紫淮山快速繁殖技術(shù)

陳禮芬 岳海林 謝秀鳳 梁春輝

（廣東農(nóng)工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 廣州 510000）

淮山（Dioscorea fordiiPrain et Burkill），又名薯蕷，俗稱廣山藥、懷山藥、淮山藥，簡稱“淮山”，為薯蕷科（Dioscoreaceae）薯蕷屬（Dioscorea L.）攀緣性草本植物［1］，在我國已有2 500年以上的栽培歷史，是一種藥食兼用的高產(chǎn)、高效經(jīng)濟(jì)作物［2］?；瓷揭郧o和珠芽（中藥稱為零余子，俗稱山藥蛋）入藥，塊莖含皂甙、甘露聚糖、膽堿、多巴胺、山藥素Ⅰ、精氨酸、蛋白質(zhì)和碘質(zhì)等成分，性平、味甘，具有健脾止瀉、補(bǔ)肺益腎等功能。塊莖同時含有豐富的淀粉、糖纖維素等碳水化合物，除藥用外，還是味美可口的食物［3-4］。

紫淮山為薯蕷科薯蕷屬藤本植物，塊莖長紡錘或柱形，表皮紫褐色，塊莖斷面顯紫色，屬于紫紅肉品種群。目前，紫淮山主要分布在我國南方沿海地區(qū)，并有向南方其他城市深入推廣和繁育的趨勢［1-2］。據(jù)《本草綱目》記載，淮山有益腎氣、健脾胃、止瀉痢、潤皮毛等功效［3］。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，對淮山成分的研究日趨精細(xì)化，有關(guān)淮山藥食性的利用研究也日趨廣泛［4-5］。

1 材料與方法

1.1 材料

以溫室大棚中培育的紫淮山為組培材料，選取健壯的、無病蟲害的莖段，剪取莖粗2 mm以上的健壯莖段。

1.2 方法

1.2.1 無菌材料的獲得。將剪取的莖粗2 mm以上的健壯莖段用自來水沖洗2 h后，剪去葉片，切成中間只留一個芽的3 cm莖段，用洗潔精洗一次，自來水沖洗三四次，再用0.1%氯化汞溶液滅菌12 min，用無菌水沖洗6次，再用75%酒精滅菌30 s，用無菌水沖洗3次［6］。需要注意的是，一般初代取干凈無毒無病菌的莖段，越是嫩的莖段（幼嫩紫淮山見圖1），其全能性的表達(dá)越強(qiáng)，嫩芽作為初代材料時消毒時間不宜過長，否則很容易對嫩芽造成傷害。

圖1 紫淮山

1.2.2 不同濃度NAA對紫淮山初代培養(yǎng)的影響。將莖段插入不同配方的培養(yǎng)基中，其中1號培養(yǎng)基的成分為MS+BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，2號為MS+BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，3號為MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，以上培養(yǎng)基的pH值為5.8。培養(yǎng)條件：溫度為24～26℃，光照強(qiáng)度為1 000～1 800 lx，光照時間12～14 h/d。觀察并記錄。

1.2.3 不同濃度6-BA對紫淮山增殖培養(yǎng)的影響。將初代長出的萌芽接到3種培養(yǎng)基中，其中1號培養(yǎng)基的成分為MS+KT 2.0 mg/L+BA 0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8g/L，2號為MS+KT2.0mg/L+BA1.0mg/L+糖30.0g/L+瓊脂6.8 g/L，3號為MS+KT 2.0 mg/L+BA 1.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，以上培養(yǎng)基的pH值為5.8。培養(yǎng)條件：溫度為24～26℃，光照強(qiáng)度為1 000～1 800 lx，光照時間12～14 h/d。觀察并記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度NAA對紫淮山初代培養(yǎng)的影響

如圖2所示，接種30 d后，1號與2號培養(yǎng)基的材料只生長根，腋芽的萌發(fā)受到抑制，營養(yǎng)大多數(shù)供于根的生長，因此，紫淮山不僅存在頂端優(yōu)勢（其頂芽的生長會抑制側(cè)芽的生長），而且存在根與芽的競爭關(guān)系，在環(huán)境許可的情況下，紫淮山的根生長旺盛會抑制腋芽的生長。3號培養(yǎng)基中，腋芽萌發(fā)最好，生長旺盛，根的生長被抑制。

2.2 不同濃度6-BA對紫淮山增殖培養(yǎng)的影響

如圖3所示，在增殖培養(yǎng)過程中，2號培養(yǎng)基中芽生長情況最好。1號芽的分生多，但長勢較弱，葉子為淡綠色；2號培養(yǎng)基中材料葉子是紫紅色，發(fā)育較快；3號長勢也很好，較為粗壯，但是芽的分生少。培養(yǎng)基中添加1.0 mg/L 6-BA時有利于促進(jìn)紫淮山的芽分化和發(fā)育，濃度過高會抑制芽的分化，太低會影響芽的生長。

圖2 不同濃度NAA培育的初代紫淮山

圖3 不同濃度6-BA增殖培養(yǎng)的紫淮山

3 結(jié)論

為了找到紫淮山的初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)的配方，為建立紫淮山快速繁殖體系提供一定的參考，本文利用不同培養(yǎng)基對紫淮山的外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。結(jié)果表明，初代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+KT 2.0 mg/L+BA1.0 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L。