)⒃氐幕緲?gòu)成呈現(xiàn)出來(lái)，因而能夠提供與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相關(guān)的信息，可以消除基質(zhì)所造成的干擾，區(qū)分樣品背景相近的待測(cè)物于干擾物質(zhì)，因而大幅降低了分析檢測(cè)中對(duì)色譜分離所具有的各項(xiàng)要求。

2.2 生物芯片與生物傳感器技術(shù)

（1）蛋白芯片技術(shù)。上個(gè)世紀(jì)80年代，生物芯片首次誕生，其從出現(xiàn)之日起，便被學(xué)界所重視，經(jīng)過(guò)近些年的不斷發(fā)展與完善，其已經(jīng)成為融合化學(xué)、生物學(xué)、微電子學(xué)及計(jì)算機(jī)科學(xué)等學(xué)科的綜合化、多元化的技術(shù)類型。在生物芯片當(dāng)中，集成了許多呈密集排列狀態(tài)的分子微陣列，能夠在比較短的時(shí)間內(nèi)，對(duì)大量的生物分子進(jìn)行準(zhǔn)確、全面分析，因而有著顯著高于傳統(tǒng)檢測(cè)方法的效率。（2）懸浮芯片技術(shù)。此技術(shù)把酶標(biāo)檢測(cè)技術(shù)與流式細(xì)胞技術(shù)相整合，從而形成一種功能強(qiáng)大，及涉及領(lǐng)域?qū)挿旱纳镄酒夹g(shù)平臺(tái)，同時(shí)還是一種繼蛋白芯片、基因芯片后，另外一種新型的高通量分子檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)，其靈敏度高，操作簡(jiǎn)便且快速，而且還有著較低的成本，因而在動(dòng)物源食品獸藥殘留檢測(cè)中，有著廣闊的應(yīng)用價(jià)值。（3）表面等離子共振生物傳感器技術(shù)。此技術(shù)也被廣泛應(yīng)用在獸藥殘留檢測(cè)中，其原理是：首先把可以結(jié)合待測(cè)物的物質(zhì)，以一種有效方式固定于芯片表面上，使之形成配基，當(dāng)連續(xù)注射待測(cè)物，使其位于芯片表面，此時(shí)，兩者便會(huì)結(jié)合在一起，改變芯片表面的光學(xué)參數(shù)，并且以電信號(hào)而被呈現(xiàn)出來(lái)；特異結(jié)合待測(cè)物的量與信號(hào)的響應(yīng)強(qiáng)度之間呈現(xiàn)正相關(guān)。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上，針對(duì)食品安全檢測(cè)工作來(lái)講，當(dāng)前雖然取得了可喜成就，但許多地方仍需完善與更新，不僅要在技術(shù)層面上給予完善與提升，還需要做好管理工作，強(qiáng)化獸藥等產(chǎn)品的生產(chǎn)、注冊(cè)方面的管理，健全相關(guān)法律體系，加大宣傳力度，消除前期隱患與問(wèn)題，提高動(dòng)物源產(chǎn)品的質(zhì)量。